落新妇甙对小鼠心脏移植后移植物血管病的抑制作用

目的探讨落新妇甙对小鼠心脏移植后移植物血管病的抑制作用。方法建立小鼠颈部心脏移植模型,将受鼠随机分为环孢素A(CsA)组(术后每天用CsA5mg/kg灌胃)和落新妇甙组(术后每天用落新妇甙5mg/kg灌胃)。术后第60d切取移植心,观察移植心脏组织学变化,以HPIAS-1000图像分析仪测量冠状动脉管壁厚度与动脉直径的比值,根据平均内膜厚度和管腔狭窄程度对CAV病变进行评分。结果CsA组移植心脏可见明显的纤维化,大量单核细胞浸润,动脉硬化明显,冠状动脉管壁厚度与血管直径的比值为0.63±0.20,明显高于落新妇甙组的0.22±0.04(P<0.01);CsA组心脏移植物血管病变评分为(2.3±0.6)分,高于落新妇甙组的(1.1±0.3)分(P<0.05)。落新妇甙组心脏移植物的冠状动脉内膜病变轻微,内皮和内弹力层基本保持完整,平滑肌细胞增殖不明显。结论落新妇甙能减缓移植心冠状动脉硬化,对小鼠心脏移植后移植物血管病有明显的抑制作用。     

白细胞介素10基因转染对小鼠心脏移植排斥反应中细胞因子表达的影响

目的 :探讨白细胞介素 10 (IL 10 )基因转染对小鼠心脏移植排斥反应中IL 12、IL 15、IL 18和IL 4表达的影响。方法 :采用小鼠颈部心脏移植模型 ,随机分为 3组 :对照组、移植组和IL 10组。于术后第 5天取移植心脏 ,用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)法观察IL 12、IL 15、IL 18、IL 4及IL 10的表达情况。结果 :移植组IL 12、IL 15、IL 18表达与对照组比较明显升高 ,IL 10、IL 4表达显著降低 (均P <0 .0 1)。IL 10组IL 12、IL 15、IL 18表达与移植组比较明显降低 ,而IL 4及IL 10表达显著升高 (均P <0 .0 1)。结论 :IL 10基因转染抑制心脏移植排斥反应主要与其抑制IL 12、IL 15、IL 18等Th1型细胞因子的表达 ,促进Th2型细胞因子IL 4的表达 ,使免疫反应由Th1型向Th2型偏移有关     

细胞凋亡与心脏移植(文献综述)

本文概述了细胞凋亡与心脏移植的关系.从抗凋亡途径保护供心,将为心脏移植提供新的研究方向.     

落新妇甙对心脏移植效应性T细胞磷脂酰肌醇信号通路的影响

目的探讨落新妇甙对心脏移植效应性T细胞磷脂酰肌醇-3-激酶／蛋白激酶B（PI-3K／PKB）信号传导通路的影响。方法分离BALB／C小鼠心肌细胞（2×10s／m1）和C57BL／6小鼠的脾细胞（1×10^6／ml），前者作刺激细胞，后者作反应细胞，进行混合细胞培养，建立小鼠心脏移植急性排斥反应体外模型。实验分4组：对照组，心肌细胞与脾细胞混合培养；3个实验组在对照组基础上，落新妇甙组加入落新妇甙（15μg/ml）；落新妇甙加P13K激动剂组加入落新妇甙（15μg/ml）和P13K激动剂IL-8（20μg/ml）；落新妇甙加P13K抑制剂组加入落新妇甙（15μg／ml）和P13K抑制剂LY294002（20μmol／L）。TUNEL法检测T淋巴细胞凋亡情况。Western blot法检测T细胞P13K和Bcl-2蛋白表达情况。RT-PCR法检测T细胞PKB mRNA表达情况。结果落新妇甙组T细胞凋亡指数明显高于对照组[（74．2±11．7）％对（34．2±9．6）％，P〈0．01]，P13K、PKB、Bcl-2表达显著低于对照组（P〈0．01）。落新妇甙加P13K抑制剂组T细胞凋亡指数显著高于落新妇甙组，P13K、PKB、Bcl-2显著低于落新妇甙组（P〈0．01）。落新妇甙加P13K激动剂组T细胞凋亡指数和Bcl-2表达与对照组的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论落新妇甙诱导心脏移植效应性T细胞凋亡与其抑制PI-3K／PKB信号通路有关。     

小鼠颈部心脏移植模型的改进

目的　探讨小鼠颈部心脏移植模型的改进和研究心脏移植再灌注损伤及急性排异反应。方法　将Chen氏术式加以改进 ,将供心主动脉与受体颈总动脉行端侧吻合 ,进行 6 0次小鼠颈部心脏移植。结果　新方法使供心总缺血时间缩短至 30min ,7d存活率提高到 98%。结论　改进后的模型简单实用 ,提高了小鼠颈部心脏移植存活率 ,值得推广。     

落新妇甙对小鼠移植心肌细胞凋亡的抑制作用

目的观察落新妇甙（Astilbin）对小鼠心脏移植急性排除反应中心肌细胞凋亡的抑制作用。方法采用小鼠颈部心脏移植模型。共分3组：对照组供、受体均为C57小鼠；移植组供体为BALB／c小鼠，受体为C57小鼠；落新妇甙组在移植组基础上，心脏移植后每天以落新妇甙1mg／kg灌胃。分别于术后第1、3、5、7天各取4只移植心脏．原位末端标记（TUNEL）法染色检测心肌细胞凋亡，以心肌细胞凋亡阳性细胞数占总心肌细胞数的百分比作为心肌细胞凋亡指数（apoptosis index，AI）。结果移植组心肌细胞于术后第1天即已出现凋亡，第3天明显增加，第7天达到高峰。落新妇甙组各时间点心肌细胞凋亡指数明显小于对应的移植组（P〈0．01）。结论落新妇甙对心脏移植排斥反应中心肌细胞凋亡有显著抑制作用。     

Effect of TGF-β1 on the Expression of IL-12, IL-15, IL-18, IL-4 and IL-10 in Heart Transplantation Rejection in Rats

To investigate the effect of TGF-β1 on the expressions of IL-12, IL-15, IL-18, IL-4 and IL-10 in heart transplantation rejection in rats, a model of rat cervical heterotopic heart transplantation was set up and the model rats were randomly divided into three groups： control group, transplant group and TGF-β1 group. The mRNA expression levels of IL-12, IL-15, IL-18, IL-4 and IL-10 were determined by RT-PCR at the 5th day after the transplantation. The mRNA expression levels of IL- 12, IL-15, IL-18 were increased obviously and those of IL-4, IL-10 were significantly decreased in the transplant group as compared with the control group （P〈0.01）. In the TGF-β1 group, the mRNA ex- pression levels of IL- 12, IL- 15, IL- 18 were significantly decreased and those of IL-4, IL- 10 were significantly increased as compared with the transplant group （P〈0.01）. The immunosuppressive effect of TGF-β1 on heart transplantation rejection was related to its inhibition of the expressions of Th1-type cytokines （IL-12, IL-15, IL-18 etc） and its promotion of the expressions of Th2-tpye cyto- kines （IL-4, IL-10）.     

Bcl-2基因转染对小鼠心脏移植再灌注损伤的保护作用

目的　研究Bcl 2基因转染对小鼠心脏移植再灌注损伤保护作用。方法　采用小鼠颈部异位心脏移植模型 ,BALB/C小鼠 ,随机分为 3组 :假手术组 ,对照组和Bcl 2组。术后 6h测定血清心肌酶谱LDH、GOT、CPK及血清脂质过氧化的终产物MDA、过氧化物歧化酶SOD的含量 ,电镜观察心肌组织的病理变化。TUNEL法染色检测细胞凋亡 ,以心肌凋亡阳性细胞数占总心肌细胞数的百分比作为心肌细胞凋亡指数。结果　Bcl 2组心肌线粒体等结构损伤明显减轻 ,血清心肌酶谱明显改善 (P<0 .0 1) ,MDA明显减少 (P <0 .0 1) ,SOD明显增加 (P <0 .0 1) ,心肌细胞凋亡指数明显降低 (6 .38%± 0 .32 % )比 (42 .4 8%± 2 .34% ) ,P <0 .0 1。结论　Bcl 2基因转染能有效减轻脂质过氧化反应 ,保护心肌线粒体 ,抑制心肌细胞凋亡 ,对心脏移植再灌注损伤有显著保护作用。     

乳脂球表皮生长因子8通过抑制活性氧簇/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎症小体信号通路减轻移植肺缺血再灌注损伤

目的从活性氧簇(ROS)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体信号通路探讨乳脂球表皮生长因子8(MFG-E8)抗移植肺缺血再灌注损伤的作用机制。方法健康雄性SD大鼠50只, 随机分为对照组、移植组和MFG-E8组, 袖套改良法建立大鼠左肺移植模型。MFG-E8组受体鼠术前30min经尾静脉注射rhMFG-E8 20 μg/kg, 对照组和移植组受体大鼠尾静脉注射同等量生理盐水。肺移植再灌注2 h后阻断右肺门5min, 全自动血气分析检测仪检测动脉血中氧分压(PaO2)和二氧化碳分压(PaCO2)。苏木精-伊红(HE)染色观察移植肺组织显微病理改变, 原位缺口末端标记法(TUNEL)染色检测移植肺组织细胞凋亡指数。组织活性氧检测试剂盒(DHE)检测肺组织中ROS水平, 干/湿法测量肺湿质量/干质量(W/D)比。蛋白免疫印迹(Western blot)法检测肺组织NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1(Caspase-1)、和凋亡相关的斑点样蛋白(ASC)蛋白表达水平。酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介...     

全腔肺动脉连接术的体外循环管理

目的总结全腔肺动脉连接术体外循环转流的方法与经验。方法全组26例均在全麻体外循环下行全腔肺动脉连接术,麻醉诱导后放血,使红细胞压积稀释到术前的50%～60%。预充液中加入血浆和白蛋白等胶体液使晶胶比值维持在0.5～0.6,胶渗压16～18mmHg;实施浅低温体外循环,灌注流量2.4～2.8L/(m2.min),维持平均动脉压40～60mmHg。心脏复温时,启动常规超滤并再次加入血浆和白蛋白,提高红细胞压积(HCT)和胶体渗透压,通过增加血容量和提高血浆胶体渗透压来适应新的血流动力学变化。停机时"置换性"的超滤使得血红蛋白浓缩至35%～45%,血浆胶体渗透压至18～21mmHg。结果该组4例患者死于术后低心排血量,余22例患者均存活痊愈出院,体外循环期间血流动力学基本稳定,血气电解质维持在正常范围,术后SaO2≥92%,中心静脉压(CVP)15～17cmH2O。结论停机前加入大量的血浆和白蛋白以增加血容量、提高并长时间维持胶体渗透压以适应新的血流动力学变化,保持机体内环境稳定是全腔肺动脉连接术中体外循环管理的关键。