基因测序技术在临床检验领域的应用及国内外监管现状比较研究

基因测序技术是现代分子生物学研究中最常用的技术,从1977年第一代测序技术的出现,经过四十多年的发展,基因测序技术取得了重大进展,尤其以高通量为特点的第二代测序技术正在逐步应用于临床检测中。本文介绍了基因测序技术的发展及国内外第二代测序技术在临床应用中的监管制度和监管建议。     

变形杆菌产超广谱β-内酰胺酶的检测及其耐药现状

目的检测变形杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)并了解其耐药情况。方法对54株本院分离的变形杆菌进行耐药性分析、转移接合实验、ESBLs的初筛及确证实验、ESBLs的基因型检测。结果表型筛选出8株ESBLs阳性株,PCR扩增出4株阳性(3株为TEM型,1株为CTX-M-13型)。所有菌株对亚胺培南均敏感(100%),其次为阿米卡星(89.5%)和氧哌嗪青霉素/他唑巴坦(84.8%)。结论及时准确检测产ESBLs变形杆菌对指导临床合理用药、避免此类变形杆菌引起的暴发流行感染有重要意义。     

GST-π、Ki-67的表达与体质量指数在直肠癌预后中的临床意义

目的：探讨直肠癌组织GST-π、Ki-67的表达及患者体质量指数（BMI）与患者临床生物学特征的相关性及临床意义。方法：收集温州医科大学附属第二医院2010年1月至2013年1月共308例直肠癌患者的临床资料、术后病理及5年生存率。分析BMI及肿瘤指标（GST-π、Ki-67）的表达与患者临床及病理特征的相关性,进一步分析BMI与GST-π、Ki-67表达之间的相关性及临床意义。分析Ki-67高阳性患者5年生存率与BMI的关系。结果：肿瘤组织Ki-67的高表达与TNM分期、组织浸润深度及术后5年生存率低相关（P ＜0.05）。与正常BMI组相比,消瘦组且Ki-67的表达高阳性患者5年生存率偏低（P ＜0.05）。GST-π的阳性表达与消瘦、肿瘤位置低、淋巴结转移及较高的TNM分期显著相关（P ＜0.05）。结论：结合分析BMI与GST-π、Ki-67的表达水平及相关性,对评估肿瘤的恶性度、预后情况起到重要作用。     

清热解毒药物配伍桔梗对COPD大鼠模型病理形态的影响

目的观察清热解毒药配伍桔梗对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型病理形态学的影响,探讨桔梗在COPD治疗中的作用。方法采用气管注脂多糖加熏香烟联合造模方法建立COPD大鼠模型,设立假手术组、模型组及5个中药组(桔梗组、桔甘组、银翘组、桔银翘组、桔甘银翘组)。假手术组、模型组灌胃生理盐水,各给药组灌胃相应中药,连续28天。在光镜、电镜下分别观察不同组大鼠病理形态学的改变,并对病理切片进行半定量分析,观察各组肺平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡数(MAN)变化。结果病理结果显示COPD模型组与假手术组相比肺组织结构严重受损,炎症细胞增多。桔梗组、桔甘组、银翘组对COPD病理改变与模型组相比均无明显差异;桔银翘组、桔甘银翘组与COPD模型组相比病理改变具有明显改善。半定量分析显示桔银翘组MLI较模型组有显著差异(P<0.05);桔甘银翘组MAN较模型组有极显著性差异(P<0.01)。结论清热解毒药物配伍桔梗,在COPD的治疗过程中能够发挥增效(引经)作用,增加甘草具有协同增效(引经)作用。     

MicroRNA-30a、microRNA-181a在原发免疫性血小板减少症中的表达及其临床意义

目的 检测原发免疫性血小板减少症（ITP）患者外周血单个核细胞（PBMC）microRNA-30a（miR-30a）、microRNA-181a（miR-181a）的表达,并分析其临床意义。方法 选取2020年1月—2020年12月昆明医科大学第一附属医院收治的ITP患者48例作为ITP组,另取同期该院40例化疗后骨髓抑制血小板减少患者作为对照组,体检健康者45例作为健康组。检测3组血小板计数（PLT）、平均血小板体积（MPV）,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测PBMC中miR-30a、miR-181a的表达,分析miR-30a、miR-181a与血小板参数的相关性,以及对ITP的诊断价值。结果 ITP组miR-30a、miR-181a相对表达量高于对照组和健康组（P <0.05）;ITP组PLT、MPV低于对照组和健康组（P <0.05）。miR-30a与PLT、MPV呈负相关（r =-0.278和-0.247,P <0.05）,与出血分级呈正相关（r =0.221,P <0.05）;miR-181a与PLT、MPV呈负相关（r =-0.224和-0.301,P <0.05）,与出血分级呈正相关（r =0.236,P <0.05）。miR-30a［O^R=1.876（95% CI：1.230,6.336）］和miR-181a［O^R=2.665（95% CI：1.365,8.558）］升高是发生ITP的独立危险因素（P <0.05）。以miR-30a、miR-181a及其回归系数建立临床模型的多元回归方程Logistic（P）=-4.115+1.305×MPV-1.258×miR-30a-1.664×miR-181a。该临床模型诊断ITP的标准误为0.055,AUC为0.889（95% CI：0.662,0.956）,敏感性为75.25%（95% CI：1.123,2.084）、特异性为88.24%（95% CI：1.672,2.583）。结论 miR-30a、miR-181a与ITP发生相关,通过miR-30a、miR-181a建立个体化临床模型可准确判断ITP的发生,且具有较高的临床实用价值。     

累及眼部的Stevens-Johnson综合征患者的围手术期护理

目的 探讨Stevens-Johnson综合征患者眼部手术围手术期的护理措施。方法 总结2010年1月至2015年11月在复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科病房接受手术治疗的5例Stevens-Johnson综合征患者的临床资料,对其治疗方案、护理措施等进行回顾性分析。 结果 5例患者均痊愈出院,视力均得到不同程度提高,未出现感染、出血等并发症。结论 Stevens-Johnson综合征好发于男性,首发症状以结膜炎为主,及时有效的治疗能够显著改善患者眼部症状,同时加强心理护理、用药护理、眼部护理,并制定个体化的护理方案有助于改善患者的预后。     

卵巢浆液性、黏液性囊腺癌DNA拓扑异构酶的表达

目的：探讨DNA拓扑异构酶在卵巢浆液性,黏液性囊腺癌中的表达及与细胞增殖,凋亡的关系。方法：应用免疫组化S－P法检测石蜡包埋的71例卵巢浆液性,黏液性囊腺癌组织切片中DNA拓扑异构酶Ⅱ（DNA topoisomeraseⅡ,TOPOⅡ）表达和细胞增殖指数（Ki-67 labeling index,Ki-67 LI)和应用原位末端标记技术（TUNEL）检测细胞凋亡指数（apoptosis index,AI).结果：TOPOⅡ高表达为36．6％（26／71）,与组织学类型,FIGO分期和组织学分级差异无显著性（P＞0．05）;Ki-67 LI高表达为43．7％（31／71）,与FIGO分期差异有显著性（P＜0．001）;AI高表达为25．6％（18／71）,与组织学分级,FIGO分期和组织学分级均差异无显著性（P＞0．05）,但AI与TOPOⅡ表达有相关（P＜0．01）。结论：应用免疫组化方法检测组织中TOPOⅡ和Ki-67LI水平,对卵巢浆液性,黏液性囊腺癌化疗方案选择和预后判断具有实用意义。     

2015—2021年CHINET临床分离沙雷菌属细菌耐药性变迁

目的 了解国内主要地区临床分离沙雷菌属细菌对常用抗菌药物的耐药率及变迁。方法 由CHINET中国细菌耐药性监测网参与成员单位将临床分离菌采用纸片扩散法或自动化商业药敏测试系统按CHINET统一技术方案进行仪器法药物敏感性试验。结果 2015年1月—2021年12月从我国不同地区53所医院临床分离到的沙雷菌属17 226株。分离的菌株数从2015年959株上升到2021年3 588株,自门急诊患者中分离到的沙雷菌占7.3%(1 265/17 226),住院患者菌株占92.7%(15 961/17 226)。17 226株沙雷菌属细菌中呼吸道标本占比最高(57.5%±2.5%),其次为血液标本(11.5%±1.5%)。7年连续监测发现除氨苄西林、头孢唑林及呋喃妥因外其他抗菌药物细菌耐药率均有所下降,亚胺培南和美罗培南虽然耐药率数值有所反复,但仍从8.1%和8.3%降到5.3%和5.2%。成年患者来源的菌株对头孢哌酮-舒巴坦、头孢他啶-阿维巴坦、头孢噻肟、亚胺培南、呋喃妥因和替加环素耐药率三级医院高于二级医院,其他抗菌药物耐药率均低于二级医院。分离自儿童患者的沙雷菌对头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西...     

中西医结合治疗6例疱疹性葡萄膜炎的体会

我院收治6例(10眼)疱疹性葡萄膜炎病人,均采用中西医结合方法进行治疗,收到了很好的治疗效果,现报告如下.     

原发性高血压24 h平均脉压与左室肥厚关系的Meta分析

目的:从循证医学角度探讨24h平均脉压(APP)与原发性高血压左心室肥厚(LVH)的关系.方法:应用Meta分析的方法比较原发性高血压有LVH组与无LVH组APP值,采用Revman 4.2.2统计学软件,以加权平均数为效应量进行合并分析.结果:8个研究的合并效应量为-7.61,95%可信区间为-8.72～-6.49,合并效应检验Z=13.36(P＜0.01).结论:原发性高血压APP与LVH密切相关.APP增大是高血压性LVH的高危因素.