卵巢颗粒细胞体外培养体系的建立及DEHP、MEHP对其增殖功能的影响

目的：建立卵巢颗粒细胞的原代培养体系，探讨邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）及其活性中间产物邻苯二甲酸单（2-乙基）己酯（MEHP）对原代培养的卵巢颗粒细胞增殖作用的影响。方法：选用21～25日龄未成年雌性Wistar大鼠，皮下注射孕马血清（PMSG），48h后断头处死，收集卵巢颗粒细胞，在DMEM—F12培养液中培养。卵巢颗粒细胞原代培养体系建立成功后分别将不同剂量的DEHP（1μM、5μM、25μM、50μM、100μM）和MEHP（1μM、5μM、25μM、50μM、100μM）作用细胞24h及48h，以CCK-8法检测细胞增殖情况。结果：DEHP作用卵巢颗粒细胞24h时，1μM DEHP和100μM DEHP均能明显抑制卵巢颗粒细胞增殖，差异有统计学意义（P〈0．05）。DEHP作用卵巢颗粒细胞48h时，1μM DEHP和100μMDEHP均能明显促进卵巢颗粒细胞增殖，差异有统计学意义（P〈0.05）。而MEHP作用卵巢颗粒细胞24h及48h，MEHP各染毒剂量组均无统计学差异（P〉0．05）。结论：DEHP能促进卵巢颗粒细胞增殖，并且和作用时间长短有关。MEHP在观察剂量下，尚未显示有促进卵巢颗粒细胞增殖的作用。     

DEHP、MEHP对小鼠胚胎干细胞细胞毒性的研究

目的分析不同浓度的邻苯二甲酸二乙基己酯[di(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP]及其活性代谢产物邻苯二甲酸单乙基己基酯[mono(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP)对小鼠胚胎干细胞细胞毒性、增殖的影响。方法用含有不同浓度DEHP(1 000、100、10、1、0.1、0.01μmol/L)、MEHP(1 000、100、10、1、0.1、0.01μmol/L)的培养液,对胚胎干细胞进行培养,用CCK-8法检测细胞活性。结果染毒96 h后,高剂量(1 000μmol/L)DEHP、MEHP均对胚胎干细胞的增殖有抑制作用(P<0.05),且染毒剂量与细胞抑制率之间存在明显的正相关性,相关系数分别为0.51、0.62(P<0.05)。结论在一定浓度范围内,DEHP及MEHP均对小鼠ESC具有细胞毒性,且有浓度依赖性。     

邻苯二甲酸二乙己酯及双酚A联合染毒对大鼠肝脏的影响

目的研究邻苯二甲酸二乙基己酯（Di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP）和双酚A（Bisphenol A,BPA）联合暴露对大鼠肝脏的影响。方法将Wistar大鼠随机分4组,分别灌胃1 500mg/kg DEHP、200mg/kg BPA及750mg/kg DEHP＋100mg/kg BPA染毒6周。染毒终点测定血清中碱性磷酸酶（ALP）、胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）及镁离子（Mg2＋）含量;检测肝匀浆中谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）含量。结果与对照组比较,DEHP明显升高血清ALP、CHO及Mg2＋含量,而BPA明显增加肝中MDA含量（均P〈0.05）。与对照组比较,DEHP＋BPA联合染毒除明显增加肝脏脏器系数外,对大鼠体重、肝MDA、血脂及血清Mg2＋和ALP含量均无明显影响。与DEHP＋BPA联合染毒组比较,BPA显著升高肝脏MDA含量;DEHP增加血清Mg2＋含量差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论 DEHP和BPA单独染毒均可产生肝损伤,其联合暴露产生交互作用。     

青春期前DEHP暴露对雌性大鼠机体发育及卵巢脂质过氧化的影响

目的：研究邻苯二甲酸二乙基己酯（DEHP）对青春期前雌性大鼠机体发育及卵巢组织脂质过氧化水平的影响。方法：将40只4周龄雌性Wistar大鼠，随机分成0，50，150，500mg／（kg·d）剂量组。每周连续染毒5天，染毒4周，于末次染毒24小时后进行阴道涂片并处死处于动情间期的动物。用分光光度法测定组织和血中超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化氢酶（CAT）酶的活性和丙二醛（MDA）含量。结果：500mg／kg剂量组肝脏重量、肝脏系数及肾脏重量高于对照组，差异具有显著性（P〈0．05）；DEHP染毒500mg／kg组的卵巢中SOD活性，与对照组和其他剂量组相比显著下降（P〈0．05）。DEHP各染毒剂量组卵巢和血中CAT活性和MDA含量与对照组相比无明显差异（P〉0．05）。结论：青春期前DEHP暴露对雌鼠的肝脏及肾脏产生损伤作用，DEHP可能对卵巢抗氧化系统有一定影响。     

某地区民航空勤人员健康状况分析

目的了解某地区民航空勤人员的健康状况,为飞行人员健康管理及常见病防治提供依据。方法以2015年1—12月在民航某管理局医学中心参加健康体检的空勤人员为研究对象,采用t检验、Wilcoxon秩和检验、χ2检验对空勤人员体检指标、患病率进行比较。结果体检人群中高尿酸血症患病率最高为29.2%,脂肪肝、超重次之,其患病率分别为28.9%、18.2%。在35岁组及35~45岁组中安全员总体健康状况好于驾驶员(P0.05);各年龄组安全员与驾驶员心电图异常及听力异常患病率差异均有统计学意义(P0.05),与安全员比较,驾驶员高尿酸血症、高脂血症、脂肪肝等代谢性疾病患病率较高(P0.05)。结论某地区民航空勤人员总体健康水平较低,空勤人员的健康主要受高尿酸血症、脂肪肝、超重等疾病威胁;应有针对性的制订健康管理方案,加强不同工种空勤人员的健康管理。     

孕妇产前抑郁状况与人格、妊娠压力的相关性研究

目的:探讨孕妇产前抑郁状况与人格、妊娠压力的关系。方法:采用妊娠压力量表、艾森克人格简式量表(EPQ-RSC)、贝克抑郁自评量表(BDI)对西安市某医院546名孕妇进行调查。对收集到的数据进行t检验、方差分析、相关分析和多元回归分析。结果:西安市孕妇产前抑郁检出率为64.5%;产前抑郁组与正常组孕妇在妊娠压力、人格中的内外倾及神经质方面存在显著性差异(P0.05);妊娠压力、压力源1、压力源2、压力源3、其他压力源、神经质与产前抑郁呈显著正相关(P0.05),内外倾、掩饰性与产前抑郁成负相关(P0.05);神经质人格、妊娠压力及内外倾人格对产前抑郁有显著影响。结论:神经质、妊娠压力、内外倾是影响产前抑郁的关键因素。     

邻苯二甲酸单乙基己基酯对小鼠胚胎干细胞多能性相关转录因子表达的影响

[目的]研究邻苯二甲酸单乙基己基酯(MEHP)对小鼠胚胎干细胞多能性维持能力的影响。[方法]不同浓度的MEHP(0、0.1、1、10、100、1 000μmol/L)处理小鼠胚胎干细胞(m ESCs)4 d,观察细胞形态,采用流式细胞术检测细胞凋亡指标;应用碱性磷酸酶染色法、real-time PCR及Western blot分别检测其分化情况、胚胎干细胞多能性相关转录因子SOX2、OCT4基因及其蛋白表达水平。[结果]随着MEHP染毒浓度的增加,m ESCs克隆的细胞团逐渐缩小,且数量也出现减少,以1 000μmol/L组尤为明显;细胞凋亡检测结果发现,随着染毒浓度增加,凋亡率呈增加趋势,与对照组相比,仅1 000μmol/L组m ESCs总细胞凋亡率[(9.58±2.02)%]的升高有统计学意义(P0.05)。碱性磷酸酶染色结果显示,1 000μmol/L组m ESCs着色较浅,甚至未着色,即出现分化倾向,而其他组m ESCs均被染成深蓝色或蓝紫色。与对照组相比,100、1 000μmol/L组中SOX2、OCT4基因表达降低(均P0.05);1 000μmol/L组SOX2、OCT4蛋白表达降低(均P0.05)。[结论]一定浓度MEHP对m ESCs存在细胞毒性,抑制m ESCs正常生长,降低m ESCs中多能性相关转录因子SOX2、OCT4的表达,进而影响胚胎早期发育。     

氯化锰对雄性大鼠亚急性生殖毒性机制研究

选取健康性成熟雄性Wistar大鼠灌胃染毒 10mg/kg、 2 0mg/kg和 40mg/kg氯化锰 ,每日 1次 ,连续染毒3 0d ,应用分光光度法测定血清和睾丸匀浆中MDA、ROS、NO、SOD、GSH Px、LDH、LDHx、G 6 PD、β G和NOS的水平和活力。结果显示 ,染毒氯化锰 2 0mg/kg组仅睾丸匀浆中ROS、SOD、LDHx和G 6 PD活力与阴性对照组比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。在 40mg/kg组 ,血清中LDHx和G 6 PD下降 ,睾丸匀浆中的MDA、ROS升高 ,SOD、GSH Px、LDHx和 β G活力下降 ,与对照组比较差异有显著性或高度显著性 (P <0 0 5或P <0 0 1) ,并且SOD、ROS、LDHx和G 6 PD有明确剂量 效应关系 ,r值为 0 5 782、 -0 5 3 47、 -0 5 814和 -0 4972 (均P <0 0 5 )。各染毒剂量组睾丸匀浆中NOS活力均明显高于对照组 ,差异有显著性 (均P <0 0 5 )。说明亚急性染毒氯化锰可使大鼠睾丸组织产生脂质过氧化作用 ,使睾丸标志酶活力降低 ,睾丸匀浆中NOS活力升高 ,使间质细胞、支持细胞和生精细胞受损 ,并形成一个损伤链 ,这些可能是锰致雄性生殖功能受损的部分机制     

DEHP及MEHP对小鼠卵巢颗粒细胞分泌功能的影响

目的：研究邻苯二甲酸二（2_乙基）己酯（DEHP）及其活性中间产物邻苯二甲酸单（2_乙基）己酯（MEHP）对卵巢颗粒细胞及其激素合成、分泌功能的影响。方法：体外培养健康初断乳ICR小鼠的卵巢颗粒细胞,分别加入DEHP（10、50、250nmol/L）,MEHP（10、50、250nmol/L）和溶剂对照（DMSO）,作用细胞24h。用RT-PCR法测定原代小鼠颗粒细胞中类固醇激素合成急性调节蛋白（StAR）和P450侧链裂解酶（P450scc）mRNA水平;用Realtime-PCR法测定原代小鼠颗粒细胞中芳香化酶（CYP19）和过氧化物酶体增殖剂激活受体（PPARα、PPARβ、PPARγ）mRNA水平;用酶联免疫法（EIA）检测卵巢颗粒细胞上清液中雌二醇和孕酮的水平。结果：与对照组比较,250nmol/LMEHP抑制StAR基因及P450scc基因表达（P均〈0.05）;250nmol/LDEHP对CYP19基因表达有促进作用（P〈0.05）;而10、50nmol/LDEHP及50、250nmol/LMEHP对CYP19基因表达均有抑制作用（P〈0.05）。除10nmol/LDEHP外,DEHP及MEHP其它浓度组均能抑制PPARα、PPARβ基因的表达（P〈0.05）;10nmol/LDEHP及MEHP对PPARγ基因表达有促进作用（P〈0.05）,而250nmol/LMEHP对PPARγ基因表达有抑制作用（P〈0.05）。各剂量DEHP及MEHP均能使颗粒细胞分泌雌二醇增加（P〈0.05）,10nmol/LDEHP、50及250nmol/LMEHP抑制颗粒细胞分泌孕酮（P〈0.05）。结论：DEHP及MEHP影响颗粒细胞类固醇激素合成酶、PPARs的基因表达及分泌功能。