胃癌发生和演进中maspin和Kail表达的临床病理意义

目的观察maspin和Kail在胃癌及癌前病变中的表达,并探讨他们在胃癌发生和演进中的作用.方法采用免疫组化方法检测maspin和Kail在正常胃黏膜(n=182)、胃异型增生(n=69)和胃癌(n=113)中的表达,比较他们表达与胃癌临床病理特征的关系,并探讨maspin和Kail表达的关系.结果Maspin在正常胃黏膜、胃异型增生和胃癌中的阳性率分别为79.8%(145/182)、75.4%(52/69)和50.4%(57/113),Kail在相应组织中的阳性率分别81.9%(149/182)、65.2%(49/69)、58.4%(66/113).正常胃黏膜和胃异型增生中maspin表达高于胃癌(P＜0.01),正常胃黏膜中Kail表达高于胃异型增生和胃癌(P＜0.01).maspin表达与胃癌浸润深度(P=0.003＜0.01)、转移(P=0.027＜0.05)、Lauren分型(P=0.015＜0.05)和组织学分型相关(P=0.024＜0.05),而与肿块大小、Borrmann分型、生长方式和TNM分期无关(P＞0.05).Kail表达与浸润深度(P=0.043＜0.05)、转移(P=0.005＜0.01)、生长模式(P=0.034＜0.05)、Lauren(P=0.000＜0.01)和组织学分型相关(P＜0.05),而与肿块大小、Borrmann分型和TNM分期无关(P＞0.05).值得注意的是胃癌中maspin和Kail表达显著一致(P=0.008＜0.05).结论maspin和Kail表达下调在胃癌发生中起重要作用,maspin和Kail的表达可能对胃癌的浸润和转移具有抑制作用,可作为反应胃癌病理生物学行为的有效的客观指标.     

光动力治疗老年眼睑皮肤基底细胞癌1例

<正>基底细胞癌(Basal cell carcinoma,BCC)是我国最常见的皮肤恶性肿瘤,约占29.3%～47.5%^[1],也是眼睑最常见的恶性肿瘤,约占90%^[2]。目前皮肤癌主要治疗方法有手术、放疗、激光等,由于眼部解剖结构特殊,不仅要维持其结构完整性,还要保护视力。光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)不仅具有微创、低毒及可反复进行等优点,而且可以保护治疗区域的完整性和美观性^[3]。因此,对于老年眼睑部位BCC,PDT无疑是一种合适的选择。现报道1例光动力疗法治疗老年左上眼睑皮肤基底细胞癌如下。     

基于TPACK的军队医学院校青年教师信息化教学能力调查研究

目的 调查某军队医学院校青年教师整合技术的学科教学知识（technological pedagogical content knowledge,TPACK）能力水平现状,为提升青年教师信息化教学能力提供现实依据。方法 对已有TPACK能力测量量表进行适当修改,形成调查问卷,以某军队医学院校青年教师（教龄<3年）为调查对象,采取方便抽样法,调查其TPACK能力水平现状,通过互联网发放问卷,获得119份有效样本,采用SPSS 20.0进行独立样本t检验和单因素方差分析。结果 青年教师各能力得分均值最高为技术知识（technological knowledge,TK）（3.68±0.74）,最低为整合技术的学科教学知识TPACK（3.17±0.74）;不同专业类别青年教师TPACK各能力水平间差异无统计学意义;不同学位水平青年教师的TK、学科知识（content knowledge,CK）、整合技术的教学法知识（technological pedagogical knowledge,TPK）、整合技术的学科知识（technological content knowledge,TCK）、TPACK水平总体均数差异存在统计学意义（F=12.99,P<0.001;F=13.64,P<0.001;F=4.38,P=0.015;F=3.83,P=0.025;F=3.63,P=0.029）,博士学位青年教师TK、CK、TPK、TCK水平高于本科、硕士学位青年教师。结论 应贯穿青年教师教学成长全周期设计TPACK能力培养体系,构建教学实践共同体并完善制度保障。     

吸气肌训练在慢性阻塞性肺疾病肺康复中的价值

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一种可预防和治疗的常见疾病。吸气肌训练(inspiratory muscle training,IMT)作为COPD患者肺康复的常用方法之一,可改善患者症状,提高生活质量。该文对不同疾病阶段COPD患者行IMT的相关研究进行综述,从相关机制、实施方法及临床应用价值3方面进行阐述,以期为临床进一步开展COPD患者IMT提供参考。     

中国中老年人群甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇比值与认知障碍发病关系

目的 探讨中国中老年人群甘油三酯（TG）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）比值与认知障碍发病的关系,为制定认知障碍的干预措施提供参考依据。方法 收集2011、2013、2015和2018年中国健康与养老追踪调查（CHARLS）中2011年基线调查时无认知障碍的6 883名≥45岁中老年人群的相关数据,将2011年基线调查中TG/HDL-C比值按四分位数分组,采用多因素非条件logistic回归模型分析中国中老年人群TG/HDL-C比值与认知障碍发病的关系,并采用限制立方样条（RCS）曲线拟合TG/HDL-C比值与中老年人群认知障碍发生风险的剂量反应关系。结果 随访至2018年,基线调查时6 883名无认知障碍的≥45岁中国中老年人群中发生认知障碍者2 532例,累积发病率为36.79%;认知障碍组和非认知障碍组中老年人群TG/HDL-C比值分别为（3.08±4.69）和（3.64±6.28）,认知障碍组中老年人群TG/HDL-C比值低于认知障碍正常组,差异有统计学意义（t=–3.875,P <0.001）。在调整了性别、年龄、文化程度、婚姻状况、居住地、吸烟情况、饮酒情况、是否高...     

STAT1的SUMO4修饰在高糖诱导的肾小管上皮细胞上皮-间叶性转化中的作用

目的探讨STAT1的SUMO4修饰与人近端肾小管上皮细胞(HK-2)表型转化的关系。方法将HK-2细胞分为空白对照组(NG,5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(HG,30 mmol/L葡萄糖)、SUMO4-siRNA(转染SUMO4 siRNA)组、NC-siRNA(转染scrimble siRNA)组、UBC9-siRNA(转染UBC9 siRNA)组。采用免疫细胞化学、Western blot法检测E-cadherin、α-SMA、vimentin等的表达;双荧光素酶报告基因分析检测STAT1的转录活性;免疫共沉淀检测STAT1的SUMO4修饰。结果高糖刺激后,HK-2细胞中E-cadherin表达降低,而vimentin与α-SMA表达增高(P<0.05);高糖上调STAT1的SUMO4修饰;不论是SUMO4 siRNA转染还是UBC9 siRNA转染,均能显著提升STAT1的活性(P<0.01);同时SUMO4 siRNA转染可部分逆转高糖导致的E-cadherin和α-SMA表达变化(P<0.05)。结论抑制STAT1的SUMO4修饰增加STAT1的活性,缓解了高糖诱导的HK-2细胞的上皮-间叶性转化。     

白蒺藜对光感受器细胞的抗炎、抗氧化保护效应机制研究

目的　探讨白蒺藜对光损伤诱导的光感受器细胞退行性改变的保护作用。方法　36只小鼠随机分为3组,每组各12只,采用10×10³ Lux白炽光光照30 min建立BALB/C小鼠视网膜光损伤模型,光照前30 min白蒺藜给药组腹腔注射白蒺藜水煎液100 μL,正常对照组和光损伤模型组腹腔注射等量生理盐水。光照后22 h,腹腔注射二氢乙锭,2 h后摘取眼球制备冰冻切片,观察视网膜原位氧化应激状态。分别于光照后6 h、24 h摘取视网膜组织,进行总RNA抽提、逆转录制备cDNA样品,通过实时荧光定量PCR分析小鼠视网膜炎症相关因子。检测白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、趋化因子CcL2（chemokine,Ccl2）、环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、细胞间黏附因子-1（intercellular cell adhesion molecules-1,ICAM-1）、血管细胞黏附分子-1（vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1）基因的mRNA表达水平。结果　光照24 h后,与正常对照组、白蒺藜给药组相比较,光损伤模型组视网膜色素上皮细胞及光感受器细胞氧化应激标志物呈显著阳性,差异均有统计学意义（均为P<0.001）。与正常对照组相比较,光损伤模型组视网膜IL-1β、Ccl2、COX-2、TNF-α、ICAM-1、VCAM-1的mRNA表达水平显著升高,差异均具有统计学意义（均为P<0.01）;与光损伤模型组相比,白蒺藜给药组视网膜IL-1β、Ccl2、COX-2、TNF-α、ICAM-1、VCAM-1的mRNA表达水平显著降低,差异均有统计学意义（均为P<0.01）。结论　在视网膜退行性病变模型中,白蒺藜表现出良好的光感受器细胞保护作用。抗氧化、抗炎可能是白蒺藜防治光感受器细胞损伤效应的相关机制之一。     

妊娠后肢带型肌营养不良症1例报道

<正>肢带型肌营养不良症(LGMD)是一类常染色体遗传性肌病,可分为常染色体显性遗传(LGMD1)和常染色体隐性遗传(LGMD2),每种类型又分为多种亚型,其中以LGMD2A型发病率最高,部分为散发病例。本研究现将本院近期收治1例妊娠后发病的CAPN3基因杂合突变致LGMD2A型病例进行报道,并分析临床特点。1病 例患者,女,31岁。因"四肢肌肉萎缩进行性加重2年"收入院。2年前妊娠后开始出现双下肢乏力,渐发现双下肢肌肉萎缩,继而出     

C2株蓝氏贾第鞭毛虫TCTP基因的克隆、表达和序列分析

目的克隆C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)的翻译调控肿瘤蛋白(Translationally controlled tumor protein,TCTP)编码区,对其进行生物信息学分析和原核表达。方法根据WB株贾第虫TCTP编码区序列设计引物,以C2株贾第虫基因组DNA为模板扩增获得TCTP编码区片段,双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),将酶切和测序验证正确的重组质粒转化E. coli Rosetta(DE3),经IPTG诱导表达融合蛋白,SDS-PAGE及Western blot鉴定蛋白产物,采用Ni-NTA经亲和层析纯化重组蛋白。同时根据测序结果分析C2株贾第虫TCTP蛋白结构特征和进化关系。结果克隆了包含酶切位点全长470 bp的C2株贾第虫TCTP编码区,构建了原核表达载体pET-28a(+)-TCTP,在Rosetta(DE3)中表达、纯化得到了相对分子量约18.5 kDa的融合蛋白,与预期相符;测序结果显示C2株贾第虫TCTP序列与WB株相同,生物信息学分析显示贾第虫TCTP蛋白虽然序列长度较其它物种更短但与裂殖酵母TCTP空间结构相似,均由4个β折叠和3个主要的α螺旋组成,位于序列中部的不规则环状结构更小,仅9个氨基酸残基组成,在进化上与其它真核生物亲缘关系较远。结论成功克隆表达了贾第虫TCTP,为TCTP功能及贾第虫致病机制的研究提供了实验依据。     

C2株蓝氏贾第鞭毛虫SUMO特异性蛋白酶基因的克隆、生物信息学分析及其催化活性区的原核表达

目的 克隆C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)的SUMO-Specific Protease(SENP)基因,并对其序列进行生物信息学分析,原核表达贾第虫SENP的催化活性区。方法 提取C2株贾第虫基因组DNA,以基因组DNA为模板获得SENP编码区全长片段,连入克隆载体pGM-T,测序后进行生物信息学分析;根据分析结果克隆SENP的催化活性区,构建其原核表达载体pET-28a(+)-SENPc,在E.coli Rosetta(DE3)中诱导表达,SDS-PAGE及Western blot观察表达结果。结果 成功克隆了C2株贾第虫SENP编码区全长序列,生物信息学分析显示C2株贾第虫SENP蛋白序列与WB株相同,二级结构以无规则卷曲为主,其催化活性区位于126-497aa,被一段插入序列分割成两个部分;构建了SENP催化活性区原核表达载体并在大肠杆菌中高效表达,在相对分子量约43 kD的位置出现目的 蛋白条带,与理论值相符。结论 成功克隆了贾第虫SENP基因并原核表达了其催化活性区,为贾第虫SENP蛋白功能的研究提供了基础。