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31.
目的 构建高表达外源性Dickkopf1(DKK1)基因的重组腺病毒载体(Ad-DKK1);感染黑色素瘤细胞株后研究Wnt信号通路中主要信号分子β-catenin的表达变化. 方法 利用PCR技术扩增目的 基因DKK1;应用分子克隆技术和AdEasy系统重组腺病毒技术,把目的 基因亚克隆到穿梭质粒;经酶切和测序后,在BJAdeasy中同源重组;用PacⅠ酶切过的重组腺病毒DNA在HEK293中包装并扩增;实验分为5组:Ad-DKK1感染组、Ad-SimDKK1感染组、Ad-GFP感染组、Ad-RFP 感染组和空白细胞对照组.按照MOI值为80感染恶性黑色素瘤细胞株A375,观察细胞形态;RT-PCR法检测DKK1、β-catenin基因的表达,MTT法检测细胞活力. 结果 重组腺病毒Ad-DKK1经酶切鉴定与测序证实构建成功.感染A375细胞,感染率均大于80%,感染后细胞形态无明显改变.Ad-DKK1感染组DKK1的表达水平(1.638±0.067)与其他4组(0.718±0.086、1.424±0.125、1.414±0.089、1.423±0.088)比较差异具有统计学意义(P<0.05),其β-catenin的表达水平(0.590±0.011)与其他4组(0.895±0.012,0.749±0.024,0.754±0.012,0.759±0.014)比较差异具有显著统计学意义(P<0.01).MTT法检测细胞活力:Ad-DKK1感染组(0.370±0.014)与其他4组(0.412±0.017、0.398±0.006、0.395±0.007、0.426±0.016)比较差异有统计学意义(P<0.05). 结论 成功构建重组腺病毒Ad-DKK1,经其感染的恶性黑色素瘤细胞中DKK1的表达明显增强,β-catenin的表达显著降低,A375的细胞活力受到抑制. 相似文献
32.
聚丙烯酰胺水凝胶(polyacrylamide hydrogel,PAHG)注射隆乳术后,常因PAHG游离、移位而形成硬块,与正常组织界限不清,如合并有乳腺恶性肿瘤,极难明确诊断.普通X线片、B超、CT、钼靶片等检查方法因分辨率低,特异性差,临床应用价值不高[1]. 相似文献
33.
34.
目的:显微分离技术分别与流式细胞仪分选和免疫磁珠分选两种方法联合使用,比较不同方法的优缺点,以进一步探"索毛囊干细胞的体外分选培养的条件.方法:显微分离鼠毛囊隆突部,消化成单细胞悬液.分别利用流式细胞仪和免疫磁珠分选毛囊干细胞.观察细胞形态并检测分选前后细胞的纯度,活性,回收率,进行免疫荧光鉴定.结果:两种方法均能分选出实验所需的毛囊干细胞.流式细胞仪分选细胞纯度高,活性稍弱;免疫磁珠法分选细胞纯度稍低但活性强.结论:流式细胞仪分选和免疫磁珠分选均能有效获取毛囊干细胞.显微分离技术可根据实验需求选择不同的分选方法搭配. 相似文献
35.
36.
目的 研究P16/MISI蛋白及增殖细胞核抗原(PCNA)在食管癌组织巾表达的相互关系及临床病理意义.方法 应用免疫组化S-P法检测了 91例食管浸润性鳞状细胞癌中P16蛋白及PCNA的表达.结果 P16蛋白在食管癌组织中的表达率为53.85%(49/91),其表达与肿瘤高分化成正比,与淋巴结有转移成反比;PCNA过表达率为59.34%(54/91),其过表达与肿瘤分化差、淋巴结转移呈正相关,而与P16蛋白表达呈负相关.结论 P16蛋白表达提示食管癌高分化,而PCNA过表达是分化差及易转移的重要指标,P16蛋白的失表达与PCNA过表达在食管癌发生及转移过程中可能有协同作用. 相似文献
37.
38.
糖尿病是危害人体健康的重要疾病之一,发病率逐年增多,据国际糖尿病研究所2003年报告,全世界现有糖尿病约1.94亿,到2025年将突破3.33亿。发展中国家增长的速度超过了发达国家。21世纪糖尿病将在中国、印度等发展中国家流行。糖尿病的主要并发症已经成为病人致残和早亡的主要原因,已经成为世界各国的主要卫生保健问题。因糖尿病病因至今尚未完全阐明,缺乏根治措施,难以治愈,需进行长期治疗,由于疾病痛苦及精神压力,会产生很多心理问题,因此,了解患者心理状态并实施相应的心理疏导,是防治糖尿病的一种重要手段。 相似文献
39.
肝硬化门脉高压通常伴有脾肿大,脾脏功能亢进。传统的方法是外科手术切除脾脏,将使免疫功能减弱、过滤功能丧失、爆发感染的机会增加。部分脾栓塞(partial splenic embolization,PSE)既能消除脾亢,又能保留脾脏免疫功能,具有创伤小、恢复快、费用少的优点,特别适用于不能耐受外科手术者。2002年1月-2006年5月,我院对23例患者行PSE治疗,护理体会报告如下。 相似文献
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