VEGF靶向性siRNA表达载体的构建及其沉寂作用

目的：构建针对VEGF的siRNA表达载体,转染入人骨肉瘤细胞系MG-63观察其对细胞VEGF表达的沉默效应.方法：设计VEGF发卡样siRNA,依据设计合成两条互补的寡核苷酸链,退火后连接入T载体,转化扩增后进行序列测定.用脂质体包裹转染骨肉瘤细胞MG-63,用RT-PCR方法检测细胞VEGF mRNA表达水平.结果：把针对VEGF基因的siRNA的双链寡合苷酸片断克隆到表达载体pSuperneo,经过酶切鉴定与测序,结果正确;稳定转染人骨肉瘤细胞系MG-63后,用RT-PCR方法检测细胞VEGF mRNA表达水平明显降低.结论：成功构建出针对VEGF的siRNA表达载体pSuper-neo-VEGF,转染骨肉瘤细胞后能显著降低细胞VEGF mRNA表达.     

头孢菌素C反应性萃取的初步研究：I.萃取体系的选择

对季铵盐７４０２反应性萃取头孢菌素Ｃ的性能进行了系统研究。通过对萃取剂、稀释剂、助溶剂的比较和筛选，确定萃取体系为７４０２－２０％（Ｖ／Ｖ）正辛醇－乙酸丁酯。     

RT-PCR检测癌胚抗原基因转染树突状细胞的表达

目的 :通过向人DCs转染含人CEA真核表达质粒 ,使DCs特异性的表达和提呈CEA。方法 :RT -PCR检测转染人CEA真核表达质粒DCs的表达。结果 :转染CEA质粒的DCs,RT -PCR检测有一特异性扩增带。结论 :用脂质体能成功将人CEA真核表达质粒转入DCs并表达     

转染癌胚抗原基因的人树突状细胞疫苗表达的研究

目的 探索使用质粒转导制备转基因DCs疫苗的方法。方法 采用细胞因子rhIL-4和rhGM—CSF诱导培养法制备人外周血树突状细胞，用Lipofectine向人DCs转染含人CEA真核表达质粒。结果 转染组DCs培养上清CEA含量明显高于末转染组培养上清CEA含量。结论 人CEA真核表达质粒转染DCs可内源性表达CEA。