髓鞘碱性蛋白(MBP)特异的Wistar大鼠T细胞系的建立

目的：建立特异的大鼠T细胞系，为T细胞疫苗的研制打下基础。方法：采用足垫皮内注射豚鼠全脊髓匀浆（GPSCH）－福氏完全佐剂（CFA) 合乳剂和百日咳疫苗，诱导Wistar大鼠EAE模型。腹股沟淋巴结细胞经豚鼠髓鞘碱性蛋白（GPMBP）反复刺激，^3H-TdR掺入法筛选针对GPMBP特异增殖的T细胞。FACS检测T细胞表型。RT－PCR测定T细胞的细胞因子格局。结果：一次性足垫皮内注射GPSCH－CFA混合乳剂可诱导Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型，并证实了同时注射百日咳疫苗能提高发病率和发病程度。EAE大鼠脑、脊髓组织HE染色见大量淋巴细胞浸润，在血管周围形成淋巴鞘、但未见脱髓鞘改变。T细胞对GPMBP呈特异性增殖，为CD4^ 表型。RT－PCR结果显示T细胞IL－2和IFN－γmRNA表达水平较高，TNF-α亦低水平表达。结论：Wistar大鼠可用于制备EAE动物模型。GPMBP特异性T细胞系为CD4^ 表型，呈TH1类细胞因子格局。     

口服耐受的机理及应用进展

口服可溶性蛋白质抗原可诱导机体形成抗原特异性免疫耐受。口服耐受由于使用方便和无毒副作用,并对自身免疫性疾病的临床治疗具有极大的应用潜能,因而成为目前研究的热点。但口服耐受的形成受到多种因素的影响,其作用机制至今也尚未完全明了。本文就近年来对口服耐受可能的作用机制研究及其应用前景等作一综述。     

鸡胶原II型诱导大鼠类风关模型的建立

用鸡胶原II型 (chickencollagenII,CCII)和完全弗氏佐剂免疫Wistar大鼠诱导胶原性关节炎 ,建立自身免疫性类风湿性关节炎 (RA)实验动物模型。以ELISA法检测实验组和对照组动物血清中的CCII抗体的水平 ,同时采用组织病理学和X射线摄片的方法显示关节炎大鼠的发病程度和病理学特征 ,并对其血液和滑膜液进行微生物学鉴定。结果显示 ,用CCII和完全弗氏佐剂免疫的实验组大鼠关节炎的发病率为 80 %,同时在免疫后 2 5d ,关节炎指数为最高 (AI=7 8)。ELISA法检测抗CCII抗体结果显示 ,实验组大鼠血清中抗CCII抗体的水平均较各对照组大鼠明显增高 (P <0 0 0 1)。组织病理学和X 射线摄片结果显示 ,关节软骨组织、骨组织和滑膜组织呈典型的关节炎病变。微生物鉴定结果均为阴性。本实验成功建立了胶原诱导的大鼠关节炎模型 ,且其病理特征和人类RA极为相似 ,为进一步深入研究人类RA的发病机制及其临床治疗提供了有价值的实验材料。     

鸡胶原Ⅱ型诱导大鼠类风关模型的建立

用鸡胶原Ⅱ型（chicken collagen Ⅱ,CCⅡ）和完全弗氏佐剂免疫Wistar大鼠诱导胶原性关节炎,建立自身免疫性类风湿性关节炎（RA）实验动物模型。以ELISA法检测实验组和对照组动物血清中的CCⅡ抗体的水平,同时采用组织病理学和X射线摄片的方法显示关节炎大鼠的发病程度和病理学特征,并对其血液和滑膜液进行微生物学鉴定。结果显示,用CCⅡ和完全弗氏佐剂免疫的实验组大鼠关节炎的发病率为80％,同时在免疫后25d,关节炎指数为最高（AI＝7．8）。ELISA法检测抗CCⅡ抗体结果显示,实验组大鼠血清中抗CCⅡ抗体的水平均较各对照组大鼠明显增高（P＜0．001）。组织病理学和X－射线摄片结果显示,关节软骨组织、骨组织和滑膜组织呈典型的关节炎病变。微生物鉴定结果均为阴性。本实验成功建立了胶原诱导的大鼠关节炎模型,且其病理特征和人类RA极为相似,为进一步深入研究人类RA的发病机制及其临床治疗提供了有价值的实验材料。     

人β—NGF基因在COS—7细胞中的表达及其生物学活性的研究

目的 研究人β-神经生长因子（β-NGF）cDNA在真核细胞中的表达及其表达产物的活性。方法 将质粒pGEM-β-NGF进行酶切并回收β-NGFcDNA片段,构建重组真核表达载体pcDNA3-β-NGF。利用脂质体Lipofectamine方法转染COS-7细胞,对阳性克隆COS-7细胞的mRNA和培养上清分别进行Northern blot分析和观察对PC12细胞突起生长的作用,结果 β-NGF基因在COS-7细胞中获得表达,阳性克隆COS-7细胞培养上清能够促进PC12细胞突起生长,结论 目的基因在COS-7细胞中成功表达β-NGF蛋白,并具有良好的生物学活性。     

电镜形态和DNA链断裂研究153Sm内照射诱发骨肉瘤细胞凋亡

目的对１５３Ｓｍ－ＥＤＴＭＰ内照射诱发骨肉瘤细胞凋亡和ＤＮＡ链断裂程度进行了研究。方法观察１５３Ｓｍ－ＥＤＴＭＰ内照射不同时间，诱发骨肉瘤细胞凋亡的电镜形态及ＤＮＡ链断裂程度。结果研究发现，在１５３Ｓｍ－ＥＤＴＭＰ内照射作用下，可呈现核断裂，核染质边聚，以及膜包裹着的凋亡小体形成的骨肉瘤细胞凋亡的形态特征。并且观察到随着１５３Ｓｍ－ＥＤＴＭＰ内照射作用时间的延长，则骨肉瘤细胞的ＤＮＡ链断裂程度亦随之增升。结论１５３Ｓｍ－ＥＤＴＭＰ内照射治疗时，可诱发骨肉瘤细胞凋亡发生，且凋亡的程度与１５３Ｓｍ－ＥＤＴＭＰ内照射作用时间相关     

系统性红斑狼疮患者外周血中Fas和sFas基因的表达

目的　研究系统性红斑狼疮 (SLE)患者外周血中Fas和sFas基因的表达情况 ,探索细胞凋亡在SLE发病中的作用。方法　采用荧光标记的RT -PCR半定量法 ,以 β -actin为内参照 ,对 38例SLE患者和 2 5名正常健康人外周血白细胞凋亡相关基因Fas和sFasmRNA的表达水平进行检测。结果　SLE患者Fas和sFas基因的表达水平分别为 (4 .1± 1.2 )和 (1.6± 0 .5 ) ,与正常对照组 (2 .7± 0 .7)和 (0 .6 9± 0 .32 )相比有高度显著性差异 (P <0 .0 0 1)。结论　SLE患者外周血细胞凋亡相关基因Fas和sFas的表达异常 ,提示细胞凋亡在SLE的发病中可能起着重要的作用