HPV与宫颈癌关系及疫苗研究进展

流行病学和病原学研究表明,人乳头瘤病毒(HV)感染是妇女发生宫颈癌重要的原因之一.HPV是无包膜的小型双链环状DNA病毒,不同基因型病毒对细胞的转化能力不同,其中HPV-16、18与子宫颈癌关系最密切.HPV诱发官颈癌的主要机制,是其E6和E7蛋白基因在宫颈细胞中的表达增加,产生的E6和E7蛋白两个癌蛋白分别与抑癌蛋白p53和pRb结合而诱导后两者降解.HPV疫苗包括预防性疫苗和治疗性疫苗两大类.本文对HPV感染与宫颈癌发生的关系、疫苗研究进展进行了系统的阐述.     

长期培养的大鼠原代肝细胞功能和形态学观察

目的：研究大鼠原代肝细胞长期体外培养后功能和形态的变化。 方法： 采用两步胶原酶原位灌流法分离大鼠肝细胞，并用Percoll分离液进行密度梯度离心进一步纯化肝细胞，采用0.4%台盼蓝染色观察细胞活力。然后将细胞接种于HepatoZYME-SFM培养基中培养，定期收集肝细胞培养液上清检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、白蛋白、尿素氮的水平。采用乙氧基试卤灵O-脱乙基酶活性（EROD）方法检测肝细胞P450的CYPⅠA1功能。 结果： 新鲜分离的大鼠肝细胞总数（2-3）×108cells/whole liver，Percoll分离液纯化后活力和纯度在90%以上。HepatoZYME-SFM培养下肝细胞生长良好并保持正常形态。AST、ALT水平在培养3 d后下降显著，6-9 d后趋于相对稳定的低水平。白蛋白的分泌功能、尿素合成能力在18 d内维持在较高水平。可在3-6 d检测到CYPⅠA1酶活性。 结论： Percoll液纯化新分离肝细胞可提高其活率和纯度，HepatoZYME-SFM培养条件下肝细胞可有效保持良好形态结构和一定的生物合成代谢能力，适合肝细胞的体外长期培养和功能研究。     

脐带血中衍生树突状细胞及其生物学特性的研究

目的　利用脐带血衍生培养树突状细胞 (DC) ,以获得可用于临床治疗的一种新的血细胞制品 .方法　从脐带血中分离单个核细胞 ,联合使用细胞因子GM -CSF、IL - 4和TNF -α在体外诱导和扩增DC ;采用扫描电镜、流式细胞仪 (FACS)和混合淋巴细胞反应 (MLR)试验对脐带血来源的DC进行生物学特性分析 .结果　从 30ml脐血诱导培养 12d后可获得 6 .6× 10 6的DC .扫描电镜观察具有典型的树突状突起 ;FACS分析显示 ,获得的DC细胞群高表达CD1a(90 .6 % )、CD80 (96 .8% )、CD86(84 .8% )和HLA -DR(91.0 % ) ;MLR显示 ,脐带血诱导培养的DC对同种异体的脐带血幼稚型T细胞均具有强烈的激发和促增殖作用 .结论　从脐带血中成功诱导出大量高纯度成熟DC ,为依赖DC免疫治疗的临床应用打下基础     

脐带血中衍生树突状细胞及其生物学特性的研究

目的利用脐带血衍生培养树突状细胞(DC),以获得可用于临床治疗的一种新的血细胞制品.方法从脐带血中分离单个核细胞,联合使用细胞因子GM-CSF、IL-4和TNF-α在体外诱导和扩增DC;采用扫描电镜、流式细胞仪(FACS)和混合淋巴细胞反应(MLR)试验对脐带血来源的DC进行生物学特性分析.结果从30ml脐血诱导培养12d后可获得6.6×106的DC.扫描电镜观察具有典型的树突状突起;FACS分析显示,获得的DC细胞群高表达CD1a(90.6%)、CD80(96.8%)、CD86(84.8%)和HLA-DR(91.0%);MLR显示,脐带血诱导培养的DC对同种异体的脐带血幼稚型T细胞均具有强烈的激发和促增殖作用.结论从脐带血中成功诱导出大量高纯度成熟DC,为依赖DC免疫治疗的临床应用打下基础.     

人源Fab抗体库的构建和抗hPRLR抗体的筛选鉴定

目的构建人源Fab噬菌体抗体库,筛选抗hPRLR抗体片段并进行初步鉴定。方法从乳腺癌患者外周血提取总RNA,通过RT-PCR扩增人抗体轻链和重链基因,构建抗hPRLR人源Fab抗体库。分别以His-hPRLR融合蛋白、BSA-hPRLR表位多肽融合蛋白和GST-hPRLR融合蛋白作为抗原包板,经过3轮循环的吸附-洗脱-扩增的筛选及1轮交叉筛选,挑单克隆用Phage-ELISA、DNA测序筛选阳性克隆,将筛选到的阳性克隆FabG2转化至Top10’受体菌,诱导表达可溶性Fab抗体,通过Western blot和ELISA进行特异性的鉴定。结果构建的人源Fab库容为1.0×109,4轮的筛选,获得6株能与hPRLR结合的人源抗体克隆。选取的FabG2能够进行可溶性Fab抗体蛋白的表达,ELISA初步鉴定,能够与hPRLR进行特异性地结合。结论成功构建了人源Fab噬菌体抗体库,筛选并鉴定了1株抗hPRLR Fab抗体的克隆。hPRLR特异性Fab抗体的获得将为高表达hPRLR乳腺癌的生物免疫治疗奠定了基础。     

女员工婚姻质量与自我和谐、应对方式的相关研究

目的考察邯郸市某公司女员工婚姻质量、自我和谐程度以及应对方式的基本情况,探讨婚姻质量与自我和谐、应对方式的关系。方法采用Olison婚姻质量问卷、自我和谐量表(SCCS)及特质应对方式问卷(TCSQ)对邯郸市某大型商场82名女性销售员工进行问卷调查。结果①婚姻满意度、夫妻交流、解决冲突的方式因子得分均低于常模,具有显著性统计学意义(t=-6.4296,P<0.01;t=-4.1643,P<0.01;t=-6.6874,P<0.01);②婚姻满意度与自我和谐呈负相关(r=-0.280,P<0.05),与自我的灵活性呈显著正相关(r=0.303,P<0.01),与自我的刻板性呈负相关(r=-0.228,P<0.05),与消极应对呈负相关(r=-0.240,P<0.05);夫妻交流与自我和谐呈负相关(r=-0.297,P<0.05),与灵活性呈显著正相关(r=0.298,P<0.01)。结论婚姻质量与自我和谐之间存在一定联系,婚姻质量与应对方式关系较为复杂。     

计算机图像技术在整形外科的应用

当今计算机技术飞速发展,数据运算与图像处理功能日益强大。将这一先进技术应用于整形外科领域,可以进行形态测量,美学分析,解剖定位,手术设计与模拟,术中导航,假体预制,软组织力学分析等,此外还可进行医患交流、专科图文资料管理检索和教学培训等。由于计算机技术具有其他方法难以比拟的优越性,有较大的应用价值和发展潜力,进入八十年代以来便成为整形外科领域研究发展的方向之一。本文将国内外近年来有关计算机图像处理技术在整形外科领域的开发与应用研究分三个部分进行了综述。计算机图像处理技术在整形外科领域的应用研究方兴未艾,并将得到进一步应用,有着广阔的发展前景。     

多层螺旋CT灌注成像在肺癌与肺良性结节鉴别诊断中的应用

目的:探讨多层螺旋CT(Multi slice helical CT,MSCT)灌注成像在肺癌与肺良性结节鉴别诊断中的应用。方法:选取2014年1月-2014年6月在我院行多层螺旋CT(Multi slice helical CT,MSCT)灌注成像检查的患者100例,包括恶性结节患者44例,良性结节患者22例,炎性结节患者34例,观察CT灌注参数值与肺结节、肺癌病理分型的关系。结果:恶性结节、良性结节和炎性结节的血流量(Blood flow,BF)值和平均通过时间(Mean transit time,MTT)值比较,差异无统计学意义(P0.05)。恶性结节、良性结节和炎性结节的血容量(Blood volume,BV)值和表面通透性(Permeability surface,PS)值比较,差异均具有统计学意义(P0.05),其中BV值:炎性结节最大、良性结节最小、恶性结节居中;PS值:恶性结节最大、良性结节最小、炎性结节居中。腺癌、鳞癌和小细胞肺癌的BV值、BF值、PS值和MTT值比较,差异无统计学意义(P0.05)。但鳞癌的BF值显著低于腺癌和小细胞肺癌(P0.05)。结论:多层螺旋CT灌注成像可参考灌注参数值的变化,鉴别肺癌与肺良性结节,具有重要的诊断价值。     

某校大学生家庭教养方式与竞争态度的相关研究

目的 考察某校大学生的竞争态度以及家庭教养方式的基本情况,了解大学生竞争态度与家庭教养方式的相关关系.方法 采用父母教养方式问卷(EMBU)、竞争态度量表(中国版)对某校251名大学生进行调查.结果 在父亲的教养方式中,情感温暖因子与良性竞争态度得分呈显著正相关(r=0.195,P<0.01),惩罚和严厉因子、拒绝否认...     

肠道病毒71型山东临沂分离株全基因组序列分析

目的 自1例死亡患儿的标本中分离EV71,并分析其全基因组序列特点,研究其基因序列的改变是否与其神经毒力有关.方法 咽拭子标本采自山东临沂市人民医院1例死亡患儿,在人横纹肌瘤细胞(RD)上分离EV71,分段扩增获得EV71的全序列,用BLAST、Bioedit和MEGA 4进行序列分析.结果 获得1株EV71分离株SDLY107,基因组全长7405 bp,全基因组核苷酸序列与2008年的阜阳株Fuyang.Anhui.P.R.C/17.08/2同源性最高,为98.6%,与原型株BrCr/70的同源性为80.0%,与神经毒型株MS/87的同源性为86.5%.系统进化分析表明,SDLY107与中国大陆的北京株、河南株、广西株、深圳株、兰州株、阜阳株、重庆株、浙江株的亲缘关系较近,按照传统的VP1基因分型方法,可归为C4亚型,是近年来我国大陆流行的主要基因亚型.氨基酸序列分析发现,SDLY107与其他毒株相比,有2个特有的突变(E947D,K1873R).结论 SDLY107分离株属于C4亚型,氨基酸突变E947D和K1873R可能与EV71的致病性有关.

Abstract：

Objective To isolate enterovirus 71 from a death children,and analyze whether the neurovirulence was related to the variation of nucleotide and amino acid. Methods Enterovirus 71 was isolated from throat swabs which were colleted from Shandong Linyi People's Hospital. The full length genome was sequenced by amplification with RT-PCR and sequencing of 9 overlapped gene fragments covering full length of the genomes. The nucleotide and amino acid sequenced was aligned by BLAST, Bioedit and MEGA 4. Results A strain of enterovirus 71 was isolated and named as SDLY107. The full length was 7405 bp. The results of homology analysis of overall nucleotide sequence showed that strain Fuyang. Anhui. P. R. C/17.08/2 had highest homology (98.6%)with strain SDLY107, and the homology was 80.0% between strain SDLY107 with prototype strain BrCr/70,and 86. 5% between strain SDLY107 with nerve strain MS/87. Phylogenetic analysis showed that the phylogeny was close between SDLY107 with some isolated strains from Chinese Mainland, such as Beijing, Henan, Guangxi, Sbenzhen, Lanzhou, Fuyang, Chongqing and Zhejiang strains, which was clustered for C4 subtype. The results of amino acid sequence analysis showed that there were 2 mutations, E947D and K1873R, for strain SDLY107. Conclusion SDLY107 belonged to C4 subtype, amino acid mutations E947D and K1873R of which may be relevant to the pathogenicity of EV71.