中国不同地理居群半夏遗传多样性分析

半夏Pinellia ternate (Thunb) Breit为天南星科半夏属植物，以块茎入药［1］。我国大部分地区均有分布。但是随着半夏野生资源逐渐减少，民间多以同属其他植物作为代替品入药，加之引种途径各异，长期无性繁殖，导致品种退化。许多地区品种背景资料，种系不清，缺乏统一的分类标准，使得古方中所用道地药材在形态和质量方面出现变化，给半夏的临床用药安全带来很大的隐患。因此，就需要一种可靠的分类鉴定手段。本实验应用AFLP(amplified fragment length polymorphism)分子标记技术，对采自我国30个不同地理居群的半夏遗传多样性进行了分析。     

半夏多倍体复合体基因组DNA甲基化状态的MSAP分析

目的分析半夏多倍体复合体DNA甲基化状态的变化(甲基化水平和甲基化差异模式)。方法应用甲基化敏感扩增多态性(methylation sensitive amplified polymorphism,MSAP)技术,采用34对引物进行选择性扩增。结果扩增共得到7708条带,其中5636条带为甲基化多态性带在半夏7倍、8倍、9倍、10倍体值株间DNA甲基化水平变化不大。总扩增位点甲基化水平在54%～58%,全甲基化率为24.1%～24.3%,高倍性植株甲基化程序相应比较高。除甲基化水平稍有变化外,半夏不同倍性株间的DNA甲基化模式也形式各异,检测到的带型分为两大类(和型)。其中,不同倍性间DNA甲基化状态保持不变的位点占52.5%,归为型;少部分检测位点(占47.5%,归为型)的DNA甲基化模式在不同倍性间存在显著差异。结论半夏多倍体复合体各倍性植株间存在大量的胞嘧啶甲基化变异且整体甲基化水平较高。     

神经干单细胞获得的一种方法

目的寻找一种有效获得神经干细胞单细胞的方法。方法运用胰蛋白酶，EDTA和不同浓度酵素对人胚神经干细胞球进行消化，免疫细胞化学染色鉴定及其分化。结果运用一定浓度的酵素可以获得大量成活的单个神经干细胞。而运用胰蛋白酶，EDTA消化后成活细胞少。结论运用一定浓度的diapase消化神经干细胞球是可获得大量成活的神经干细胞单个细胞的方法。     

专病笔谈——面瘫(7)

顽固性面瘫的治疗陈成[1]杨华珍[1]姜卉[1]1局部(患侧面部)治疗如果患者自觉面部板紧、医生进针阻力较大,可采用:①透刺配合艾灸,阳白透鱼腰、太阳透下关、地仓透颊车、地仓透水沟等,并点燃艾条在面部施以温和灸。②隔姜灸:切姜片直径为2cm,厚约3mm,取牵正、下关、地仓、阳白等     

维奥欣对实验性动脉粥样硬化大鼠C反应蛋白的影响

目的：观察维奥欣对实验性动脉粥样硬化（AS）大鼠C反应蛋白（CRP）的影响，探讨其在AS中是否存在抗炎作用。方法：60只雄性SD大鼠随机分为5组：假手术组、模型组、阿斯匹林组、维奥欣小剂量组、维奥欣大剂量组，每组12只，各组予以相应药物治疗。3个月后，处死动物，留取标本，测定血脂，并进行颈总动脉血管病理学观察及CRP多克隆抗体免疫组化分析。结果：与模型组比较，维奥欣大剂量组血清TG、TC、LDL—C水平显著下降（P〈0．05），且明显低于阿斯匹林组（P〈0．05）。维奥欣小剂量组与模型组比较无明显差异（P〉0．05）。与假手术组相比，模型组损伤侧颈动脉内膜明显增厚，局部有斑块形成，W/L明显增大（P〈0．01）。维奥欣大、小剂量组W／L明显小于模型组（P〈0．01，P〈0．05），维奥欣大剂量组低于阿斯匹林组（P〈0．05），维奥欣小剂量组与阿斯匹林组间无显著性差异（P〉0．05）。免疫组化染色结果显示，与模型组比较，维奥欣大、小剂量组CRP表达水平显著下降（R0．01，P〈0．05），维奥欣大剂量组明显低于阿斯匹林组（P〈0．05），而维奥欣小剂量组与阿斯匹林组间比较无显著性差异（P〉0．05）。结论：维奥欣可通过降脂、抗炎等作用减缓实验性动脉粥样硬化大鼠内膜增生，延缓动脉粥样硬化进程。     

新生大鼠海马的显微手术入路

目的研究最大程度暴露新生大鼠海马的手术入路。方法采用经颞外侧、大脑纵裂、小脑幕上缘大脑纵裂联合3种入路暴露新生大鼠海马。结果分析3种入路优缺点,经小脑幕上缘大脑纵裂联合入路的方法简便、容易掌握,且最大程度上暴露了海马的全部结构。结论新生大鼠海马最大程度显微暴露为神经干细胞研究提供必备平台。     

实验组织切片荧光染色后再行苏木素-伊红染色的方法及体会

目的:初步探索荧光染色后的组织切片再行苏木素-伊红(HE)染色的技术方法和操作程序. 方法:分别用5 μm石蜡、冰冻两种组织切片按常规间接免疫荧光加荧光化学方法进行荧光染色,然后用pH 4.7～5.0 50%的乙醇洗脱封片的缓冲甘油,再进行常规HE染色.分别用荧光显微镜与光学显微镜观察、拍照,进行HE染色效果比较.结果:荧光染色后的组织切片标本再行HE染色,其染色效果和组织细胞结构的清晰度与组织切片单独进行HE染色相比无明显差异.结论:本实验操作方法简单;结果可靠;增加了单张切片的信息含量;节约实验成本;更为组织细胞形态学检测方法的相互转化与衔接提供了技术和思维平台.     

半夏多倍体复合体基因组DNA甲基化状态的MSAP分析

目的分析半夏多倍体复合体DNA甲基化状态的变化(甲基化水平和甲基化差异模式)。方法应用甲基化敏感扩增多态性(methylation sensitive amplified polymorphism,MSAP)技术,采用34对引物进行选择性扩增。结果扩增共得到7708条带,其中5636条带为甲基化多态性带在半夏7倍、8倍、9倍、10倍体值株间DNA甲基化水平变化不大。总扩增位点甲基化水平在54%～58%,全甲基化率为24.1%～24.3%,高倍性植株甲基化程序相应比较高。除甲基化水平稍有变化外,半夏不同倍性株间的DNA甲基化模式也形式各异,检测到的带型分为两大类(和型)。其中,不同倍性间DNA甲基化状态保持不变的位点占52.5%,归为型;少部分检测位点(占47.5%,归为型)的DNA甲基化模式在不同倍性间存在显著差异。结论半夏多倍体复合体各倍性植株间存在大量的胞嘧啶甲基化变异且整体甲基化水平较高。     

10-YEAR SURVIVAL RATE FOR PATIENT WITH NASOPHARYNGEAL CARCINOMA AFTER RADIATION THERAPY CLINICAL ANALYSIS OF 367 CASES

Of 1 344 patients with nasopharyngeal carcinoma treated during 1961-1965 at the Shanghai Cancer Hospital, 367 who sarvived over 10 years after radia- tion therapy, were analysed. The iesults showed that the patients with stage I , n nasopharyngeal carcinoma and those with stage Ⅲ, IV,the 10-year survival rates were 41.5% and 22.8% respectively, the overall 10-year survival rate being 27.3%. The 10-year survival rate was higher for female patients than for males, and was not related to the age of the patients and the pathological type of this carcinoma. The optimal tumor dosage was thought to be 60-70 Gy 350(95.4%) out of the 367 patients received radiotherapy only once. The rest received repeated irradiation for recurrence. For the reirradiated patients, the 10-year survival rate was 13.5%. Most recurrences occurred 5 years after radin- therapy(12 / 17), and only 5 within 3 years.     

医用生物蛋白凝胶预防腰椎间盘突出症术后瘢痕粘连的临床应用

目的观察医用生物蛋白凝胶预防腰椎间盘突出症术后瘢痕粘连的临床效果。方法回顾性分析自2014-01—2016-02采用半椎扳切除或开窗减压椎间盘摘除术治疗的64例腰椎间盘突出症,观察组36例术中在硬膜囊及神经根周围加入生物蛋白凝胶,对照组28例未使用生物蛋白凝胶。结果 64例均获得随访,随访时间平均26(12~40)个月。观察组术后2例(5.6%)出现下腰痛,对照组5例(17.9%)出现下腰痛;观察组术后下腰痛发生率低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。末次随访时JOA评分:观察组优27例,良7例,可2例;对照组优15例,良5例,可3例,差5例;观察组末次随访时JOA评分优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论医用生物蛋白凝胶可作为腰椎间盘突出症半椎扳切除或开窗减压椎间盘摘除术中常规预防硬膜外瘢痕粘连的辅助材料。