重组人内皮抑素滴眼液抑制小鼠角膜新生血管形成的研究

目的　检验重组人内皮抑素对角膜新生血管形成的抑制效果,探索其临床应用价值。 方法　用MTT方法检验重组内皮抑素对血管内皮细胞的增殖抑制活性;用重组人内皮抑素滴眼液,治疗小鼠角膜碱烧伤导致的角膜新生血管形成。 结果　重组人内皮抑素 10μg/mL时可抑制bFGF刺激下HUVEC的增殖,抑制率达到 42 1% (P<0 05); 100μg/mL的内皮抑素可抑制碱烧伤诱导的小鼠角膜新生血管形成,治疗 7d时新生血管长度较未治疗组减少 30 9%(P<0 01),新生血管化面积减少了 13 7% (P<0 01)。 结论　内皮抑素特异地抑制血管内皮细胞增殖,抑制碱烧伤诱导的小鼠角膜新生血管形成,可能成为临床上预防、治疗相关眼科疾患的药物。     

中医药治疗乳痈近况

中医药治疗乳痈近况河南４５０００２河南省中医院马清钧主题词乳痈／中医药疗法，综述乳痈是乳房急性化脓性疾病，哺乳期妇女较易患之，发病率约占产妇１％，以初产妇为多见，好发于产后第３～４周。现将近１０余年来中医药治疗乳痈概况作一简要综述。内治法辨证求因，审...     

乾列安胶囊治疗肾阳亏虚型前列腺增生症疗效观察

乾列安胶囊是在济生肾气丸基础上加减而成,有减轻膀胱颈部阻力,相对升高膀胱内压而利尿通闭,并有抗炎镇痛,协调体内激素平衡等作用,达到缩小增生前列腺及缓解排尿困难的效果。其疗效明显优于对照组前列康片。     

脚气净洗剂治疗足癣168例

我们自拟中药脚气净洗剂,治疗足癣１６８例,取得了满意疗效,报告如下。１　一般资料１１　一般情况　１９９４～１９９７年共诊治１６８例足癣患者,其中男１１６例,女５２例;病程最长者２３年,最短者３个月。１２　临床分型１２１　风湿型（８７例）　主要表现为水疱与脱屑。足底及趾间发生较深的水疱,疱膜较厚,不易自然溃破。水疱往往聚集成群,也可融合成片,瘙痒剧烈,不久水疱自然吸收,干后脱屑。该型相当于现代医学足癣的水疱型。１２２　湿热型（３２例）　主要表现为糜烂渗出。趾间湿润,糜烂浸润,瘙痒臭秽,…     

丙型肝炎病毒河北定州株C33c基因的克隆、序列分析及在大肠杆菌中的表达

采用反转录ＰＣＲ方法从河北定州地区献血员血清中克隆了丙型肝炎病毒（ｈｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓ，ＨＣＶ）的Ｃ３３ｃ抗原基因，序列分析结果表明，该株的Ｃ３３ｃ基因和中国泰安株的同源性为９１．０％，氨基酸序列同源性为９２．２％；与ＨＣＶ河北株的同源性分别为９１．３％和９６．２％；和日本ＪＫ１株的同源性分别为９１．６％和９４．８％。克隆的基因在大肠杆菌中得到表达和纯化，并可用作抗ＨＣＶＥＬＩＳＡ试剂的抗原组分     

乙型肝炎病毒adw亚型基因组的无性繁殖成功

乙型肝炎病毒基因的无性繁殖,为研究乙型肝炎病毒分子生物学、乙型肝炎和肝癌的诊断与防治及应用遗传工程技术研制乙型肝炎疫苗,具有重要意义。我国乙型肝炎发病率较高,据流行病学调查,主要为adr和adw亚型。adr亚型基因组的无性繁殖已由中国科学院生物化学研究所首次克隆成功。我们采用乙型肝炎病毒(HBV)携带者的血浆,经琼脂双扩散和反向间接血凝试验鉴定为adw亚型,电镜观察确有HBV Dane颗粒存在。用30％蔗糖离心富集血浆中的Dane颗粒,以1％NP_(40)裂解,利用内源性聚合酶进行修补单链完全后,于30％蔗糖离心沉淀颗粒,再以SDS、蛋白酶K处理,酚抽,5—20％线形蔗糖梯度离心进行分离和纯化DNA,将所得DNA于琼脂糖凝胶电泳显示为二条带,一条为环状DNA,另一条为线DNA。与~(125)I-HBVDNA(adw亚型)点杂交,表明确系HBVDNA。取90ng经EcoRI限制酶酶解的HBVDNA,与经EcoRI酶切、磷酸单脂酶处理的700ng线形pBR325质粒DNA相     

霍乱弧菌脂多糖O-抗原基因的克隆和表达

构建新型的霍乱疫苗,应包含抗菌体和毒素两种抗原.脂多糖O-抗原是抗菌免疫中主要的保护性抗原,我们利用限制内切酶Sau3A将霍乱弧菌178(埃尔托生物型、小川血清型)染色体DNA,进行部分酶切后,分离大小为30～50Kb的片段,与经过BamH1酶切的柯斯质粒pHC79连接重组,通过体外包装系统形成噬菌体颗粒,感染受体菌E coliHB101,构建成霍乱弧菌178染色体基因文库.采用血清凝集试验及菌落固相ELISA方法,从基因文库中筛选到13株能够表达霍乱弧菌脂多糖O-抗原的阳性克隆.经热酚-水法从转化子中提取并纯化的脂多     

外源性表皮生长因子治疗大鼠慢性胃溃疡对原癌基因表达的影响

目的通过观察外源性ＥＧＦ对大鼠实验性胃溃疡治疗后,对胃粘膜组织学及原癌基因ｃｍｙｃ基因及ｃｆｏｓ基因表达的影响,探讨ＥＧＦ在溃疡治疗中应用的可能性．方法乙酸烧灼法制备溃疡模型．术后次日１５只以西咪替丁１００ｍｇ／（ｋｇ·ｄ）ｓｃ治疗,６只以生理盐水治疗,１４只及１０只对照组大鼠以ＥＧＦ１０μｇ／（ｋｇ·ｄ）ｓｃ治疗,共４ｗｋ．于实验的１ｗｋ及１２ｗｋ分别处死动物,进行组织学及原位杂交检查．结果ＥＧＦ治疗后胃粘膜无异型增生出现．正常胃粘膜ｃｍｙｃ基因表达阴性,ｃｆｏｓ基因表达弱阳性;治疗１ｗｋ后的溃疡边缘ｃｍｙｃ基因、ｃｆｏｓ基因表达弱阳性．实验ｗｋ１２溃疡治愈后胃粘膜ｃｍｙｃ基因表达阴性,ｃｆｏｓ基因表达水平无升高．ＥＧＦ作用正常胃粘膜后,ｃｍｙｃ基因,ｃｆｏｓ基因表达水平无升高．结论外源性ＥＧＦ长期作用于正常及溃疡状态胃粘膜后,不引起与癌相关的组织学改变及原癌基因的激活     

鼠抗人内皮抑素单克隆抗体的制备与鉴定

目的:制备抗人内皮抑素的单克隆抗体(mAb),为深入研究内皮抑素的作用机制提供一种有用的试剂。方法:以毕赤酵母表达的内皮抑索为免疫原免疫BALB/c小鼠,采用B细胞杂交瘤技术,以间接ELISA法筛选分泌抗人内皮抑素的特异性mAb的杂交瘤细胞株,并诱生腹水。腹水中的mAb采用 Protein A Sepharose CL-4B进行纯化。以标准的抗Ig血清做ELISA,鉴定mAb的Ig类、亚类及型;用免疫印迹法鉴定mAb的特异性。结果:获得1株可分泌抗人内皮抑素mAb的杂交瘤细胞株4E7,该株杂交细胞分泌的mAb属于IgGl(λ型)。腹水mAb的效价为1×10-4-1×10-6,纯化后大于1×10-10。免疫印迹结果显示,mAb 4E7可特异性地与酵母及大肠杆菌表达的内皮抑素起反应,而与bFGF等其他细胞因子不发生交叉反应。结论:分泌抗人内皮抑素mAb杂交瘤细胞株的建立,为进一步研究奠定了基础。     

产生霍乱毒素B亚单位的工程菌在LB培养基中的振荡培养

表达霍乱毒素B亚单位的工程菌MM2菌株在LB培养基中能高效合成B亚单位，观察了在培养过程中吸光度、pH及B亚单位产生的动态变化，3L摇瓶振荡培养，B亚单位产量可达16ug/ml。