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31.
我们将抗肾综合征出血热(HFRS)病毒MCAbIA8重链可变区(VH)基因的3’端与轻链可变区(VI_)基因的5’端用一编码《}Iv。Ser)3的基因连接于(I。Inker)连接,构建f单链抗体(SCFV)表达载体,转化至五.V;;人.*MIO9中,用辅噬菌体超感染后,用EI。ISA间接夹心法检测,结果表明在噬菌体表面成功地表达了可与HFRS病毒抗原特异结合的单链抗体。l材料和方法l.IVH和VI。基因IASVHPUC和IASVI。PUC分别为本室克隆的含抗HFRS病毒NICAbIA8的VH基因和VI。基因。l.2VH基因与l。nil’er的连接以lASVI4PUC为… 相似文献
32.
目的 检测汉滩病毒陈株感染HUVEC细胞系ECV304中炎症介质的表达。方法 用汉滩病毒陈株感染HUVEC细胞系ECV304,取感染后不同时间的细胞提取细胞总RNA,用半定量RT-PCR检测感染细胞中ICAM-1、eNOS和IL-6基因的表达,并将扩增的ICAM-1和eNOS基因克隆,测定核苷酸序列。结果LACM-1的表达产物在病毒感染后较未感染细胞有明显升高,序列分析结果表明扩增的基因为特异性扩增产物;用扩增eNOS的引物从病毒感染细胞可扩增出表达产物,从未感染细胞不能扩增出任何产物,但序列分析结果表明扩增的基因与一新基因高度同源。结论 汉滩病毒陈株感染ECV304细胞可上调炎症某些介质的表达。 相似文献
33.
34.
HIV—1gp41基因的分段克隆和表达 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 在大肠杆菌中表达HIV-1gp41N肽和C肽基因。方法 用PCR方法从含HIV-1gp160基因的质粒中扩增HIV-1gp41N肽和C肽基因,重组人pGEX-4T-1载体,并亚克隆人pGEM7zf( )中测定核苷酸序列,限制性酶切鉴定后进行原核表达。结果 成功地扩增到HIV-1gp41N肽和C肽基因,酶切鉴定及测序结果与已知HIV-1亚型的gp41N肽区和C肽区基因序列一致,SDS-PAGE结果显示,表达出与预期分子量大小相同的蛋白。结论 N肽和C肽基因的成功表达,为进一步研究其结构和功能奠定了基础。 相似文献
35.
汉滩病毒M、S基因部分片段在大肠杆菌中的融合表达 总被引:6,自引:2,他引:4
目的在大肠杆菌中融合表达含主要抗原位点的汉滩病毒囊膜糖蛋白G1与NP片段。方法将汉滩病毒76118株M基因编码G1的片段与S基因编码区5′端约0.7kb的片段连接,克隆入pGEX4T2,构建嵌合基因原核表达载体pGEX4T2G1S0.7,并在大肠杆菌XL1Blue中,诱导GSTG1S0.7融合蛋白的表达。表达产物用ELISA和Westernblot进行鉴定。结果成功地构建了嵌合原核表达载体pGEX4T2G1S0.7。经IPTG诱导后,ELISA活性测定结果表明,该融合蛋白可与抗汉滩病毒NP及糖蛋白的mAb特异性结合。Westernblot结果显示,诱导出相对分子质量Mr大于1×105的G1S0.7与GST的融合蛋白。结论获得具有特异性结合活性的融合蛋白GSTG1S0.7,为汉滩病毒基因工程疫苗的研制奠定了基础。 相似文献
36.
37.
38.
作者用PCR方法扩增了HFRSV Chen株M片段3′末端基因,将之克隆入PUC_(18)质粒,测定出该基因片段的核苷酸序列。通过将该序列与已知6株不同型别HFRSV M片段相应部分进行比较,发现Chen株与76-118株同源性最高,而与其它株差别较大,推测两者是同属一个血清型的不同毒株。本文所应用的方法,对HFRSV基因分型研究及分子流行病学调查都有一定意义。 相似文献
39.
目的 分析成人经皮动脉导管未闭(patent ductus arteriosus,PDA)封堵术后发生主动脉瓣关闭不全(aortic regurgitation,AR)的风险、临床相关因素及转归.方法 入选101例PDA成年患者,分析PDA封堵术后26例(25.74%)新发生AR或AR程度加重患者的基本临床特征、PDA特征、封堵情况及转归,利用logistic回归模型分析发生AR的危险因素.结果 26例新发生AR或AR程度加重患者与未发生AR患者比较,平均肺动脉压[(46.2±20.7)vs (31.4±17.5)mmHg,1 mmHg=0.133 kPa]、左心室舒张末期内径[(5.2±0.2)vs (4.2±0.4)cm]、PDA大小[(14.0±6.4) vs (9.0±3.5) cm]、术前有轻度AR患者发生率38.46%(10/26) vs 18.67%(14/75)]差异均有统计学意义(P<0.05).Logistic回归分析提示左心室舒张末期内径(OR=33.541,95% CI:5.883~191.235,P=0.000)和PDA大小(OR=7.512,95% CI:1.976~28.564,P=0.003)是AR的独立危险因素.随访期间,26例AR患者中有22例(84.62%) AR愈合,1例于术后第30个月死于进行性加重的AR及心力衰竭.结论 左心室舒张末期内径和PDA大小是成人经皮PDA封堵术后发生AR的独立危险因素.大多数AR患者的转归良好. 相似文献
40.
目的 评价中国冠状动脉旁路移植手术风险评估系统(SinoSCORE)对心脏瓣膜术后院内死亡及术后并发症的预测价值.方法 回顾性收集2005年至2011年第二军医大学长海医院行心脏瓣膜手术患者的围手术期资料,采用SinoSCORE模型计算全组患者院内预期死亡风险,并验证SinoSCORE与术后并发症[低心排血量综合征、肾衰竭、肺部感染、使用主动脉内气囊泵(IABP)、延迟拔除气管插管、ICU住院时间延长以及二次手术]发生率间的关系,采用ROC曲线下面积评价模型区分度,以Hosmer-Lemeshow拟合优度检验评价模型校准度,采用Youden指数确定SinoSCORE有较好预测价值的术后并发症的最佳诊断界值.结果 入选3407例患者,平均年龄(49.2±13.3)岁.术后院内死亡率ROC曲线下面积为0.754(95%可信区间为0.701~0.806),提示模型有较好区分度.总体术后院内死亡率为3.05%(104/3 407),SinoSCORE预测院内死亡率为(3.1士0.1)%,Hosmer-Lemeshow拟合优度检验x2=9.545,P=0.490,提示模型有较好校准度.SinoSCORE对术后低心排血量综合征、肾衰竭及使用IABP有较好的预测价值(ROC曲线下面积分别为0.708、0.711和0.718),最佳诊断界值分别为5.5、7.5和6.0.结论 SinoSCORE模型预测中国心脏瓣膜手术患者的术后院内死亡风险效果良好,对术后低心排血量综合征、肾衰竭及使用IABP也有较好的预测作用. 相似文献