结核分枝杆菌复苏因子基因克隆及其蛋白质的表达

结核病仍然是严重危害人类健康的重大公共卫生问题。如何提高临床标本结核杆菌培养阳性率、缩短培养时间是提高结核病诊疗和控制水平的关键。     

扩张型心肌病患者血浆氨基端脑钠素原的变化及其影响因素

目的:探讨扩张型心肌病(DCM)患者血浆氨基端脑钠素原(NT-proBNP)的变化及其影响因素.方法:用酶联免疫吸附方法,测定203例DCM组患者的血浆NT-proBNP浓度,并与203例对照组相比较.DCM组内再按下列不同的观察指标对NT-proBNP进行分析比较:按NYHA心功能分级进行Ⅱ级,Ⅲ级,Ⅳ级间比较;按体重指数进行超重者和不超重者间比较;按血清肌酐浓度进行肾功能异常者和肾功能正常者间比较;按是否合并心房颤动进行心房颤动者和无心房颤动者间比较.并用多元逐步回归分析,分析DCM患者中血浆NT-proBNP的影响因素.结果:与对照组比较,DCM组血浆NT-proBNP浓度显著升高(P＜0.01).DCM组血浆NT-proBNP浓度在各级NYHA心功能的DCM患者均显著高于对照组(P均＜0.01),且在不同NYHA心功能分级间亦逐级显著升高(P均＜0.01);在肾功能异常者血浆NT-proBNP浓度显著高于肾功能正常者(P＜0.01);超重者血浆NT-proBNP浓度显著低于不超重者(P＜0.01).多元逐步回归分析结果显示:只有NYHA心功能分级、体重指数、血清肌酐浓度、左心室射血分数、心率和左心房内径依次入选为血浆NT-proBNP浓度的独立预测因素(P＜0.05或0.01),其中NYHA心功能分级最强(P＜0.01).结论:DCM患者血浆NT-proBNP浓度显著升高,除取决于患者心功能外,还受体重指数、血清肌酐浓度等因素影响.     

老年甲状旁腺功能亢进症的诊断和治疗

原发性甲状旁腺功能亢进症（primary hyperparathyroidism，pHPT）在美国和西欧国家是一种常见的内分泌疾病，而东方国家发病率低。pHPT是高血钙最常见的原因，绝大多数为良性疾病，其中85％由单发腺瘤引发，12％左右为多腺体病变。甲状旁腺癌罕见，国外报道占pHPT的1％～3％，国内约占5％～7％，近年来报道比例不断上升。     

循环microRNA与心血管疾病临床诊断

心血管疾病作为人类健康的头号"杀手",其发病率与病死率在世界范围内均居高不下.及时准确地诊断该类疾病能够为医疗干预方案的选择提供指导,进而最大程度减少对患者造成的危害.     

结核分枝杆菌休眠菌复苏初期与活跃期的差异表达基因分析

目的 寻找休眠结核分枝杆菌复苏的关键基因，探讨结核分枝杆菌复苏的机制。方法 取7H9培养20天的H37Rv作为对数生长期的活跃结核分枝杆菌，并提取RNA。取一部份对数生长期的H37Rv加入亚甲兰作为无氧标志，37℃密封培养，无氧状态下生长的H37Rv会随着培养基中的氧气耗尽而进入休眠状态，继续无氧培养1个月的陈旧菌即为休眠菌，取休眠菌，加入适量5个复苏因子蛋白质组合，37℃有氧培养三天，提取RNA。用mRNA纯化试剂盒纯化RNA。利用抑制性消减杂交（SSH）技术分析复苏因子蛋白刺激三天的休眠结核分枝杆菌和对数生长期结核分枝杆菌的基因组mRNA的表达差异。并通过基因克隆技术、基因测序和序列分析，寻找差异表达基因。结果我们通过SSH杂交，以活跃结核分枝杆菌cDNA为Tester的正相杂交和以复苏因子蛋白刺激三天的休眠结核分枝杆菌cDNA为Tester的反相杂交的各自Tester高表达或特异性表达的片段都得到了选择性扩增，杂交产物经连接pTA2载体、转化DH5α、蓝白斑筛选，正相获得78个阳性菌落，反相获得46个阳隆菌落。阳性单个菌落经液体LB培养基培养，以菌液为模板，T7、M13为引物，扩增插入片段，能扩增到明显的带，且带大于350pb的为阳性。则正相得到66个阳性扩增带，反相得到39个阳性扩增带。这105个阳性扩增带的菌液经测序分析，将序列完全相同的特异性序列筛选合并，正相获得41个不同的特异性序列，反相获得32个不同的特异性序列。再去掉因消减杂交不完全而使正、反相中都获得的相同序列，则正相有30个特异性序列，反相有21个特异性序列。51个序列通过Genbank检索，因有不同序列检索得到对应同一基因的情况，因此，正相30个特异性序列经检索后对应22个不同的基因，反相21个特异性序列经检索后对应9个不同的基因。在我们的实验中有2个基因是正、反相共有的（ribosomal RNA 23S rrl和Rv3661）。最后正相获得了20个活跃结核分枝杆菌特异性表达或高表达的功能基因，反相获得了7个休眠结核分枝杆菌特异性表达或高表达的功能基因，根据其功能不同分为8大类。结论利用SSH杂交技术可以筛选到复苏因子蛋白刺激三天的休眠结核分枝杆菌和活跃结核分枝杆菌的差异表达基因。为寻找休眠结核分枝杆菌复苏的关键基因奠定了基础。     

原发性高血压伴阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者左心室肥厚及其功能改变的危险因素

目的探讨原发性高血压伴阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者左心室肥厚(LVH)及其功能改变的危险因素。方法选取2011年1月至2014年1月就诊于新疆医科大学第一附属医院的高血压患者499例,男性321例,女性178例,根据睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)分为4组:AHI5次/h为单纯高血压组(EH组,n=24)、5~15次/h为高血压伴轻度OSAHS组(轻度组,n=208)、15~30次/h为高血压伴中度OSAHS组(中度组,n=156)、AHI30次/h为高血压伴重度OSAHS组(重度组,n=111)。采用心脏超声心动图测定左心室相关参数与收缩、舒张功能,并对比各组左心室相关参数,对研究资料进行单因素方差分析和多因素Logistic回归分析影响左心室结构及其收缩、舒张功能的因素。结果中、重度OSAHS组左心室舒张末内径(LVEDD)、室间隔厚度(IVST)、左心室后壁厚度(LVPWT)、左心室质量指数(LVMI)高于轻度OSAHS组及单纯高血压组;二尖瓣血流频谱舒张早期最大血流速度/舒张晚期最大血流速度(E/A)低于轻度OSAHS组及单纯高血压组(1.01±0.32、0.95±0.28比1.15±0.33、1.28±0.21;P0.05);重度OSAHS组左心室射血分数(LVEF)低于轻度OSAHS组[(63.84±3.71)%比(65.40±3.27)%,P0.05]。多因素Logistic回归分析结果显示,性别(OR=0.240)、血压未达标(OR=2.256)、AHI(OR=2.115)为LVMI的影响因素;AHI(OR=2.212)为LVEF的影响因素;年龄(OR=2.723)、血压未达标(OR=1.627)、AHI(OR=1.786)为E/A的影响因素。结论女性、血压、AHI为LVH的危险因素;AHI为左心室收缩功能的危险因素;年龄、血压、AHI为左心室舒张功能的危险因素。     

肠道微生态与肠道疾病

人类肠道微生态是一个包含大量肠道微生物的复杂生态系统,近年来研究发现肠道细菌过度繁殖可导致胃肠道动力失调及内脏神经敏感性改变,最终导致肠易激综合征的发生,而肠道菌群引起的肠粘膜异常免疫应答损伤被认为是炎症性肠病发病机制的关键所在,另外,肠道微生态还可过参与炎症性肠病的病理生理过程或直接代谢产生致癌物质影响肠道肿瘤的发生发展。由此我们发现,肠道微生态不仅参与了消化吸收、物质代谢等胃肠道基本生理过程,还直接关系到肠道疾病的发生。本文将就目前肠道微生态与肠道疾病的研究进展进行简单综述。     

负性协同刺激分子B7-H4在小鼠树突状细胞上的表达及其生物学意义

目的 探讨B7-H4分子在小鼠树突状细胞分化发育过程中的表达及其在T细胞活化中的作用.方法 采用GM-CSF和IL-4联合方案体外诱导小鼠髓系树突状细胞(DCs);采用流式细胞术检测未成熟DCs、成熟DCs以及IL-10诱导的DCs表面B7-H4分子的表达;采用3H-TdR掺入试验和抗B7-H4单抗(McAb)阻断试验分析DCs表达的B7-H4分子对T淋巴细胞的共刺激效应.结果 经GM-CSF和IL-4联合方案体外诱导的未成熟DCs较高水平表达B7-H4,在IL-10作用下B7-H4表达进一步上调,经TNF-α刺激成熟后,B7-H4的表达显著下调,不同功能状态下DCs表面B7-H4分子均可抑制T细胞的增殖,但以未成熟DCs、IL-10诱导的DCs表面B7-H4分子的抑制作用更为显著.结论 不同功能状态下的DCs均有B7-H4分子的表达,处于抑制状态下的DCs通过高表达B7-H4介导免疫不应答效应.     

BMP-2在减阻牵张快速牙移动不同加力方式下的表达及对牙移动的影响

目的：观察不同牵张力下减阻牵张快速牙移动中 BMP-2的表达。方法：Beagle 犬12只,随机均分为加力5、15 d、加力15 d 保持固定10、90 d 4组。以44为移动牙,每个组3只犬的6颗移动牙随机采用减阻-牵张方法、减阻-常规方法和常规方法各2颗。各组犬按预定时间处死并获取移动牙牙周组织块,免疫组化法染色并观察 BMP-2表达。结果：各加力方式下 BMP-2阳性表达分布区域相似,均在加力结束时达峰值,其中减阻牵张组峰值最大（P ＜0．05）;牙移动距离最大（P ＜0．01）。加力各时间点,减阻常规组 BMP-2阳性表达均强于常规方法组但不及减阻牵张组显著;保持固定90 d,3组无差异（P ＞0．05）。结论：减阻措施配合持续强牵张力可显著提高移动牙牵张新骨区 BMP-2阳性表达,加速牙周组织新骨形成。     

稳定性牙合板治疗颞下颌关节紊乱病患者后髁突骨密度变化的CBCT研究

目的 利用CBCT测量颞下颌关节紊乱病(TMD)患者稳定性牙合板治疗前后髁突骨密度变化,分析稳定性牙合板对髁突改建的影响.方法 纳入40例稳定性牙合板治疗的TMD患者,治疗前后拍摄CBCT.运用MIMICS 21.0软件中Density功能测量髁突皮质骨密度,对髁突前斜面、顶部、后斜面骨密度进行统计学分析.结果 治疗前...