山羊干扰素-γ的克隆、原核表达及其抗血清的制备

应用RT-PCR方法从免疫过山羊外周血淋巴细胞中克隆了山羊干扰素-γ（IFN-γ）基因，经序列测定，其开放阅读框架共有501bp，推测其分子质量（MW）为19.327KD。该基因与GenBank发表的山羊干扰素-γ基因序列（U34232）比较，核苷酸序列同源性为99.4%。经SignalP3.0分析表明，前23个氨基酸为信号肽序列。将信号肽序列去除并克隆到原核表达载体pET30a（＋）上，转化大肠杆菌BL21（DE3），经IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳，结果表明该基因在大肠杆菌中以包涵体形式融合表达。用ProBondTM蛋白纯化试剂盒纯化并免疫新西兰兔，制备了兔抗山羊IFN-γ多克隆血清。经WesternBlot鉴定，多克隆抗血清可与纯化的山羊IFN-γ蛋白发生特异性反应，说明该重组蛋白具有抗原活性，为我们进一步研究其在疾病诊断和免疫评价方面的应用奠定了基础。     

SPF大白猪和长白猪群体生理生化特性分析

综述了甲状腺功能亢进症、甲状腺功能减退症、自身免疫性甲状腺炎和甲状腺癌等甲状腺疾病啮齿类动物模型的建立方法,并对分化型甲状腺癌术后促甲状腺激素(TSH)抑制治疗大鼠模型的建立提出设想.     

禽类实验动物在感染实验中安乐死的伦理问题

实验动物病原学感染实验在兽医科学和生物制品研究等方面发挥越来越大的作用。我们对从2009年至今正式发表在NCBI上的以禽类实验动物进行感染试验的科研报告进行了文献调查，重点关注涉及的动物福利，特别是关于安乐死的问题。通过对247项研究调查，虽然几乎所有报告都声称经过了动物实验和福利委员会的审核，但采用的安乐死方法并不相同。CO2吸入和注射麻醉剂是最常用的方法，但缺乏剂量上的标准。此外，对于临终终点或人道终点的判断标准也表现出很大的主观性。     

育龄女性子宫弓状动脉多普勒频谱正常波形及参考值研究

目的:通过对正常育龄女性子宫弓状动脉经腹脉冲多普勒频谱(PW)检测,建立PW正常波形及参考值范围.方法:育龄女性260例,对能清楚显示弓状动脉的252例患者,共504支进行观察.根据舒张期有、无血流显像将PW波型分为双峰形和单峰形.并测量收缩期最大流速(Vs)、舒张期最低流速(Vd),计算阻力指数(RI)和脉动指数(PI).结果:(1)子宫弓状动脉95.2％(480/504 )舒张期有血流,PW波呈双峰形,4.8％( 24/504)舒张期无血流显像,PW呈单峰形.(2)子宫弓状动脉PW参考值范围:Vs 3.5～44.0 cm/s,Vd 0.0～11.8 cm/s,PI 0.7～2.2,RI 0.6～1.0.结论:波形分析及RI可靠、应用方便,可作临床诊断及治疗的重要参考指标.     

紫萍与青萍中黄酮类成分的测定及多变量统计分析

目的：建立紫萍与青萍中黄酮类成分测定的方法,对其含量测定结果进行多变量统计分析。方法：采用高效液相色谱四级杆飞行时间串联质谱（HPLC-QTOF-MS）法,色谱柱：Agilent ZORBAX Extend-C18 RRHT（2.1 mm × 50 mm,1.8 μm）;以甲醇为流动相A,以0.1%甲酸溶液为流动相B,梯度洗脱;流速为0.3 mL·min-1;柱温为30 ℃;进样量为1 μL;测定52批浮萍样品中荭草苷、异荭草苷、牡荆苷、木犀草苷、木犀草素、芹菜素6种黄酮类成分含量,并采用主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）进行多变量统计分析。结果：6种黄酮类化合物的精密度、重复性和稳定性良好（RSD≤4.0%）,平均加样回收率在95.41%~105.82%,RSD为2.03%~4.16%（n=6）。HPLC-QTOF-MS法结合主成分聚类分析宜用于比较不同品种浮萍中黄酮类成分含量差异。结论：采用PCA与OPLS-DA进行多维变量统计分析与测定结果相符,HPLC-QTOF-MS结合化学计量学方法能够评价不同浮萍中的6种黄酮类化合物。     

阿魏酸分子印迹复合膜的制备及性能

以聚偏氟乙烯微孔滤膜为支撑膜、阿魏酸为模板分子、α-甲基丙烯酸为功能单体、乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,采用紫外光引发原位聚合法制备阿魏酸分子印迹复合膜,并将其用于阿魏酸的分离提取。使用扫描电镜和红外光谱分析对印迹复合膜的形态和结构进行了表征;通过X射线衍射分析和拉伸测试等技术研究了印迹复合膜的晶体结构和力学性能;采用静态吸附法和平板超滤膜分离器考察了印迹复合膜的结合性能与渗透选择性能。结果表明：印迹复合膜对阿魏酸的结合容量高于对结构类似的肉桂酸,当吸附浓度为0.1 mmol/L时结合选择因子达到1.9。在渗透40 min时,印迹复合膜对阿魏酸渗透量为5.16 μmol/cm2,与肉桂酸相比,渗透选择性因子为1.74,渗透性能优于非印迹复合膜。     

BWEL-SPF种鸡在隔离器中的培育和管理

SPF种鸡群培育和管理对建立SPF种鸡群至关重要，但在培育过程中也要保持来源鸡群各项性能指标的相对稳定。在做好鸡群疫病净化和生物学敏感试验的同时，对培育鸡群定期进行遗传性能和生产性能(体增重、蛋增重、产蛋率、受精率、蛋料比、性比等)的跟踪测定，并与来源鸡群进行对比，发现没有明显的差异或差异不显。     

一测多评法测定小活络丸中9种乌头类生物碱的含量

摘 要 目的：建立一测多评法同时测定小活络丸中9种乌头类生物碱含量。方法: 采用高效液相色谱四级杆飞行时间串联质谱（HPLC QTOF MS）法,采用Agilent ZORBAX Extend C18 RRHT（2.1 mm×50 mm,1.8 μm）色谱柱;流速为0.21 ml·min-1;柱温为30 ℃;以甲醇为流动相A,以水（含0.1%甲酸和2.5 mmol·L^-1醋酸铵溶液）为流动相B,梯度洗脱。以乌头碱为内参物,测定次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、乌头原碱、次乌头原碱、新乌头原碱对于其的相对校正因子,并对相对校正因子进行重现性考察。利用相对校正因子计算其他8种生物碱成分的含量,同时利用外标法测定这9种成分,比较两种测定方法的差异,验证一测多评法的准确性和可行性。结果: 在线性范围内,次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头碱、苯甲酰新乌头原碱、乌头原碱、次乌头原碱、新乌头原碱对乌头碱的相对校正因于分别为1.736、1.979、1.0471、0.9242、1.2901、1.3078、1.2859、1.0948,建立了QAMS法测定小活络丸中9种生物碱的含量,其测定值与计算值无显著差异。结论: 本文方法可用于小活络丸中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、乌头原碱、次乌头原碱、新乌头原碱的含量测定。     

LC-MS/MS法测定木香槟榔丸中7个有效成分的含量

目的:运用液质联用法测定木香槟榔丸中去氢木香内酯、α-香附酮、氢溴酸槟榔碱、盐酸小檗碱、橙皮苷、大黄素、大黄酚等7个成分的含量.方法:采用液相色谱串联三重四级杆质谱法进行测定,色谱柱为Agilent Poroshell 120 SB C18(2.1 mm× 100 mm,2.7 μm),以0.1％甲酸水溶液-乙腈流动相,梯度洗脱,流速为0.3 mL· min-1;离子源为电喷雾离子源(ESI),正负离子模式,采用多反应监测模式(MRM)进行测定.结果:上述7个成分在相应的浓度范围内呈现良好的线性关系;加样回收率为97.94％～101.46％,RSD为1.47％～3.33％ (n=6).结论:该检测方法准确、可靠,可同时测定木香槟榔丸中7个有效成分,为该制剂的质量控制提供了依据.