SARS病毒核衣壳蛋白抗体消长规律

研究SARS病毒抗体的消长规律对于评价患者的愈后及SARS疫苗的使用效果具有重要意义。本项目选用了军事医学科学院生物工程研究所研制的双抗原夹心SARSN蛋白抗体ELISA诊断试剂。对2 79例临床确诊的、发病不同时间SARS患者的血清进行检测,并同时跟踪检测了4 1例SARS患者在不同发病时间(发病3d至16 0d)的血清标本,对抗体产生的时间规律进行了研究。材料和方法标本来源:所用的SARS病例标本为本院检验科从2 0 0 3年2月7日开始,从本院收治病人及广州市中山二院、177医院、广州市第八人民医院、北京小汤山医院收集的SARS病人血清标本…     

新霍乱疫苗的研制与应用

霍乱是世界烈性传染病，由革兰氏阴性的霍乱弧菌引起，世界第７次大流行自１９６１年延续至今，波及五大洲１００多个国家，尚未得到有效控制，且于１９９２年出现了新的血清型流行株，表明全球急需有效的霍乱疫苗。霍乱疫苗的免疫接种已有１００多年历史，免疫效果不理想，仅能有短期保护作用。通过近十多年的研究，尤其是基因工程重组ＤＮＡ技术的应用，已研制出一些新的霍乱疫苗：（１）ＢＳ／ＷＣ灭活疫苗。由于毒的霍乱毒素Ｂ亚     

一种EGFR导向的低分子量融合细菌毒素

国内外研究发现，在乳腺癌、肺癌等实体瘤细胞的表面有异常大量的表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ），依据这一特性，利用ＥＧＦＲ的配体或抗体与细菌毒素融合，国外已报道几种ＥＧＦＲ导向的免疫毒素。这些免疫毒素显示了良好的杀肿瘤细胞活性，但还存在毒素的分子量较大，影响免疫毒素高效进入靶细胞，及免疫原性较高的不足，影响了其作为肿瘤治疗药物的应用     

关于中医函大面授时间的调查研究（一）

关于中医函大面授时间的调查研究（一）刘读文，马照寰，阎晓天，曹大明，李雁，马清钧，张日宏（河南中医学院，郑州４５０００３）主题词中医学，教育／调查，时间／调查面授时间。面授方法以及考核措施是关系函授大学教学质量的三大环节，因此为了给中医函授教育提供切...     

口服霍乱WC-rBS疫苗胶囊的安全性和免疫原性研究

目的评价国产胶囊剂型、灭活霍乱全菌体（WC）与重组B亚单位（rBS）联合疫苗（WC-rBS）的安全性和免疫原性，比较水剂与胶囊剂型的免疫效果。方法选择74名志愿者，按随机分层分组分为胶囊剂组（32人WC1011CFU＋rBS1mg／人次）、水剂用（32人WC1011CFU＋rBS1mg／人次）及安慰剂组（10人）。结果和结论WC－rBS胶囊剂疫苗安全、服苗组未见任何不良反应；免疫原性好，粪抗CT、抗LPS和Vab阳转率分别为84．4％、90．6％和71．9％，血清抗CT、抗LPS和Vab阳转率分别为84．4％，78．1％，抗87．5％。     

葡聚糖凝胶层析分离微量DNA技术

在分子遗传学和遗传工程研究中,常常涉及分离纯化微量DNA,而且需从某些低分子量的物质中分离和纯化DNA。我们应用葡聚糖G-100柱层析和葡聚糖G-50离心层析两个方法都能达到这个目的。     

应用均聚物接尾次级克隆乙型肝炎病毒基因组

重组DNA连接方法有粘末端连接、同聚尾连接和平端连接。同聚尾连接是通过末端转移酶将同聚的单链互补物加至二种不同DNA分子的3′末端,经退火形成重组分子,这种退火的重组分子具有感染性,能在转染过程中在体内共价闭合。最初应用同聚尾连接DNA分子时,在用末端转移酶前,必须先用外切酶处理DNA分子,暴露单链3′末端才能有效地接尾;后来发现低离子强度或以Co~( )离子代替Mg~( )离子,能使末端转移酶对完整的DNA双链分子发生作用。应用同聚尾连接DNA的主要优点是:DNA不一定需要有特殊的限制酶切点,可应     

与霍乱毒素A1亚基突变体相互作用蛋白的筛选

目的 寻找新的与霍乱毒素A1亚基（CTA1）突变体（S63F）相互作用的蛋白。来探讨CT佐剂活性的分子机理。方法 应用酵母双杂交技术,以CTA1（S63F）为诱饵蛋白筛选人脾细胞cDNA文库,并通过共转染,免疫共沉淀和Western杂交在哺乳动物细胞COS-7中确证诱饵蛋白和候选蛋白之间的相互作用。结果 筛选获得一个与HLAⅠ类分子α亚基高度同源的蛋白。这个蛋白在酵母核内以及COS-7细胞中都显示出与CTA1（S63F0的相互作用,结论 CTA1（S63F）与HLAⅠ类分子α亚基内以及COS-7细胞中都显示出与CTA1（S63F）的相互作用。结论 CTA1（S63F）与HLAⅠ类分子α亚基的相互作用可能导致HLAⅠ类分子进入“膜筏”,引起膜筏不断聚集增大,聚集到一定程度后筏相关酪氨酸蛋白激酶活化,启动胞内信号的级联传递,增强免疫反应。     

CTB-mST2融合蛋白在大肠杆菌表达及其生物活性鉴定

目的:表达霍乱毒素B亚单位(CTB)和大肠杆菌突变的热稳定肠毒素(mST)的融合蛋白,并进行抗原性和免疫原性的分析.方法:通过连接肽(linker)将CTB基因和串连的mST连接,然后插入表达载体pET-22b( ),获得克隆,经IPTG诱导获得CTB-mST2融合蛋白.采用多因素正交优选法优化了培养基及培养条件,对表达产物进行包涵体复性后,经过亲合层析纯化得到融合蛋白,并对该融合蛋白抗原性和免疫原性进行了分析.结果与结论:构建了高效表达工程菌,经摇瓶培养,在优化培养基及培养条件下融合蛋白表达量可达320 mg/L,占总蛋白40%.融合蛋白免疫小鼠,可获得高滴度抗CTB和ST血清;将融合蛋白与灭活的O157∶ H7菌体组合免疫小鼠,可产生对O157∶ H7毒株攻击的保护力.本研究可为构建抗ETEC和EHEC复合疫苗提供依据.