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重组碱性成纤维细胞生长因子基因转染对于骨髓源性成骨细胞的生物学特性及对血管生成的影响 总被引:1,自引:1,他引:0
背景:碱性成纤维细胞生长因子对来源于中胚层和神经外胚层的细胞具有明显的促进增殖作用,对骨髓间充质干细胞具有间接的成骨作用.目的:观察碱性成纤维细胞生长因子基因转染对骨髓源性成骨细胞生物学特性和血管生成的影响,与骨髓间充质干细胞作对比.设计、时间及地点:对比分析基因转染效果实验,于2007-11-27/2008-12-01在南方医科大学珠江医院中心实验室和动物实验中心完成.材料:2月龄新西兰大白兔用于骨髓间充质干细胞的分离培养及成骨细胞诱导.5周龄Wistar大鼠用于移植实验.牛pcDNA3-bFGF真核表达质粒由中山大学中山医学院免疫教研室徐霖博士惠赠.方法:分离兔骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞,采用脂质体介导将牛pcDNA3-bFGF真核表达质粒分别转染体外培养的兔骨髓间充质干细胞和诱导的骨髓源性成骨细胞,G418筛选.稳定转染碱性成纤维细胞生长因子的骨髓源性成骨细胞与磷酸钙胶原材料复合培养,植于Wistar大鼠后腿肌袋内,正常饲养2,4周后取出植入的复合材料,观察血管新生情况.主要观察指标:碱性成纤维细胞生长因子转染前后骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞生物学特性参数的比较以及骨髓源性成骨细胞转染碱性成纤维细胞生长因子前后新生血管数目的比较.结果:利用RT-PCR、免疫细胞化学染色分析转染细胞的碱性成纤维细胞生长因子表达情况.从形态、增殖特性和细胞周期、碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原等方面分析稳定表达碱性成纤维细胞生长因子的骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞生物学特性.重组牛pcDNA3-bFGF真核表达质粒成功转染目的细胞,经G418筛选稳定表达.转染的细胞有大量目的基因mRNA转录和目的蛋白表达.转染碱性成纤维细胞生长因子基因的骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞生长均加快,细胞周期中增殖期细胞比例明显增加,细胞形态无明显变化.转染与未转染的骨髓源性成骨细胞比较,碱性磷酸酶的分泌量无明显变化(P>0.05),转染后骨髓间充质干细胞的碱性磷酸酶分泌量小于骨髓源性成骨细胞(P<0.01).骨髓源性成骨细胞转染与未转染碱性成纤维细胞生长因子基因组均有Ⅰ型胶原mRNA表达,但是,转染和未转染的骨髓间充质干细胞中均无Ⅰ型胶原基因mRNA转录.转染有外源性碱性成纤维细胞生长因子基因的复合材料部分被增生纤维结缔组织包绕,内有新生血管生成,随着时间的延长而增多.结论:稳定表达碱性成纤维细胞生长因子的骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞增殖较快,但作为组织工程骨的种子细胞,骨髓源性成骨细胞较骨髓间充质干细胞更理想.外源碱性成纤维细胞生长因子基因转染后稳定表达,对新生血管的形成具有促进作用,可以作为组织工程化人工骨种子细胞转染的目的基因. 相似文献
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背景:椎间盘突出症患者腰痛原因很难判断,一直以来,认为突出的椎间盘是椎间盘突出症患者腰痛及腿痛重要原因,椎间盘突出临近退变节段是否导致腰痛需进一步研究证实。
目的:通过椎间盘造影判断突出临近退变节段是否是椎间盘突出症患者腰痛原因,并报告经椎间盘镜摘除椎间盘后残留腰痛在临近退变疼痛椎间盘经亚甲蓝注射治疗的效果。
方法:20例同时具有腰痛和腿痛椎间盘突出症患者行椎间盘造影检查,这些患者腰椎MRI表现为有1个突出椎间盘外至少合并1个或1个以上的临近退变的椎间盘,全部患者均经椎间盘镜摘除椎间盘切除突出的椎间盘,5例临近退变椎间盘造影阳性患者在椎间盘镜切除后经椎间盘内注射亚甲蓝治疗。腰痛、腿痛采用目测类比评分评定。
结果与结论:20例患者总共64个椎间盘行椎间盘造影,共11个椎间盘造影阳性,其中6个位于椎间盘突出临近退变节段,5个位于引起神经根性痛的椎间盘突出节段。全部病例腿痛行椎间盘镜切除突出椎间盘后明显缓解,腰痛有部分缓解,6例临近椎间盘造影阳性患者经椎间盘镜摘除椎间盘后腰痛明显,影响日常生活,其中5例行临近疼痛椎间盘亚甲蓝注射后腰痛缓解,1例患者拒绝亚甲蓝注射治疗仍有明显腰痛。结果显示椎间盘突出症患者腰痛可能来源于突出临近退变节段。 相似文献
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目的 探讨手部骨关节皮肤缺损同种异体骨关节移植皮瓣修复的临床效果。方法 采用同种异体掌指、指间关节移植 ,3种逆行岛状皮瓣修复皮肤缺损 ,根据需要可携带异体肌腱、关节囊。结果 治疗全掌指关节缺损 5例 ,全近指间关节缺损 2例 ,单纯掌骨头缺损 3例 ,单纯近节指骨头缺损 1例 ,获得成功。修复后的骨关节对位好 ,关节间隙存在 ,骨愈合良好 ,术后 5个月关节活动良好 ,皮瓣全部成活。结论 术式简单实用 ,效果可靠 ,损伤小 ,骨愈合率高 ,可同时利用异体骨关节携带的肌腱、关节囊一期修复肌腱、关节囊损伤 相似文献
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桡骨头移位型骨折的闭合整复治疗广东省佛山市中医院(广东528000)陈志维,陈逊文,元启鸿指导陈渭良桡骨头骨折嵌插移位,亦称为“歪戴帽”。多见于青少年,闭合性手法整复难度较大,一般认为骨折后关节面倾斜超30度者,需作切开复位等治疗。笔者于1989年开... 相似文献
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目的:研究珍珠养颜液对小鼠抗衰老作用及免疫功能的影响。方法:分别以D-半乳糖制备衰老小鼠模型、环磷酰胺造成免疫低下小鼠模型,以血清SOD、肝脏及脑组织中MDA水平、小鼠的学习记忆能力、胸腺及脾脏系数和碳粒廓清指数作为观察指标评价珍珠养颜液的作用。结果:珍珠养颜液能显著提高衰老小鼠血清SOD水平、降低肝脏及脑组织的MDA水平、增加衰老小鼠的胸腺系数,同时可改善衰老小鼠的学习记忆能力。同时,其可使得免疫低下小鼠的胸腺及脾脏系数增高,并能增强小鼠碳粒廓清能力。结论:珍珠养颜液可能具有抗衰老的作用,并可改善实验动物的免疫功能。 相似文献
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目的:总结手法整复闭合穿钉内固定治疗胫骨平台骨折临床疗效。方法:92例胫骨平台骨折患者,均运用手法整复合闭合穿钉内固定治疗。结果:术后经1-2年随访,平均骨折愈合时间3-7月,优良率86.5%,结论:采用手法整复闭合穿钉内固定治疗胫骨平台骨折,具有操作简单,损伤小,功能恢复好等优点。 相似文献