体外转录法制备地高辛标记HCV核心区RNA探针及其初步应用

目的制备地高辛标记的HCV核心区RNA探针,用于筛选与丙型肝炎病毒(HCV)RNA核心区结合的细胞蛋白质分子。方法采用RT-PCR方法,从HCV感染者血清中扩增HCV C区cDNA序列,将所得序列克隆入载体PinpointT-MT Vector和pGEM-7EF( )Vector,进行PCR、酶切和测序鉴定。以HCV-pGEM-7EF( )中的HCV核心区cDNA序列作为体外转录RNA的模板,经T7 RNA聚合酶转录得到地高辛标记的HCV核心区RNA探针。将地高辛标记的探针用于紫外交联实验,筛选HepG2细胞中可与HCV RNA结合的蛋白质分子。结果所得HCV核心区cDNA序列为503 bp。地高辛标记的HCV核心区探针初步筛选到两个与HCV RNA结合的蛋白。结论地高辛标记的HCV核心区RNA探针具有较高的特异性和敏感性,可用于筛选与HCV RNA结合的细胞蛋白质分子。     

流动人口家属艾滋病相关知识、态度和行为调查

目的了解流动人口家属艾滋病知识水平,探索有效的干预模式。方法采用分层整群随机抽样方法,对家中有流动人口的村民进行调查。结果总体上流动人口家属对艾滋病基本知识缺乏了解,知识水平普遍较低,自我保护能力和意识比较薄弱,对HIV感染者态度总体上比较消极,但接受艾滋病和性病知识宣传教育的意愿较高。结论流动人口家属的艾滋病健康教育刻不容缓,必须加强综合宣传教育。     

急性病毒性肝炎最佳诊断策略的成本效益分析

目的：探讨急性病毒性肝炎病原学分形诊断最优策略。方法：收集中国生物医学（CBMD）1987／1999的所有相关献,进行系统综述、成本效益和灵敏度分析。结果：以HAV→HBV→HEV→HCV分型策略进行分型诊断的成本效益比（CER）17．9,HAV→HBV→HCV→HEV分型策略的CER为18．7,HBV→HAV→HCV→HEV CER为19．0,其余策略均大于20。年龄和试剂盒价格对分型策略影响不大。但如果乙肝病例占总病例的48．3％时,策略HBV→HAV→HEV→HCV的CER（15．1）最低。结论：甲、乙丙、戊型肝炎同时检测成本较高,策略HAV→HBV→HEV→HCV是最佳策略,但乙型肝炎病例占48．3％以上时,策略HBV→HAV→HEV→HCV为最佳。     

血清反复冻融对HBsAg和抗HBs抗体检测的影响

0　引言　 EL ISA技术已在乙肝标志物的检测中已普遍应用 ,一般认为收集的血清应及时检测 .而在基层单位或在流行病学调查研究中 ,由于血标本收集不集中 ,或者有些标本常需检测多个指标而持续时间较长 ,因此 ,血清必须低温贮存一定时间或反复冻融后检测 ,而血清冻融对 EL ISA检测结果是否有影响尚不清楚 .为此 ,我们对 183份血清标本冻融前、冻融 3次、冻融 6次后的 HBs Ag和抗 - HBs进行了检测和分析比较 .1　材料和方法1.1　材料　 1999- 0 5收集西京医院门诊乙肝 5项检测血清183份 ,年龄、性别、诊断不限 .1.2　方法　于初次检测 …     

新生儿外周血及胃液乙肝标志物与宫内感染关系的研究

目的:探讨新生儿外周血及胃液HBeAg,HBsAg等标志物与乙型肝炎病毒宫内感染的关系.方法:连续收集母亲外周血标本和新生儿外周血及胃液标本,ELISA检测HBeAg,HBsAg,PCR方法检测HBV DNA;以ABBOTT试剂检测新生儿HBsAg.采用χ2检验等统计学方法对结果进行统计分析.结果:共收集133例母亲、新生儿血标本和胃液标本.58例胃液HBsAg阳性,9例胃液HBeAg阳性.HBV DNA均阴性,其中发生宫内感染5例.统计学检验显示新生儿外周血HBeAg、胃液HBsAg与乙肝病毒宫内感染有关系,而胃液HBeAg阳性与乙肝病毒宫内感染没有关系 (P=0.415).结论:新生儿外周血HBeAg与胃液HBsAg与乙肝病毒宫内感染有关;但是由于所有标本HBV DNA均阴性,尚不支持乙肝病毒宫内感染的胃液途径.     

HBsAg阳性孕妇足月分娩胎盘HBV感染状态的免疫组织化学研究

目的：拟从观察胎盘乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染状态，探讨ＨＢＶ宫内传播发生的机制，以期为进一步预防ＨＢＶ宫内传播提供科学依据．方法：采用ＡＢＣ免疫组织化学染色检测ＨＢｓＡｇ阳性孕妇足月分娩胎盘ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ感染和分布状态．结果：在６２例足月分娩胎盘中，２１例检出了ＨＢｓＡｇ，８例检出ＨＢｃＡｇ．ＨＢｓＡｇ主要分布于蜕膜血管内皮细胞（１８例）、蜕膜细胞（２１例）、滋养层细胞（８例）、绒毛间质细胞（８例）和绒毛血管内皮细胞（５例）的胞浆和绒毛间隙（２１例）中．ＨＢｃＡｇ分布于蜕膜细胞（５例）、蜕膜血管内皮细胞（８例）和绒毛间质细胞（８例）的胞核内．结论：结果提示，ＨＢＶ可在胎盘组织中复制．ＨＢＶ经胎盘感染胎儿的主要途径可能是经血和（或）细胞传递方式实现的．即ＨＢＶ经蜕膜细胞和（或）绒毛间感染滋养层细胞，然后感染绒毛间质细胞，最终感染胎儿毛细血管内皮细胞     

农村脑卒中患者家庭陪护人生命质量的研究

目的了解脑卒中致农村家庭负担，为今后降低脑卒中对家庭的危害性提供依据。方法以SF-36量表作为测量工具，采用人户的方式对71名脑卒中的家庭陪护人进行调查。结果脑卒中患者及其家庭陪护人在8个维度的评分比较，经t检验，差别均无统计学意义（P〉0．05）。男女性家庭陪护人在8个维度的评分上均低于四川省40～59岁农村人口，差别有统计学意义（P〈0．01）。结论脑卒中在严重影响患者自身生命质量的同时，给农村家庭造成的负担不容忽视。     

汉中市2003年农村脑卒中患者经济负担的分析

目的分析汉中市2003年农村人口脑卒中所致直接和间接经济负担。方法直接经济负担的分析中,采用自行设计的调查表,入户进行问卷调查;间接经济负担的分析采用DALYs与人力资本法结合的方法。结果汉中市农村人口脑卒中患者直接经济负担为3100元,男性和女性间差异无统计学意义(P>0.05),各年龄组间差异也无统计学意义(P>0.05)。首发患者的直接经济负担为5500元,既往患者的直接经济负担为1700元,首发患者的直接经济负担明显高于既往患者(P<0.05)。脑卒中间接经济负担为1993977.8元,患者人均间接经济负担为12158.4元。结论脑卒中给汉中农村人口和社会造成了沉重的经济负担,应制定相应策略以降低其所引起的经济负担。     

孕期抗病毒治疗研究现状

妊娠时病毒性疾病不仅常见，且危害极大，因此孕期抗病毒治疗目前越来越普遍。本文就近年来孕期抗病毒治疗研究进展进行综述。     

紫外交联实验筛选HCV RNA结合蛋白的应用

目的 选择一种用于筛选与丙型肝炎病毒（HCV）RNA核心区结合的细胞蛋白质分子较佳方法。方法 用体外转录的方法制备地高辛标记（DIG）-HCV RNA；从HepG2细胞中提取细胞蛋白质分子。分别用紫外交联实验（UV）和凝胶迁移实验（EMSA）筛选HepG2细胞中可与HCV RNA结合的蛋白质分子。结果 2种实验方法均可检测到细胞蛋白质分子与HCV RNA结合。但凝胶迁移实验结果所见DIG—RNA信号比较弥散，而紫外交联实验的结果可见比较清晰的RNA-结合蛋白条带。结论 紫外交联实验是用于筛选HCV—RNA结合蛋白的首选方案。