靶向人BRG1基因的慢病毒载体构建及效率验证

目的:构建靶向人BRG1基因的短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体并验证其沉默效率。方法:设计3个针对人BRG1基因的特异性shRNA序列(shBRG1),构建于pLKO.1慢病毒载体中,并与psPAX2和pMD2.G质粒共同转染293T细胞以包装成慢病毒颗粒。将包装好的慢病毒感染人主动脉平滑肌细胞(HASMC),应用实时荧光定量PCR和western blot检测BRG1 mRNA和蛋白表达水平,判断其沉默效率。结果:3种shBRG1干扰序列均成功插入慢病毒载体中且测序正确,3种慢病毒均可有效降低BRG1 mRNA表达水平(P均0.01)。其中shBRG1-3的沉默效率最高,其感染HASMC后BRG1蛋白表达水平较对照组显著下降(P0.01)。结论:靶向人BRG1基因的shRNA慢病毒表达载体构建成功,shBRG1-3慢病毒能够有效降低BRG1 mRNA和蛋白表达水平。     

七例疑似受照的医疗工作人员染色体畸变分析

目的 通过对怀疑受到电离辐射照射的医疗工作人员进行外周血淋巴细胞染色体畸变分析,探讨可能的受影响因素.方法 某医院检验科工作人员7名,男性1名,女性6名.他们工作室的楼下是医院CT室,工作室和CT室间的楼板为厚度约6 cm的普通预制板.采用常规法,对7名人员外周血淋巴细胞染色体畸变进行分析.结果 4例女性工作人员外周血中检测到双着丝粒体(dic),dic率为0.40％ ～ 1.60％,明显高于dic的自发率(0.03％,x2=36.79,P＜0.05);在所有工作人员中均检测到易位畸变,易位率在0.33％～1.20％之间,明显高于易位的自发率(0.01％,X2=42.90,P＜0.05).结论 推测这些工作人员受到过量电离辐射照射.     

成人主动脉瓣置换 927 例回顾性分析

目的 探讨近20年来中国大陆主动脉瓣病变的病因构成、变迁及成人主动脉瓣置换手术的早期预后。 方法 回顾性分析1990年1月至2009年12月第二军医大学长海医院927例成人主动脉瓣置换术患者的临床资料。 结果 先天性和退行性病变是近年来成人主动脉瓣置换术的主要病因。风湿性和感染性病变比例逐渐下降,而退行性和先天性病变比例不断上升。后10年内患者的术后呼吸机辅助时间、术后ICU停留时间及术后住院时间均较前10年明显缩短（P<0.05）。927例患者中44例发生在院死亡,总在院病死率4.7%;男女性病死率差异无统计学意义;近15年内患者手术病死率下降,明显低于最初5年（P<0.05）。 结论 国人主动脉瓣疾病的病因近20年来发生明显变化;成人主动脉瓣置换术后在院病死率较前下降。     

非体外循环下冠状动脉旁路术

冠状动脉搭桥术 (Ｃｏｒｏｎａｒｙａｒｔｅｒｙｂｙｐａｓｓｇｒａｆｔｉｎｇ ,ＣＡＢＧ)是治疗冠心病的有效方法之一。近年来 ,冠心病的外科治疗在我国各大医院已普遍开展 ,传统的ＣＡＢＧ是在体外循环心脏停搏下完成的。为避免应用体外循环技术本身所引起的各种并发症 ,90年代后期逐渐兴起非体外循环心脏不停跳冠状动脉搭桥术 (Ｏｆｆ ｐｕｍｐＣＡＢＧ ,ＯＰＣＡＢ)。上海长海医院 2 0 0 1年 2月 - 2 0 0 2年 3月施行非体外循环下搭桥术 10 8例 ,效果满意。1　对象与方法1 1　临床资料 :本组 10 8例ＯＰＣＡＢ患者 ,男 82例 ,女 2 6例 ,…     

组织工程心脏瓣膜内皮细胞的整合素β1表达

目的体外构建组织工程心脏瓣膜（TEHV）,初步探讨内皮细胞黏附生长的分子机制。方法猪主动脉瓣膜经胰酶-EDTA、表面活性剂、核酸酶处理,去除猪主动脉瓣叶的细胞成分,测定瓣叶脱细胞后的生物力学特性;将扩增的人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）种植在瓣叶上,体外静态构建TEHV,观察内皮细胞的生长状态。消化瓣膜内皮细胞,半定量RT-PCR检测内皮细胞整合素＆mRNA的表达,Western-Blot检测内皮细胞膜上整合素＆蛋白的表达。结果猪主动脉瓣膜中的细胞成分能完全去除,脱细胞瓣叶的生物力学特性同新鲜瓣叶相比无明显变化;种植的HUVECs在瓣叶表面生长状态良好,长成一层连续的细胞层。瓣膜内皮细胞可检测到整合素岛mRNA和蛋白的表达。结论脱细胞猪主动脉瓣膜作为支架,HUVECs做种子细胞可以成功构建TEHV,瓣膜内皮细胞可以表达整合素岛。     

乳腺癌和非癌组织中DLC1基因及蛋白表达与Ki-67的关系

目的：探讨乳腺癌和非癌组织中DLC1表达及其与Ki-67的相互关系。方法：应用原位杂交技术和免疫组织化学EnVision两步法,检测52例乳腺浸润性导管癌和42例非癌组织（包括癌旁乳腺组织20例和乳腺纤维腺瘤22例）中DLC1-mRNA、DLC1和Ki-67的表达。结果：DLC1-mRNA和蛋白在乳腺癌中的阳性率（50％和57．7％）低于非癌乳腺组织（90．5％和92．9％）,差异有统计学意义（X2=17．518和10．729,P〈0．01）。DLC1-mRNA与蛋白的表达呈正相关（L=0．379,P〈0．01）。Ki-67在乳腺癌中的阳性率为61．5％,而在非癌组织中均呈阴性表达,两者差异有显著统计学意义（x=39．186,P〈0．01）。乳腺癌中DLC1与Ki-67的表达呈负相关（rs=-0．507,P〈0．01）。结论：DLCI—mRNA和蛋白在乳腺癌中呈低表达或缺失,提示其与乳腺癌的发生、发展有关,DLC1有抑制乳腺癌细胞增殖的功能,可作为乳腺癌新的分子标记物。联合检测DLC1和Ki-67在乳腺癌中的表达,有望成为估价乳腺癌生物学行为的参考指标。     

泌乳素腺瘤的影像表现和临床特点的相关研究

目的探讨泌乳素腺瘤在不同性别患者中的影像特点,泌乳素水平,临床表现和治疗效果之间的关系。方法选择在我科手术治疗的84例(男23,女61)泌乳素腺瘤患者为研究对象,按照性别、肿瘤生长方式、血清泌乳素水平分类,与其临床表现和预后进行对比研究。结果男性患者中高泌乳素者(69.6%)明显多于女性(40.9%)。高泌乳素组中,男性患者均为广泛侵袭性生长的巨大腺瘤(100%)。女性高泌乳素组中,肿瘤大小与激素关系不明显而与生长方式相关。女性泌乳素腺瘤患者的治疗效果明显优于男性。结论垂体泌乳素腺瘤患者术前的激素水平、影像特点和肿瘤生长方式的综合评估对合理选择治疗方法、改善预后有着重要意义。     

缺血性脑卒中后血管新生及针刺干预研究进展

临床上,缺血性脑卒中发生后,恢复缺血区域血供、增加受损区域氧供给、及时挽救缺血半暗带是治疗关键。血管新生可使受损脑组织重新获得氧气与血供,而血管新生又受到多因子、多层面、多通路、多角度控制,是近年脑卒中领域研究热点。针刺作为一种外源性物理刺激可调控诸多复杂机制以促进血管新生。围绕血管内皮生长因子、血管生成素、干细胞、RNA等关键靶点,本文对缺血性脑卒中血管新生机制及针刺干预作用加以综述,以期为针刺治疗缺血性脑血管病提供参考。     

大型蝶骨嵴内侧脑膜瘤的显微外科治疗策略

目的探讨大型蝶骨嵴内侧脑膜瘤的显微手术入路，切除技巧及术后并发症预防等相关问题的处理方法。方法回顾性分析2000至2006年间我科收治的37例内侧型蝶骨嵴脑膜瘤病例的临床资料、显微手术过程及疗效预后情况。结果所有病例均接受显微外科手术，并按Simpson手术分级评定手术结果。肿瘤全切（Ⅰ、Ⅱ）32例，其中Ⅰ级14例，Ⅱ级18例；Ⅲ级切除3例；Ⅳ级切除2例。无手术死亡，术后并发视力下降3例，2例不全瘫痪。术后1年MRI扫描，Ⅰ、Ⅱ级切除组病例未见肿瘤复发，Ⅲ级切除有2例复发，次全切除组（Ⅳ级）全部复发。结论采用精细的显微外科技术，仔细辨别肿瘤与周围血管、神经间的蛛网膜间隔，在充分保全与肿瘤粘连血管、神经的前提下最大限度地切除肿瘤，可显著提高疗效，减少肿瘤复发。对未能全切病例，术后放疗可延缓肿瘤复发。     

剪应力和周向应变联合作用下血管内皮细胞内自由Ca2+响应

机械力调节血管内皮细胞功能.Ca2+在机械力信号转导中扮演了重要的角色.本文研究剪应力和周向应变联合作用下血管内皮细胞内自由Ca2+浓度的变化规律,结果表明,在生理周向应变条件(小于15%)下,同时暴露于剪应力和周向应变的细胞内自由Ca2+浓度变化更依赖于剪应力大小而非周向应变的大小,Ca2+浓度升高主要是胞外Ca2+内流引起的.