河南省腹泻患者中鼠伤寒沙门菌单相变异株的分子流行特征研究

目的 了解河南省腹泻患者中鼠伤寒沙门菌单相变异株的分布及其分子学特征。方法 对我省监测到的历史鼠伤寒沙门菌进行血清学复核,使用双重PCR法鉴定第2相鞭毛缺失菌株并对其进行脉冲场凝胶电泳分析。结果1 576株沙门菌中有401株鼠伤寒沙门菌,经双重PCR方法鉴定出113株鼠伤寒沙门菌单相变异株,分别占沙门菌和鼠伤寒沙门菌的7.17%和28.18%,其中79.64%(90例)来源于<2岁的婴幼儿。113株鼠伤寒沙门菌单相变异株经XbaⅠ酶切后,共分为88种带型,各带型包含菌株数为1～5株,带型相似度在58%～100%,带型无明显的地域、时间聚集特征。结论 河南省腹泻患者中鼠伤寒沙门菌单相变异株检出率较高,且人群分布不均,分子分型表现出较大的多样性,没有形成较大规模的流行。     

新型冠状病毒感染者和灭活疫苗受种者抗体水平研究

  目的   研究不同时期新型冠状病毒感染（COVID-19）病例及接种2019-nCoV灭活疫苗人群的抗体免疫应答规律及特点。  方法   于2020年1月—2021年10月采集河南省43例COVID-19确诊病例的86份血清标本,46名灭活疫苗接种者的184份血清标本,50名未感染健康人的50份血清标本,采用磁微粒化学发光法和酶联免疫吸附法对320份血清标本检测并分析其抗体水平。  结果   确诊病例恢复期IgA、IgM、IgG抗体阳性率高于急性期（P值均 < 0.05）;恢复期的IgM、IgG抗体水平高于急性期（P值均 < 0.05）。灭活疫苗接种后31周,IgG和IgA抗体阳性率分别维持在63.04%（29/46）和36.96%（17/46）,IgM抗体全部转阴;疫苗接种者第4、8、12、31周IgA抗体吸光度值差异无统计学意义（F = 2.365,P = 0.073）,IgM、IgG抗体水平差异均有统计学意义（P < 0.05）。同时期确诊病例的IgA、IgM抗体阳性率高于疫苗接种者,IgM、IgG抗体水平高于疫苗接种者（P值均 < 0.05）。  结论   IgG抗体在新型冠状病毒感染早期和恢复期阳性率最高。IgA、IgG抗体出现时间较IgM早,在疫苗接种者体内持续时间超过31周。同时期确诊病例的IgM、IgG抗体水平高于疫苗接种者。     

北京市一起境外输入无症状感染者相关新冠肺炎聚集性疫情的溯源调查

  目的  分析河南省一起外省输入病例引发本地新冠肺炎聚集性疫情的调查过程、疫情特点和传播过程。  方法   将2022年3月18 — 28日河南省焦作市修武县的新冠肺炎本土疫情感染者作为研究对象,收集其流行病学调查、实验室检测、临床表现等信息,采用描述流行病学方法进行分析。  结果  按照报告日期疫情持续11 d,共报告45例感染者;男性16例,女性29例;年龄中位数M（P₂₅,P₇₅）为43岁（27.5,58.0）;无症状感染者31例,确诊病例14例（轻型13例、普通型1例）,无重症和死亡病例;初筛阳性Orf1ab基因CT值中位数M（P₂₅,P₇₅）为23.02（18.57,28.64）,N基因CT值中位数M（P₂₅,P₇₅）为23.10（18.63,28.03）;出现1起纺织工厂较大聚集性疫情,工厂罹患率为6.6 %;涉及7起家庭聚集性疫情,家庭续发率为20.78 %,密接续发率为3.79 %;12.5 %的感染者暴露于既未出现临床症状核酸检测又阴性时的感染者;疫情传染源为从上海返乡人员,病毒基因测序为奥密克戎变异株BA.2.2,潜伏期中位数M（P₂₅,P₇₅）为3 d（2,4.25）;代间距中位数M（P₂₅,P₇₅）为3 d（2,3）,共发生5代病例。本次疫情的R₀为6.14,实时再生数Rt于采取防控措施后2 d出现下降,在采取措施后8 d降至1以下。  结论  河南省本起疫情为外省输入引起,主要通过工厂、家庭、学校传播,控制措施较好,未造成外溢,重点人群核酸筛查对早期发现疫情具有重要意义。     

基于EV71疫苗接种的江苏省手足口病动力学模型研究

探索肠道病毒71型（EV71）疫苗上市前后河南省重症手足口病流行特征和病原谱的变化情况,为制定重症手足口病防控策略提供相关依据。

通过中国疾病预防控制中心传染病报告信息管理系统选取河南省2014 — 2020年所有手足口病报告信息,分析EV71疫苗上市后河南省重症手足口病流行特征及病原谱变化。

2014 — 2020年,河南省共报告重症手足口病病例13535例。EV71疫苗于2017年广泛使用,与上市前（2014 — 2016年）比较,上市后（2017 — 2020年）手足口病重症病例所占比率从3.19%（10948/343585）降为0.93%（2587/278075）,差异有统计学意义（χ ² = 3672.874,P < 0.001）。全年重症发病呈现单峰分布,高发季节主要集中在4 — 7月,4 — 7月报告病例数占75.53%（10223/13535）,重症病例中男女比例为1.58 : 1;发病年龄仍然以 < 5岁婴幼儿为主,占97.34%（13175/13535）,1岁年龄组重症病例构成比从47.23%下降到42.83%,2岁年龄组重症病例构成比从25.57%下降到22.84%（χ²_1岁组 = 16.311,P_1岁组 < 0.001;χ²_2岁组 = 8.255,P_2岁组 = 0.004）;托幼机构重症病例构成比由9.13%上升为16.24% （χ² = 112.359,P < 0.001）;疫苗上市后,EV71构成比从65.14%下降到29.63%,其他肠道病毒构成比从27.49%上升到56.13%,其他肠道病毒代替EV71成为优势血清型（56.13%,737/1313）。

EV71疫苗上市后河南省手足口病重症比率明显下降,优势病原由EV71转为其他肠道病毒,应进一步加强重点人群、高发季节、重点场所的EV71疫苗推广应用工作,开展综合防控工作预防重症手足口病的发生。

     

1起家庭聚集性肺炎病原学检测及基因特征分析

目的：分离鉴定引起家庭聚集性肺炎的病原体,并进行基因特征分析。方法采集该家庭每个成员的血清、咽拭子和肺炎患者的肺泡灌洗液,通过 PCR 方法、病毒分离、hexon 测序、BLAST 比对和血清 IgG 酶联免疫方法检测病原,并对 hexon 序列进行进化树分析。对阳性病毒分离物进行全基因组扩增。结果父母咽拭子2份、孩子肺泡灌洗液2份经 PCR 检测均为腺病毒(AdV)阳性,肺泡灌洗液病毒分离阳性,4份标本 hexon 区域 PCR 扩增测序,核苷酸同源性为99.5%～100.0%,病毒全序扩增拼接分析,BLAST 比对与腺病毒7型核苷酸同源性97.0%,基因进化树分析显示 hexon 基因分型与腺病毒7 d 位于同一分支。ELISA 方法检测一家4口均出现恢复期与急性期血清腺病毒 IgG 4倍增高现象。结论腺病毒7型是该起家庭聚集性肺炎的病因。     

幽门螺杆菌外膜蛋白omp22和黏附素hpaA融合基因原核表达系统的构建与鉴定

目的:构建表达幽门螺杆菌(Hp)的外膜蛋白omp22和黏附素hpaA融合基因的重组蛋白质候选菌株,为Hp疫苗研究提供依据. 方法:用PCR方法扩增出带3个甘氨酸残基柔韧接头的融合基因omp22-hpaA, 将其克隆到表达载体pMAL-c2X中转化大肠杆菌(E.coli TB1),用IPTG诱导目的基因表达,SDS-PAGE方法对表达产物进行分析,Western Blot鉴定其免疫原性. 结果:测序结果显示, omp22-hpaA融合基因片段由1326 bp组成,为编码440个氨基酸残基的多肽,接头序列GGTGGAGGC已成功地插入omp22-hpaA融合基因中;SDS-PAGE结果显示表达产物相对分子质量约为53 ku,融合蛋白的表达量约占全菌总蛋白的20%. 结论:成功克隆并构建了omp22-hpaA融合基因原核表达系统.     

幽门螺杆菌外膜蛋白基因omp22克隆、表达和鉴定

目的:克隆幽门螺杆菌外膜蛋白基因omp22,构建幽门螺杆菌omp22基因与麦芽糖结合蛋白基因融合表达载体,并进行诱导表达,鉴定融合蛋白免疫原性,为幽门螺杆菌疫苗研究提供依据.方法:利用 PCR 技术从Helicobacter pylori郑州分离株MEL-Hp27染色体DNA上扩增omp22基因,并将其克隆到表达载体pMAL-c2X中,转化大肠杆菌(E.coli TB1),用IPTG诱导目的基因表达,SDS-PAGE方法对表达产物进行分析,Western blot鉴定其免疫原性.结果:PCR方法扩增的omp22基因长度约为540 bp.经酶切鉴定,插入到表达载体的基因片段与预期目的DNA片段相一致;SDS-PAGE结果显示表达产物分子量约为22 ku,融合蛋白的表达量约占全菌总蛋白的26%.结论:成功克隆并构建了omp22基因高效原核表达系统,为幽门螺杆菌基因工程组分疫苗的研究奠定基础.     

病毒性脑炎病例中Echo6河南分离株VP1基因特征分析

Ech06可引起病毒性脑炎、手足口病等多种疾病,侵袭对象以1岁以下婴幼儿为主,病死率5．6％,国内外均有由Ech06引起的公共卫生事件报道     

肠道致病菌16S rRNA基因的快速检测和鉴定

[目的]建立快速检测及鉴定常见肠道致病菌细菌种属的分子生物学方法。[方法]选择痢疾杆菌、霍乱弧菌、大肠杆菌等细菌的纯培养物进行培养,设计16S rRNA基因通用引物进行PCR扩增,对PCR产物经两种方法处理:一是PCR产物与质粒连接,克隆后进行DNA测序;二是对PCR产物纯化后直接测序;对两种方法的测序结果均与核酸基因库进行BLAST比对,鉴定细菌种类,并比较两种方法所得测序结果的差别。[结果]从几种细菌的纯培养物中均成功扩增出特异性目的产物,克隆后测序与PCR产物直接测序,两种方法均可鉴定出细菌类别。[结论]16S rRNA基因PCR产物的克隆后测序或直接测序,可用于常见致病菌的快速检测和鉴定,但PCR产物直接测序更方便、省时、省力。     

实时荧光PCR法与ELISA法在发热伴血小板减少综合征病例检测中的比较

目的比较实时荧光PCR法与酶联免疫吸附试验(ELISA)在发热伴血小板减少综合征病例检测中的差异。方法对143例2011年河南省发热伴血小板减少综合征监测病例的急性期血清,分别应用实时荧光PCR法和ELISA-IgM方法进行检测,结果进行统计学分析。结果 143例病例经实时荧光PCR法检测,阳性率50.35%,经ELISA-IgM法检测,阳性率为37.76%,两种方法的检测有统计学意义(P<0.05)。对于间隔时间超过1w的病例,两种检测方法无统计学意义(P>0.05)。结论实时荧光PCR法更适合于发热伴血小板减少综合征病例的早期实验室诊断,ELISA方法可对发病1w以上病例的实验室诊断。