弓形虫分泌蛋白ROP5的全基因原核重组表达与抗原性鉴定

目的在大肠杆菌工程菌中重组表达刚地弓形虫RH株棒状体蛋白5(ROP5)的融合蛋白GST-6×His-ROP5,并初步评价重组蛋白的抗原性。方法体外细胞培养弓形虫速殖子,提取总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增ROP5基因全长,与pET-41 Ek/LIC载体通过基因重组直接连接,在大肠杆菌RosettaTM(DE3)pLysS工程菌中诱导表达重组融合蛋白,最后通过Western blotting鉴定重组蛋白rROP5的抗原性。结果构建了弓形虫ROP5全基因重组表达质粒,诱导表达了GST-6×His-ROP5融合蛋白,分子量为96 kDa,与预测结果相符,重组蛋白与人源抗血清有显著免疫印迹反应。结论本研究获得了弓形虫ROP5全长重组蛋白,为进一步改进弓形虫诊断抗原,研究蛋白结构以及分泌蛋白与宿主细胞的相互作用奠定了基础。     

PCR快速检测腹泻患者粪中痢疾杆菌致病基因ipaH和ial

目的: 建立一种快速、特异、敏感的分子生物学诊断方法对腹泻患者粪中痢疾杆菌致病基因ipaH及ial进行检测.方法:分别应用常规培养生化血清学鉴定方法、普通PCR、巢氏PCR(nested-PCR)方法, 对71例腹泻患者粪标本进行检测. 痢疾杆菌致病基因ipaH及ial的扩增产物经电泳分离.结果: 在71例腹泻患者粪标本中, 常规培养生化血清学鉴定方法分离出福氏痢疾杆菌24例, 宋内痢疾杆菌23例, 志贺痢疾杆菌1例, 沙门菌23例. 采用普通PCR法检测痢疾杆菌粪标本48例, ipaH基因均阳性(100%);ial基因阳性34例(70.8%), 余14例为阴性. 对该14例粪标本进而采用巢氏PCR法进行ial基因扩增, 其中12份标本阳性. 48例痢疾杆菌粪标本中46例ipaH和ial基因为双阳性(46/48). 沙门菌粪标本23例中ipaH及ial基因表达均为阴性. 以上两种方法的诊断一致性检验Kappa = 0.937, 差异有统计学意义(P<0.05). 71例腹泻患者粪标本采用PCR和巢氏PCR法扩增得到的ipaH和ial基因特异片段与基因库中发表的标准菌株序列比较, 一致性为100%.结论:建立了快速诊断腹泻患者粪中痢疾杆菌致病基因ipaH和ial的PCR检测方法, 具有简便、快速、特异和敏感的特点.     

医学微孢子茵研究概况

微孢子菌病是一种新发现的机会性感染,常见于AIDS感染者、器官移植患者、儿童、旅行者、角膜接触镜佩戴者及老年人,可表现出广泛的临床综合征。本文对医学微孢子菌生物学和种属特征等方面的研究概况进行综述。     

实时荧光PCR检测非HIV感染人群肺孢子菌核酸载量

肺孢子菌肺炎是一种由耶氏肺孢子菌引起的呼吸系统机会性感染,见于免疫功能低下或缺陷者~([1-2]).近年来,接受高效抗逆转录病毒治疗(HAART)和肺孢子菌肺炎预防措施的HIV感染发生肺孢子菌肺炎的概率明显减少[1,3],但随着癌症患者、器官移植者、老年患者、先天性或获得性免疫缺陷及因其他疾病而接受免疫抑制剂者等其他肺孢子菌肺炎高危人群的扩大,临床肺孢子菌肺炎患者日趋增多~([4-5]).鉴于肺孢子菌肺炎患者的临床症状、体征、X线胸片及常规实验室检查均无特异性,病原体检出率较低,血清抗体检测因健康人群抗耶氏肺孢子菌抗体阳性率较高而无临床意义等,肺孢子菌肺炎的早期诊断比较困难.     

18例误诊为肺结核的胸肺型并殖吸虫病患者临床特点分析

目的探讨误诊为肺结核的胸肺型并殖吸虫病患者的临床特征、实验室检查结果和影像学特点,分析误诊原因,为临床医师进行鉴别诊断提供依据。方法收集并分析首都医科大学附属北京友谊医院在2016年2月—2019年2月收治确诊的18例误诊为肺结核的胸肺型并殖吸虫病患者的病例资料。结果 18例胸肺型并殖吸虫病患者的主要临床表现是发热、咳嗽和胸腔积液。此外,5例患者出现腹痛,3例患者出现皮下结节,1例患者出现头痛,18例患者均有明确的流行病学史。15例患者并殖吸虫IgG抗体呈阳性;17例患者外周血嗜酸性粒细胞水平升高;16例患者出现胸腔积液,其中左侧胸腔积液4例,右侧胸腔积液5例,双侧胸腔积液7例,胸水均为渗出液;胸部CT见10例患者表现为索条、实变及磨玻璃密度灶,6例出现肺部多发结节,3例出现胸膜肥厚。18例患者使用吡喹酮治疗后均达到临床治愈标准。结论本文通过系统总结18例误诊为肺结核的胸肺型并殖吸虫病患者的流行病学史、临床表现和实验室检查结果,为提高临床医师对该病的鉴别诊断提供依据,避免误诊、误治。     

Cost for several immuno-diagnostic systems in trichinosis developed in recent ten years

ＣｏｓｔｆｏｒｓｅｖｅｒａｌｉｍｍｕｎｏｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓｙｓｔｅｍｓｉｎｔｒｉｃｈｉｎｏｓｉｓｄｅｖｅｌｏｐｅｄｉｎｒｅｃｅｎｔｔｅｎｙｅａｒｓＷｅｎＹａｎ温艳，ＺｈａｎｇＹｕｅｑｉｎｇ张月清，ＷｕＺｈａｏｙｏｎｇ吴赵永，ＨｕａｎｇＭｉｎｊｕ...     

耐药志贺菌1类整合子的研究

目的分析我院志贺菌的流行菌株类型和耐药特点,研究志贺菌1类整合子的检出率、与耐药的相关性及其携带的耐药基因盒。方法从本院肠道门诊腹泻患者的粪便标本分离出70株志贺菌,以K-B琼脂法测定药敏情况;PCR扩增1类整合子可变区并进行序列测定和基因盒分析。结果70株志贺菌对四环素、复方新诺明、氨苄西林、利福平、萘啶酸的耐药率均>60%;对喹诺酮类常用药诺氟沙星耐药率较低,为12.8%;对头孢菌素类的耐药率≤10%。多重耐药率较高,达到77.1%。16株(22.9%)志贺菌中检出1类整合子。其中8株检出大小约为1 900 bp的1类整合子,测序显示含有编码对甲氧苄啶耐药的基因盒dhfrXⅡ和对氨基糖苷类耐药的基因盒aadA2,另8株检出大小约为1 000 bp的1类整合子,测序显示含有编码对氨基糖苷类耐药的基因盒aadA2。结论本院志贺菌流行株主要是福氏和宋内氏志贺杆菌,多重耐药率较高。志贺菌中存在1类整合子,与志贺菌的耐药具有相关性     

耐药志贺菌中2类整合子的分析研究

由志贺菌感染引起的细菌性痢疾是急性腹泻的重要病因之一。志贺菌对抗菌药物耐药的发生率逐渐增加是控制细菌性痢疾的一个主要难题。研究表明多种机制包括可移动的遗传因素如质粒和转座子参与了细菌抗生素耐药性的传播，滥用药物和基因水平传播导致了志贺菌对常用抗生素产生了耐药性。国外文献报道，志贺菌中主要存在2类整合子，并且与志贺菌耐药相关。     

应用单抗和多抗双抗体夹心—ELISA检测旋毛虫病人血清循环抗原

应用单抗双抗体夹心—ELISA和多抗双抗体夹心—ELISA检测旋毛虫病人血清循环抗原,其阳性率分别为67.7％(21/31)和72.2％(26/36),无显著件差异(P>0.05)。50例正常人两法皆为阴性。142例其它9种寄生虫病人中,两法除对20例囊虫病人中1例(5.0％)出现轻度交叉反应外均为阴性。对河南省新野县从事食品卫生人员调查,两法的阳性率分别为5.7％和5.9％,差异不显著。对两法循环抗原均呈阳性反应的14例进行了追踪观察,其中13例确诊为旋毛虫隐性感染。     

PCR及GMS染色法对肺孢子虫肺炎的临床诊断价值

目的评价PCR及六胺银(GMS)染色法对肺孢子虫肺炎(PCP)的临床诊断价值。方法用PCR及GMS染色法检测临床拟诊PCP患者及非PCP患者的痰液标本,比较两种方法的敏感性和特异性。结果在40例临床拟诊PCP患者的痰标本中,用PCR方法检测肺孢子虫DNA,结果均为阳性,其中有12例患者用SMZ治疗后复检,PCR全部转阴;而用GMS染色镜检,阳性率仅为35.0%(14/40)。20例非PCP呼吸道感染者的痰液PCR和GMS染色镜检结果均为阴性。结论用GMS染色法诊断PCP,特异性高但敏感性差;PCR的敏感性高于GMS染色法,适于临床筛查和疗效考核。