核因子-κB的活化与大鼠脓毒症胃肠黏膜屏障的关系

目的探讨大鼠脓毒症时胃肠粘膜核因子-κB的活性,以及核因子-κB的活性与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、细胞凋亡的关系。方法采用盲肠结扎穿孔术做大鼠的脓毒症模型。分别在术后1,3,6,12,24,48 h活杀大鼠,取大鼠肠黏膜组织,用酶联免疫法测TNF-α、MCP-1的含量,用流式细胞仪检测细胞凋亡,用凝胶电泳迁移法测NF-κB的活性。结果NF-κB的活性、TNF-α、MCP-1的含量在大鼠脓毒症时明显升高,细胞凋亡也明显增加,与对照组对比差异有统计学意义(P<0.01);结论TNF-α、MCP-1是脓毒症早期激活的细胞因子,它们的释放与NF-κB的活性密切相关;大量的细胞凋亡是肠道粘膜细菌移位的重要机制之一;明显与细胞因子的大量释放有关。     

大鼠原位肝移植模型制作的若干技术问题

目的：通过建立稳定的大鼠原位肝移植模型，总结实用性的手术技巧及常见并发症的防治措施。方法：采用改良的二袖套法施行大鼠原位肝移植术123次，观察并分析手术时间、存活率及手术并发症。结果：手术成功率93．5％（115／123），一周存活率为83．7％（103／123），手术并发症主要有麻醉意外、失血性休克、吻合口出血、胆道梗阻、胆漏等。结论：改进的手术方法可以提高手术的成功率，减少并发症的发生。     

NF-κB在感染合胞病毒的人支气管上皮细胞凋亡中作用的探讨

【立论依据】 呼吸道合胞病毒(RSV)易致呼吸道上皮细胞受损凋亡,NF-κB与细胞凋亡密切相关。建立感染RSV的支气管上皮细胞(NHBE)模型,检测NHBE的增值、凋亡情况及NF-κB的转位,阐明NF-κB在感染合胞病毒的人支气管上皮细胞凋亡中的作用,为临床治疗呼吸道疾病提供新的方法和思路。 【设计思路】 建立感染RSV的NHBE模型,检测细胞增值、凋亡情况以及NF-κB是否转位,定性定量地探讨呼吸道合胞病毒(RSV)是否通过诱导NF-κB激活介导人支气管上皮细胞(NHBE)凋亡。 【实验内容】 培养人支气管上皮细胞(NHBE),建立并鉴定RSV感染NHBE的体外细胞模型(用定量RT-PCR法鉴定细胞模型是否成功;设正常组、水相处理组、RSV感染组,MTT比色法检测RSV对NHBE增殖的抑制作用,感染组以不同滴度分为1 000、500、100、50、10 TCID50 5个组,感染12、48、72、96、120 h);用Annexin-V-FITC凋亡检测试剂盒检测RSV诱导体外培养的NHBE的凋亡;以免疫荧光法和蛋白质印迹法检测经RSV处理的人支气管上皮细胞NF-κB的激活和对细胞凋亡的影响。 【材料】 人支气管上皮细胞(NHBE)细胞;RSV A亚型原型株Long株;细胞胞浆胞核蛋白提取试剂盒;Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒;兔抗NF-κB抗体;电泳仪。 【可行性】 (1)呼吸道合胞病毒(RSV)易致呼吸道上皮细胞受损凋亡,NF-κB与细胞凋亡密切相关,感染RSV的人支气管上皮细胞模型容易建立成功。(2)本组成员长期跟随老师进行呼吸合胞病毒、流感病毒的研究,具有一定的科研基础和实验能力。(3)所需试剂、仪器、材料,医学基础实验中心基本都有配备,学校同时具备SPF级实验中心。 【创新性】 (1)首次从NF-κB角度探讨感染RSV的NHBE模型,为临床治疗呼吸道疾病提供新的方法思路。(2)分别使用免疫荧光法和蛋白质印迹法定性与定量检测RSV是否通过诱导NF-κB激活介导NHBE凋亡。     

临床技能实验室在急诊医学教学中的应用

急诊医学是一门新兴学科,它是由社会需要和医学发展而产生的,是一门实践性很强的应用型学科,并且跨学科、跨专业,又是一门独立学科.急诊医学的教学目前正处于起步阶段,存在实践性强,应急性高,变化迅速,工作复杂等特点.     

急性光气中毒致ARDS临床治疗2例

人吸入光气后，可产生呼吸道症状，吸入量越多，病情越严重。严重的可出现肺水肿，甚至导致急性呼吸窘迫综合征（ARDS）。现将本院收治的2例急性光气中毒致ARDS的救治经过报道如下。     

直立倾斜试验联合心率变异性及核素脑血流测定对血管迷走性晕厥诊断及评估预后价值研究

特发性晕厥中以血管迷走性晕厥(VVS)最常见。目前认为VVS的发病机制与自主神经功能紊乱有关。心率变异性(HRV)是目前评估自主神经功能的重要手段。直立倾斜试验(HUTT)是目前公认的诊断VVS准金标准,本研究通过建立HUTT模     

拓展性临床试验制度的中国实践及探索——以同情用药为视角

目的 为中国拓展性临床试验发展完善提供思路。方法 通过文献研究等方法对国内外拓展性临床试验的发展、中国实践中的难题进行研究。结果 中国拓展性临床试验在风险评估方面存在争议、申请发起人尚未确定、申请审批时长有待缩短。结论 结合中国具体国情,从明确责任归属、分摊风险和搭建审查体系3个方面进行拓展性临床试验的完善。     

盐酸戊乙奎醚联合血液灌流治疗急性重度有机磷农药中毒临床分析

目的:观察盐酸戊乙奎醚(长托宁penehyclidime hy-droch lovide,PHC)联合血液灌流治疗急性重度有机磷农药中毒的临床疗效。方法:将61例重度有机磷农药中毒患者分为:实验组(盐酸戊乙奎醚联合血液灌流)31例和对照组(单用盐酸戊乙奎醚)30例,对比观察两组昏迷清醒时间、机械通气时间、治愈时间、住院医疗费用及死亡率。结果:实验组的昏迷清醒时间、机械通气时间、治愈时间低于对照组(P<0.05),住院费用治疗组高于盐酸戊乙奎醚组(P<0.01),病死率两组无明显差异。结论:盐酸戊乙奎醚联合血液灌流治疗急性重度有机磷农药中毒疗效优于单用盐酸戊乙奎醚。     

严重多发伤并发ARDS的EICU综合治疗体会

<正>急性呼吸窘迫综合征(ARDS)指严重创伤或大手术后引起的急性呼吸衰竭,以严重低氧血症、弥散性肺部浸润及肺顺应性下降为特征,是严重多发伤常见而严重的并发症之一,死亡率较高。我院急诊重症监护病房(EICU)2003-2009年收     

细胞核因子-κB在睾丸生精细胞凋亡过程中的活化作用

细胞凋亡在精子发生过程中限制睾丸生精细胞总数起着重要的作用，它的调控异常与男性不育密切相关。越来越多的证据显示细胞核因子-κB（nuclear factor kappa B，NF-κB）对睾丸生精细胞凋亡起着调控作用，这促使我们研究人类正常睾丸组织NF-κB的活性及在离体状态下睾丸组织过度凋亡过程中的作用。用电泳迁移率变更分析（EMSA）测定，发现低水平NF-κB组成性DNA结合活性，且通过对NF-κB的亚单位RelA和p50的免疫染色发现，NF-κB定位于Sertoli细胞核内。在体外诱导的睾丸凋亡过程中，Sertoli细胞（睾丸支持细胞）核NF-κB水平和整个生精小管NF-κB DNA结合活性的增加先于检测到发生凋亡的生精细胞。抗炎药物sulfasalazine可有效抑制应激诱导的NF-κB DNA结合力和NF-κB介导的IBa基因表达。更为重要的是，sulfasalazine抑制NF-κB的同时抑制生精细胞凋亡。因此，有可能通过药物抑制NF-κB，治疗短暂应激条件下引起的生精细胞的过度凋亡。