实验用SPF大白猪和长白猪SLA II类基因多态性研究

目的 研究实验用SPF大白猪和长白猪SLA Ⅱ类基因的多态性。方法 分别采集15头SPF大白猪和22头长白猪抗凝血，分离外周血淋巴细胞，提取总RNA，反转录后RT-PCR扩增DQB1、DRB1和DQA基因并进行测序，分析获得的SLA Ⅱ类等位基因序列多态性。结果 3个基因共获得25个等位基因，包括8个DQB1，10个DRB1和7个DQA，全部获得ISAG SLA命名委员会的官方命名，其中3个等位基因首次提交完整序列，命名为DQB1*02：12（KU754590）、DQB1*02：03（KU754591）和DRB1*06：07（KU754601），3个DQA等位基因为新发现等位基因。SPF大白猪和长白猪DQB1等位基因与外源性抗原结合的15个氨基酸中，共有5个氨基酸具有高度保守性；DRB1等位基因的16个外源性抗原识别位点中，仅1个位点高度保守；DQA等位基因19个抗原结合位点中，有11个高度保守。SLA Ⅱ类基因氨基酸序列分子进化树表明，3个基因分别聚为两大类，与国外Yucatan小型猪具有较近的亲缘关系，而与其他猪种未表现明显遗传距离相隔。结论 成功鉴定了大白猪和长白猪的25个SLA Ⅱ类等位基因，发现其具有较为丰富的多态性，所获得SLA Ⅱ类等位基因在其他品种猪也广泛分布，具有多样性，这一研究结果对大白猪和长白猪发展为经典实验动物模型具有重要作用。     

论行为治疗在儿童心理治疗中的利弊

行为治疗是依据条件反射学说和社会学习理论而发展起来的改善个体不良行为的一种心理治疗方法，它强调可观察到的行为改变。本文简要介绍了行为治疗的涵义及基本假设，之后在分析儿童心理治疗特点的基础上，详细阐述行为治疗在儿童心理治疗中的利与弊。总而言之，行为治疗仍是治疗儿童心理和行为问题的一项重要而有效方法，要扬其长避其短，充分发挥其作用。     

I型鸭肝炎病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立及初步应用

目的 建立快速诊断I型鸭肝炎病毒的荧光定量RT-PCR方法。方法 根据NCBI下载的20个来自我国不同省份的的I型鸭肝炎病毒的基因序列,找出其保守序列,设计合成一对引物和一条TaqMan探针,进行条件优化,检测其特异性,敏感性,稳定性。结果 该方法敏感性达20拷贝,比常规PCR敏感性高。其特异性强,对番鸭细小病毒(MDPV),鹅细小病毒(GPV),新城疫病毒(NDV)和禽流感(AIV),鸭减蛋综合征病毒(EDSV),禽网状内皮组织增生症病毒(REV),鸭坦布苏病毒(DTMUV),禽呼肠弧病毒(ARV)8种病毒的检测均为阴性,I型鸭肝炎病毒检测结果为阳性。用建立的方法检测了江苏徐州采集100份样品,阳性率为92%。说明I型鸭肝炎病毒在江苏徐州地区的鸭群中普遍存在。结论 建立了I型鸭肝炎病毒荧光定量PCR方法。     

山羊IL-2基因的克隆、表达及其多克隆抗血清的制备

应用RT-PCR方法从山羊外周血淋巴细胞中克隆了山羊白细胞介素-2（interleukin-2，IL-2）基因并测序，将编码山羊白细胞介素-2（Interleukin-2，IL-2）成熟蛋白的基因亚克隆至原核表达载体pET30a（＋）上，构建重组质粒并进行确证性测定。然后将重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）并用IPTG于37℃诱导培养。表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在。SDS-PAGE分析显示，表达的山羊IL-2融合蛋白分子量约为18kD。包涵体被6mol/L盐酸胍裂解后，通过ProBondTM蛋白纯化试剂盒纯化。用所获得的重组山羊IL-2纯化产物经3次肌内注射新西兰白兔，制备了兔抗山羊IL-2多克隆血清，并用Western blot进行了证明。本次试验成功地表达、纯化了山羊IL-2融合蛋白，并制备了抗山羊IL-2多克隆抗血清，为下一阶段关于山羊IL-2重组蛋白生物学特性及其应用的研究打下了坚实的基础。     

黄体酮胶丸治疗42例早期先兆流产临床疗效观察

选取我院2008年4月~2011年10月75例先兆流产患者,随机分为研究组42例和对照组31例,分别应用黄体酮胶丸和黄体酮注射液保胎治疗,比较两组孕妇用药时间、治疗效果及停药1w后血清β-hCG水平。结果观察组平均用药时间24.7±8.4d,显著高于对照组(P0.01);两组治疗效果无显著性差异(P0.05);观察组停药1个月后血清β-hCG水平38407.5±2682.6IU/L,显著高于对照组(P0.01)。黄体酮胶丸对早期先兆流产患者具有效果显著、作用持久、患者依从性高等优势,值得临床推广应用。     

初中生独生子女攻击行为与家庭环境的相关研究

目的 了解初中生独生子女攻击行为与家庭环境的相关性,为初中生独生子女攻击行为的干预提供依据.方法 采用整群随机抽样方法,从新乡市某中学初一至初三年级抽取500名学生作为被试.采用青少年攻击性问卷（AAQ）和家庭环境量表（FES）进行施测,回收有效问卷467份,有效问卷回收率为93.4％.结果 独生子女在家庭环境量表中亲密度、知识性、独立性、娱乐性等维度上的得分均高于非独生子女,差异有统计学意义（=2.17～3.81,P均＜0.05）.亲密性、情感表达、知识性、娱乐性、道德宗教观、组织性均与独生子女攻击总分呈负相关（r=-0.47～-0.27,P均＜0.05）,矛盾性与独生子女攻击总分呈正相关（r=0.50,P＜ 0.01）.家庭环境量表中的矛盾性、成功性二因子对初中生独生子女的攻击性行为具有正向预测作用（P均＜ 0.05）;组织性对初中生独生子女的攻击行为具有负向预测作用（P＜0.01）.结论 家庭亲密度、情感表达、知识性、娱乐性、道德宗教观、组织性能降低独生子女初中生的攻击行为,矛盾性可能增加其攻击行为.     

棕背性别的快速鉴定

目的野生棕背因其活动敏捷、性情凶猛、不易抓取,很难从外表对其性别做出准确判断,影响分笼及后期的实验室繁育,拟建立一种快速、准确、简便的性别鉴定方法。方法以棕背的新鲜被毛为材料,Chelex-100提取毛囊DNA,利用PCR技术分别扩增锌指结构基因(ZFY/ZFX)片段和Y染色体性别决定区基因(SRY)片段,并建立双重PCR扩增方法。结果雄性棕背扩增出ZFY/ZFX和SRY两个基因片段,而雌性棕背只扩增出ZFY/ZFX基因片段。利用这种方法对23只棕背、10只Wistar大鼠和8只BALB/c小鼠进行性别鉴定,扩增结果与表型判断和解剖结果一致。结论以被毛为实验材料,减少了对棕背的惊吓和损伤;建立的双重PCR扩增方法准确、快速,可应用于鼠的性别鉴定。     

实验动物新型垫料的研究Ⅰ．蒲草的生物学特性及吸水、吸氨、保暖性能测定

蒲草表面光洁，质地柔软。通气组织蓬松，呈海绵状，约占据整个横切面的４／５．１ｇ蒲草２４Ｌ吸水４．０８±０．０８ｇ，高于刨花（吸水量２．９５±０．６４ｇ，Ｐ＜０．０５）和玉米棒芯（吸水量２．７６±０．２１ｇ，Ｐ＜０．０１）。贮放一年后蒲草吸水（吸水量４．３５±０．２５，Ｐ＞０．０５）性能不受影响。小鼠饲养实验结果，换笼后第４天及第７天蒲草垫料笼内氨浓度分别为７．３８±０．７２，１４．１０±０．６７ｍｇ／ｍ３，略低于刨花组（氨浓度分别为７．６５±２．２６，１４．４５±０．９３ｍｇ／ｍ３，Ｐ＞０．０５），显著低于玉米棒芯组（氨浓度分别为１０．０８±０．６８，１８．９９±１．４１ｍｇ／ｍ３，Ｐ＜０．０１）。在室温１４．４±２．１℃下，小鼠离巢５，１０，１５ｍｉｎ后巢内余温分别为１７．８±０．７，１６．７±１．３，１５．３±２．６℃，均略高于刨花组和玉米棒芯组。     

兔轮状病毒的分离与鉴定

目的 从疑似病料中分离免轮状病毒。方法 从形态学、血清学、分子生物学等几个方面对其进行鉴定。结果 从几个方面鉴定的结果显示，疑似病料中含有兔轮状病毒(LaRV)病毒粒子。结论 本次实验成功地分离得到了LaRV病毒。     

自由联想式写作

目的：探讨自由联想技术的新进展。方法：查阅国内外相关文献,进行分析总结。结果：自由联想式写作是自由联想技术在实践中发展出的一种新方法。结论：自由联想式写作是一种有效的方法,具有治疗的作用。