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目的研究Claudin家族成员在Helicobacterpylori(H.pylori)和AGS相互作用的不同时间点表达谱变化。方法TRIzol方法提取H.pylori26695攻击AGS细胞0、0.5、2、4、6h时间点的细胞总RNA样品,对样品mRNA进行线性扩增后,应用IlluminaHuman-6芯片检测基因表达量,以DetectionScore≥0.99;IDiffScoreI≥13;方差分析(ANOVA)P≤0.05作为筛选差异基因的标准;比较Claudin家族成员的表达量.结果Claudin家族有4个成员存在差异表达,其中在早期Claudin15下调,4h后无差异,Claudin2、23早期上调后于4h和6h分别恢复至无差异水平,而Claudin6在0.5h后持续上调。结论Claudin蛋白家族2、6、15、23成员参与H.pylori感染过程,并且呈现时序性变化,为H.pylori感染能引发胃癌机制研究提供线索。 相似文献
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背景:目前克拉霉素耐药机制的研究主要集中于对幽门螺杆菌(H.pylori)23S rRNM基因的分析.其他基因与克拉霉素耐药的关系在国内外尚未见报道。目的:应用蛋白质组学技术分析不同克拉霉素浓度下耐药H.pylori菌株的发生机制,以期发现新的克拉霉素耐药相关基因。方法:以H.pylori 26695为出发菌株,在含克拉霉素平皿上选择耐药突变体,提取全菌蛋白后通过双向凝胶电泳(2-DE)分离蛋白,银染后应用Image Master 2D Elite软件比较不同浓度克拉霉素耐药株和野生株的蛋白表达差异.应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI—TOF—MS)进行鉴定.并在NCBI的H.pylori蛋白数据库中搜索理论上酶解肽段能与之相匹配的蛋白。结果:共10个蛋白点在耐药株与野生株以及不同浓度耐药株间有明显差异,其中3个蛋白点为DNA指导的RNA多聚酶d亚单位,其表达量和等电点在耐药株与野生株间存在明显差异;1个蛋白点为黄素氧化还原蛋白,其在耐药株中的表达量上调;2个蛋白点为30S核糖体蛋白S1。其在耐药株中的表达量下调;3个蛋白点为过氧化氢酶,其在耐药株中的表达量上调;1个蛋白点为细胞分裂抑制剂,其在低浓度克拉霉素耐药株中的表达量较野生株上调,而在高浓度克拉霉素耐药株中的表达量较野生株下调。结论:不同浓度克拉霉素耐药株的耐药机制有不同的相关靶点,为研究H.pylori 23S rRNA以外克拉霉素的耐药机制提供了线索。 相似文献
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