苯并二氢吡喃衍生物抗骨质疏松活性的构效关系研究

目的　研究系列苯并二氢吡喃化合物的构效关系 ,为设计优良的绝经后骨质疏松症防治药物提供理论依据。方法　在综合考察雷洛昔芬和异丙氧基异黄酮的基础上 ,设计合成一系列苯并二氢吡喃化合物 ,从整体水平考察化合物A对去卵巢大鼠骨质疏松的影响 ,从细胞水平研究C单独给药以及与雌二醇联合给药对人成骨细胞株HOSTE85增殖的影响 ,并均在 0 1μmol·L-1水平考察比较化合物BE对HOSTE85增殖的影响。结果　化合物A可一定程度对抗去卵巢大鼠骨质疏松症。C( 1 0nmol·L-1,0 1μmol·L-1)对HOSTE85具有显著增殖作用 ,C与雌二醇联合给药显著拮抗雌二醇对HOSTE85的增殖作用 ,故C可能为雌激素受体的部分激动剂。C、D( 0 1μmol·L-1)对HOSTE85具有显著增殖作用。结论　以A作为母体化合物 ,侧链引入碱性基团 ,对其结构修饰设计抗绝经后骨质疏松症药物是可行的。     

多环芳烃对胎儿和出生结局的影响

多环芳烃是由汽车尾气、各种能源物质的不完全燃烧以及吸烟产生的一种有毒物质,主要是以附着于颗粒物质的形式存在于大气中,通过呼吸和饮食等途径进入人体,不仅有致癌、致突变作用和遗传毒性,而且可以通过胎盘与DNA结合形成加合物,导致胎儿DNA损伤,影响胎儿生长发育,血液和组织中的多环芳烃DNA加合物是个体多环芳烃内暴露的生物学标志物,其导致的DNA损伤胎儿较成人更敏感.胎儿出生前和妊娠早期母体暴露于高浓度的多环芳烃是导致低出生体质量、胎儿生长受限、早产、出生缺陷等不良出生结局的危险因素,其生物学作用机制有待进一步明确.就多环芳烃对胎儿和出生结局的若干不良影响综述.     

去势大鼠体温改变与下丘脑视前区5-HT2A受体表达

目的观察大鼠去势后体温改变与下丘脑视前区5-羟色胺2A（5-HT2n）受体亚型表达之间的关系。方法用数字温度计TM902C检测大鼠的肛温,酶联免疫吸附试验测定血清激素水平,根据5HLn受体互补DNA序列合成相应的特异性引物,用PCR法观察大鼠去卵巢后下丘脑视前区5-HT2n受体表达。结果①大鼠去势组（OVX）白第八周末肛温明显高于假去势（sham）组（P〈0．05）。②OVX组大鼠血清17β-雌二醇（17β-estradiol,E2）较sham组下降,LH水平升高,差异显著（P〈0．05）。③OVX组下丘脑视前区5-HT2A受体表达增强,与sham组比较有显著性差异（P〈0．05）。结论大鼠卵巢摘除后体温升高,下丘脑视前区5-HT2A受体表达增强,提示5HT在低雌激素状态下的体温升高调节中起一定作用。     

抑制STAT3基因表达对人宫颈癌HeLa细胞定植和侵袭的影响

目的 采用RNA干扰(RNAi)技术抑制人宫颈癌HeLa细胞信号转导及转录活化因子3(STAT3)基因的表达,观察其对HeLa细胞定植和侵袭能力的影响.方法 针对STAT3基因设计并合成编码小干扰RNA(siRNA)的寡核苷酸,克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒中,从而构建针对STAT3基因的短发夹状siRNA真核表达质粒,用脂质体法将其转染人人宫颈癌HeLa细胞.利用RT-PCR技术和Western blot方法分别检测STAT3 mRNA和蛋白表达水平;通过软琼脂克隆形成实验和体外侵袭实验检测HeLa细胞的定植和侵袭能力.结果 针对STAT3基因的短发夹状siRNA真核表达质粒成功转染人宫颈癌HeLa细胞;转染成功的HeLa细胞的STAT3基因mRNA及蛋白表达均下降;HeLa细胞在软琼脂中形成的克隆数和穿透Matrigel膜的细胞数均明显减少.结论 针对STAT3基因的短发夹状siRNA真核表达质粒通过下调STAT3基因表达,抑制宫颈癌细胞的定植和侵袭能力.     

高效液相色谱法测定外周血BPDE-DNA加合物的含量

【目的】建立高效液相色谱（high performance liquid chromatographv,HPLC）紫外检测法测定反式二羟基环氧苯并（a）芘[（＋）-anti-benzoa）pyrene diol-epexide,BPDE]在人体内形成的BPDE—DNA加合物的含量,对其质量进行控制。【方法】采用Kromasil—C18柱（150mm×4．6mm,5μm）为分析柱,以甲醇-水-磷酸（80：20：0．1,v／v）为流动相,流速1．0ml／min紫外检测器检测,检测波长254nm。【结果】在4．016-803．2ng／ml的浓度范围内,BPDE峰面积与浓度呈良好的线性,相关系数r=0．9997;平均回收率均在85％～115％之间,RSD为1．32％-1．72％。【结论】本法准确、方便,可用于测定空气中苯并（a）芘在体内代谢产物BPDE～DNA加合物的含量。     

孕妇血铅水平与妊娠期高血压疾病的关系

【目的】研究孕妇血铅水平与妊娠期高血疾病的关系。【方法】依照纳入标准随机选取2005年11月-2007年11月我科确诊为妊娠期高血压疾病的孕妇92例作为观察组,92名正常孕妇作为对照组,通过问卷调查了解两组孕妇孕期补钙的情况及孕妇病史,并抽静脉血检测血铅、钙。观察孕妇血铅水平与妊娠期高血压疾病的关系,并了解孕期补钙对妊娠期高血压疾病的影响。【结果】观察组血铅水平明显高于对照组,血钙水平低于对照组,而孕期补钙的孕妇妊娠期高血压疾病的比率低于未补钙的孕妇。【结论】妊娠期高血压疾病与孕妇血铅水平存在相关性,孕期补钙可以降低孕妇血铅水平并在一定程度上减少妊娠期高血压疾病的发生。     

雌二醇对去卵巢大鼠下丘脑5-HT_(1A)和5-HT_(2A)受体亚型mRNA表达的影响

观察17β-雌二醇(17β-estradioI,E2)对去卵巢大鼠下丘脑5-HT1A和5-HT2A受体mRNA表达的影响的时间效应。实验动物分为假去卵巢对照组(OVX+S组)和去卵巢组(OVX)。去卵巢组大鼠又分为雌激素处理组(OVX+E+组)和无雌激素处理组(OVX+E-组),分别在处理后3、6、9和12 d时,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法观察5-HT1A和5-HT2A受体mR-NA在大鼠下丘脑的表达。结果显示:5-HT1A和5-HT2A受体mRNA在所有大鼠下丘脑均有表达;5-HT1A受体mRNA在3、6和9 d的OVX+E-组大鼠下丘脑的表达水平明显高于同时间点的OVX-E+组,而5-HT2A受体mRNA在6、9和12 d的OVX+E-组下丘脑的表达量也显著高于同时间点的OVX+E+组。本文结果表明去卵巢后大鼠下丘脑5-HT1A和5-HT2A受体亚型mRNA表达水平升高,17β-雌二醇可下调两种受体的表达。     

卵巢上皮性肿瘤中NF-кB与Survivin的表达及相关性

目的:探讨卵巢上皮性肿瘤中核因子кB(NFкB)与Survivin的表达及相关性.方法:采用免疫组织化学SABC法检测104例卵巢上皮肿瘤中NF-кBp65和Survivin的表达情况.结果:在卵巢上皮性恶性肿瘤、交界性肿瘤、良性肿瘤和正常卵巢组织中,NFкBp65的阳性表达率分别为71%,44%,40%和0%.恶性肿瘤中NF-кBp65的表达明显高于良性肿瘤(P<0.05).NF-кBp65的表达与病理分级和临床分期有关(P<0.05).恶性卵巢肿瘤中NFкBp65的高表达与淋巴结转移相关(P<0.05).Survivin在上皮性卵巢恶性肿瘤及交界性肿瘤中的表达率分别为65%和61%,显著高于良性肿瘤和正常卵巢组织的表达率(P均<0.05),Survivin表达与临床分期和淋巴结转移密切相关(P<0.05).NF-кB表达与Survivin表达密切相关(P<0.05).结论:NFкB与Survivin是卵巢上皮性恶性肿瘤发生与转移的有效指标,两者密切相关.     

补肾中药在治疗绝经后骨质疏松的临床研究

目前：研究补肾中药佳蓉片对绝经后妇女骨质疏松的防治作用。方法：61名绝经后妇女随机分为3组,利维爱组（2.5mg隔日1次）。佳蓉片组（每日15g,分3次服用）,对照组统一服用钙尔奇D（每日1次）,疗程6个月。治疗前后观察骨质疏松的临床症状,测定腰椎和股骨的骨密度。结果：佳蓉片组对临床症状的改善,增加腰椎和股骨的骨密度等疗效对与利维爱相同,作用优于单用钙尔奇D组。结论：佳蓉片有缓解骨质疏松症状,提高腰椎和股骨的骨密度的作用。     

STAT3短发夹RNA表达载体的构建及对SiHa细胞增殖和凋亡的作用

目的:探讨信号转导子与转录激活子3短发夹RNA(shRNA)真核表达载体对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的作用.方法:根据siRNA设计原则, 结合pSilencer2.1-U6-neo质粒特点, 针对STAT3基因设计并合成两条寡聚DNA片段, 退火后克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒, 脂质体法将重组质粒转染人宫颈癌SiHa细胞.RT-PCR和Western blot检测SiHa细胞STAT3基因mRNA和蛋白表达水平;MTT法和流式细胞术(FCM)检测细胞的增殖和凋亡.结果:成功构建了STAT3基因shRNA真核表达载体, 转染人宫颈癌SiHa细胞.细胞STAT3蛋白及mRNA表达下降;同时SiHa细胞增殖能力下降, 细胞凋亡增加.结论:构建的STAT3基因shRNA真核表达载体能够通过下调STAT3基因表达, 抑制宫颈癌SiHa细胞的增殖能力, 诱导细胞凋亡.