重组碱性成纤维细胞生长因子基因转染对于骨髓源性成骨细胞的

背景：碱性成纤维细胞生长因子对来源于中胚层和神经外胚层的细胞具有明显的促进增殖作用,对骨髓间充质干细胞具有间接的成骨作用。 目的：观察碱性成纤维细胞生长因子基因转染对骨髓源性成骨细胞生物学特性和血管生成的影响,与骨髓间充质干细胞作对比。 设计、时间及地点：对比分析基因转染效果实验,于2007-11-27/2008-12-01在南方医科大学珠江医院中心实验室和动物实验中心完成。 材料：2月龄新西兰大白兔用于骨髓间充质干细胞的分离培养及成骨细胞诱导。5周龄Wistar大鼠用于移植实验。牛pcDNA3-bFGF真核表达质粒由中山大学中山医学院免疫教研室徐霖博士惠赠。 方法：分离兔骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞,采用脂质体介导将牛pcDNA3-bFGF真核表达质粒分别转染体外培养的兔骨髓间充质干细胞和诱导的骨髓源性成骨细胞,G418筛选。稳定转染碱性成纤维细胞生长因子的骨髓源性成骨细胞与磷酸钙胶原材料复合培养,植于Wistar大鼠后腿肌袋内,正常饲养2,4周后取出植入的复合材料,观察血管新生情况。 主要观察指标：碱性成纤维细胞生长因子转染前后骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞生物学特性参数的比较以及骨髓源性成骨细胞转染碱性成纤维细胞生长因子前后新生血管数目的比较。 结果：利用RT-PCR、免疫细胞化学染色分析转染细胞的碱性成纤维细胞生长因子表达情况。从形态、增殖特性和细胞周期、碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原等方面分析稳定表达碱性成纤维细胞生长因子的骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞生物学特性。重组牛pcDNA3-bFGF真核表达质粒成功转染目的细胞,经G418筛选稳定表达。转染的细胞有大量目的基因mRNA转录和目的蛋白表达。转染碱性成纤维细胞生长因子基因的骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞生长均加快,细胞周期中增殖期细胞比例明显增加,细胞形态无明显变化。转染与未转染的骨髓源性成骨细胞比较,碱性磷酸酶的分泌量无明显变化(P > 0.05),转染后骨髓间充质干细胞的碱性磷酸酶分泌量小于骨髓源性成骨细胞(P < 0.01)。骨髓源性成骨细胞转染与未转染碱性成纤维细胞生长因子基因组均有Ⅰ型胶原mRNA表达,但是,转染和未转染的骨髓间充质干细胞中均无Ⅰ型胶原基因mRNA转录。转染有外源性碱性成纤维细胞生长因子基因的复合材料部分被增生纤维结缔组织包绕,内有新生血管生成,随着时间的延长而增多。 结论：稳定表达碱性成纤维细胞生长因子的骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞增殖较快,但作为组织工程骨的种子细胞,骨髓源性成骨细胞较骨髓间充质干细胞更理想。外源碱性成纤维细胞生长因子基因转染后稳定表达,对新生血管的形成具有促进作用,可以作为组织工程化人工骨种子细胞转染的目的基因。     

珍珠养颜液对小鼠抗衰老及免疫调节的研究

目的：研究珍珠养颜液对小鼠抗衰老作用及免疫功能的影响。方法：分别以D-半乳糖制备衰老小鼠模型、环磷酰胺造成免疫低下小鼠模型,以血清SOD、肝脏及脑组织中MDA水平、小鼠的学习记忆能力、胸腺及脾脏系数和碳粒廓清指数作为观察指标评价珍珠养颜液的作用。结果：珍珠养颜液能显著提高衰老小鼠血清SOD水平、降低肝脏及脑组织的MDA水平、增加衰老小鼠的胸腺系数,同时可改善衰老小鼠的学习记忆能力。同时,其可使得免疫低下小鼠的胸腺及脾脏系数增高,并能增强小鼠碳粒廓清能力。结论：珍珠养颜液可能具有抗衰老的作用,并可改善实验动物的免疫功能。     

手法整复闭合穿钉内固定治疗胫骨平台骨折

目的：总结手法整复闭合穿钉内固定治疗胫骨平台骨折临床疗效。方法：92例胫骨平台骨折患者，均运用手法整复合闭合穿钉内固定治疗。结果：术后经1－2年随访，平均骨折愈合时间3－7月，优良率86．5％，结论：采用手法整复闭合穿钉内固定治疗胫骨平台骨折，具有操作简单，损伤小，功能恢复好等优点。     

手法整复治疗股骨干骨折并同侧髋关节后脱位26例临床分析

目的:探讨股骨干骨折并同侧髋关节后脱位的中医正骨治疗方法.方法:我们收集了我科1996年至2002年共26例股骨干骨折并同侧髋关节后脱位患者的临床资料.所有患者均采用中药和正骨手法治疗.结果:26例病人随访平均32月(15～60),优16例,良7例,差3例,优良率88.5%.全部病例骨折愈合良好,未出现髋关节再次脱位和继发神经血管损伤,出现股骨头缺血性坏死2例,髋部异位骨化2例.结论:对股骨干骨折并同侧髋关节后脱位的病例以中医正骨手法整复治疗,具有操作简单、损伤少、疗效好的优点,值得临床推广应用.     

退行性腰椎管狭窄症的中医药治疗近况及展望

腰椎管狭窄症是指腰椎管内神经根管、侧隐窝或椎间孔因骨性或纤维性增生、移位导致一个或多个平面管腔狭窄,压迫马尾、神经根或血管而产生临床症状的综合征。据病因可有先天性和继发性之分,前者多由于椎管各构件发育不良所致,后者则多因退变、外伤、脊柱畸形、炎症、肿瘤等导致。本病是慢性腰腿痛的常见原因之一,其发病率仅次于腰椎间盘突出症,占椎管内     

超时限腕掌部完全离断伤的再植与功能

我院自 1995年以来在断腕、断掌再植中有 19例超过 6～ 8ｈ后才建立血液循环 ,再植后伤手功能满意 ,报道如下。1　资料与方法1 1　一般资料　本组 19例 ,男 16例 ,女 3例 ;年龄 16～ 4 6岁 ,平均 2 8岁。病因 :为机器压伤 8例 ,电锯伤 7例 ,刀砍伤4例。损伤部位 :腕部离断 8例 ,掌部离断 11例。手术建立血液循环的时间 :伤后 6～ 10ｈ 7例 ,11～ 16ｈ 9例 ,16ｈ后 3例。1 2　手术方法1 2 1　彻底清创后 ,妥善处理骨与关节 ,腕部离断应争取行关节成形术 ,以交叉克氏针固定 ,两端关节面损伤严重将关节功能位融合 ,以钢板固定 ;掌部离断多以纵…     

中西医结合治疗脊髓损伤并发伪膜性肠炎的临床研究

目的:探讨治疗脊髓损伤并发伪膜性肠炎的有效方法.方法:将脊髓损伤并发伪膜性肠炎的患者64例随机分成2组,每组32例.A组(中西医结合治疗组)用参苓白术散合万古霉素口服治疗;B组(对照组)单纯使用万古霉素口服治疗.比较2组患者止泻时间、退热时间、失水纠正时间及疗程长短、停药后复发的例数.结果:治疗组用药后5项指标均较对照组明显缩短,无1例死亡,停药后仅2例复发,2组之间有显著性差异(P<0.05).结论:中西医结合治疗脊髓损伤并发伪膜性肠炎疗效好、疗程短、停药后复发率低.     

HPLC法测定人工养殖蟒蛇胆汁中牛磺蟒胆酸钠的含量

目的建立测定人工养殖蟒蛇胆汁中牛磺蟒胆酸钠含量的方法。方法采用高效液相色谱法测定其含量。色谱条件:Phenomenex Luna C18色谱柱(250 mm×4.60 mm,5μm);流动相为乙腈-0.15%磷酸氢二钠(10%磷酸调pH至3.0),梯度洗脱;流速为1.0 mL.min-1;检测波长203 nm;柱温35℃;进样量10μL。结果牛磺蟒胆酸钠在20.2~322.4μg.mL-1(r=0.998 9)浓度范围内线性关系良好,平均回收率为102.4%(RSD=1.4%,n=6);8批蟒蛇胆汁中牛磺蟒胆酸钠含量差异较大,平均含量为65.09 mg/g-1。结论本方法准确、快速、灵敏、重复性好,可用于蟒蛇胆汁的质量控制。     

骨宝丸对兔桡骨骨折愈合影响的实验研究

目的研究佛山市中医院"骨宝丸"对家兔桡骨中段骨折愈合中影像学、骨密度测定、组织学的影响。方法雄性普通级家兔27只随机分为骨宝丸组、伤科接骨片组、空白对照组,手术造模形成双桡骨中段横断骨折,术后以相应药物喂养,第14、28、42天行X线检查、骨密度测定、光镜观察、TGF-β1免疫组化染色。结果 X线阅片评分:骨宝丸组在治疗后14d、28d、42d均优于同期空白对照组(P<0.05或P<0.01)。骨密度测定:骨宝丸组在治疗后14d、28d、42d均优于同期空白对照组(P<0.05或P<0.01),治疗后28d、42d优于同期伤科接骨片组(P<0.05)。组织学观察:HE染色方面骨宝丸组较早出现骨小梁形成,小血管增生明显,较快出现钙盐沉积。免疫组化染色:骨宝丸组使TGF-β1的表达增加且时相提前。结论 "骨宝丸"能显著改变造模后家兔桡骨骨折的影像学和组织学表现,增加骨折端小血管增生,加速骨小梁形成和成熟,缩短骨折愈合时间,有效促进骨折端骨矿密度的提高。     

肱骨远端外柱重建治疗的手术疗效观察

[目的]评价肱骨远端外柱重建治疗肱骨外髁陈旧性骨折后遗肘外翻畸形及断端骨片不连接临床疗效。[方法]通过回顾性分析2001～2007年间收治38例肱骨外髁陈旧骨折且有肘外翻畸形及断端骨片不连接的病例,分别采用自体髂骨或异体骨移植重建肱骨外柱内固定治疗。解决肱骨远端外嵴滑动及桡骨小头移位状况。[结果]按随访1～6年疗效观察,所有病例均在术后10～24周达到骨性愈合连接,按肘部外形、活动功能和尚存并发症分级等进行分级评定,优18例,良16例,差4例,总优良率为89.5%。[结论]肱骨远端外柱重建手术既可消除骨缺损促进骨折愈合,更有支撑肱骨外髁,恢复外髁关节面平整,增强肘关节稳定性,还能保留肱骨长度及恢复力线,纠正改善肘外翻畸形。因此该术式是治疗肱骨外髁骨折后遗肘外翻畸形及外髁断片不连接的理想术式。