临床化学自建检测系统的误差分析

目的通过对上海市医院实验窜使用的部分临床化学试剂的患者样本比对实验,分析临床化学检测系统误差。方法选择5家国产试剂厂家（分别为MI）、YY、KH、FH、CZ）,根据厂家的校准声明校准其试剂,在日立自动生化分析仪上与罗氏诊断产品有限公司试剂进行内氨酸转氨酶（ALT）、尿素（Urea）、胆固醇（Chol）、白蛋白（Alb）4个项目的比对实验。用回归方法统计比对结果,并计算4个项目在医学决定水平处的偏倚。结果MD的ALT、试剂与罗氏试剂比对结果的相关系数（r）为0．7350。其余试剂比对结果的r均〉0．975。MD试剂ALT在20、60和300U／L,Urea在9．28和17．84mmol／L,Chol在2．33mmol／L,Alb在20g/L时的偏倚高于允许误差。其余试剂在医学决定水平处的偏倚均低于允许误差．结论5家国产试剂与进口配套试剂进行4个常规生化项目的患者样本比对实验,除一家厂家外,其余试剂质量基本符合临床使用要求。     

琼脂石蜡双包埋和免疫细胞化学染色的细胞学应用

胸水和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)是肺癌细胞学常见的诊断标本,病理科常规采用离心涂片法,但普遍存在检出率低的问题.主要原因是收集的细胞数量少、大量可疑细胞随残液被弃,而导致假阴性结果,因此充分保留有限的体液细胞成分成为提高细胞学诊断的新思路.     

自体骨髓干细胞移植治疗慢性下肢缺血94例不同病变分期患者的效果比较

目的：观察自体骨髓干细胞移植对慢性下肢缺血间歇性跛行期、静息痛期、溃疡期和坏疽期患者治疗效果的比较。方法：选取2003-03／2005-02首都医科大学宣武医院收治慢性下肢缺血患者94例（102条患肢），男59例，女35例，年龄平均69．5岁。病因：糖尿病性下肢缺血90条患肢（84例患者），单纯动脉硬化闭塞症7条患肢（6例患者），血栓闭塞性脉管炎5条下肢（4例患者）。间歇性跛行期13条患肢（12例患者）；静息痛期41条患肢（38例患者）；组织缺损期包括溃疡期和坏疽期，分别有26条患肢（24例患者）和22条患肢（20例患者）。①全部患者均行自体骨髓干细胞移植，采用下肢局部肌肉注射、下肢动脉腔内注射、下肢局部肌肉注射和动脉腔内注射同时进行3种方法。下肢局部肌肉注射是将经过分离、提纯的自体骨髓干细胞，采用多点方法注射在患肢缺血部位的肌肉内；下肢动脉腔内注射是将骨髓干细胞注射在下肢动脉腔内，注射时要用球囊导管阻断下肢动脉闭塞处的近端血流，时间3-5min；下肢局部肌肉注射并动脉腔内注射的方法是同时采用前2种方法进行移植。②主要临床症状与体征主观指标的评估：间歇性跛行期根据在正常速度下行走的距离分为5级（0级：行走≥500m，无疼痛；1级：行走400-499m，有疼痛；2级：行走300-399m，有疼痛；3级：行走100-299m，有疼痛；4级：静息痛，无法行走或行走〈100m，有疼痛）。静息痛期根据疼痛与否及疼痛程度分为5级（0级：无疼痛；1级：偶有疼痛，被问及能回忆起；2级：疼痛经常出现但能耐受，不需或偶用一般止痛剂；3级：经常使用一般止痛剂；4级：因疼痛影响睡眠，一般止痛剂难以缓解）。患肢冷感根据患肢有无冷感及冷感的程度分为5级（0级：无冷感；1级：受累肢体偶有发凉、怕冷的感觉；2级：受累肢体经常有发凉、怕冷的感觉；3级：受累肢体明显有冷、凉的感觉#采用局部保温措施后症状能得到一定程度的缓解；4级；受累肢体明显有冷、凉的感觉，采用局部保温措施后症状仍无明显改善）。③主要临床症状与体征客观指标的评估：新生侧支血管评估根据其数量分为4级（0级：无新生侧支血管；1级：少许新生侧支血管；2级：中量新生侧支血管；3级：丰富新生侧支血管）。保肢率以术后2个月为基准，观查各期的截肢率和保肢率。④疗效评估：患肢疼痛、冷感和间歇性跛行未减轻为无变化，减轻1级为改善，减轻2或3级为明显改善，达到0级为症状消失；创面愈合并且疼痛消失为治愈，创面明显缩小为明显改善，刨面缩小为改善，创面及疼痛无变化或扩大为无效。结果：按意向处理分析，纳入实验的94例患者102条患肢全部进入结果分析。①不同患病期的下肢缺血总有效率比较：间歇性跛行期100％，静息痛期92．7％，溃疡期83.3％，坏疽期59．1％。前3期比较基本相近（χ^2=1．01～2．23，P〉0．05）；静息痛期与溃疡期比较仍无差异（χ^2=1．11，P〉0．05）；前3期均显著高于坏疽期（χ^2=10．48，P〈0．01；在5．18，P〈0．05；χ^2=3．93，P〈0．05）。②不同患病期的踝肱指数变化：间歇性跛行期、静息痛期、溃疡期、坏疽期踝肱指数增加分别为46．2％，31．7％，34．6％和27.3％，无明显差异。③不同患病期保肢率：间歇性跛行期100％，静息痛期97．6％，溃疡期88．5％，坏疽期59．1％。前3期比较基本相近（χ^20．32～0．41，P〉0．05）；静息痛期与溃疡期比较也基本相近（χ^2=2．35，P〉0．05）；前3期均显著高于坏疽期（在15．87，P〈0．0l；χ^2=5．18，P〈0．05；χ^2=5．48，P〈0．05）。④不同患病期经皮氧分压增加与血管生成情况：经皮氧分压测定各期之间无明显差异。下肢动脉造影显示，有丰富血管生成的百分比各期之间也没有明显差异。结论：自体骨髓干细胞下肢局部肌肉注射移植治疗下肢缺血患者，在病变的早、中阶段和单纯溃疡阶段，其有效率和保肢率均无明显差异，但以上3阶段的有效率和保肢率均明显高于晚期的有组织坏疽阶段，充分说明自体骨髓干细胞移植特别适合下肢缺血患者病变的早期与中期，对于缺血晚期特别是患肢存在组织坏疽者的治疗效果仍有待进一步提高。     

复发性腰椎间盘突出并腰椎不稳症手术治疗39例分析

目的：探讨复发性腰椎间盘突出并腰椎不稳症的手术方法。方法：1998年2月至2003年2月采用全椎板切除，椎管减压，“H”型植骨融合，张力钢丝内固定治疗复发性腰椎间盘突出并腰椎不稳症39例。结果：随访10个月～5年，平均28个月。根据Nakai标准评定，优14例，良22例，可3例。结论：全椎板切除，椎管减压，“H”型植骨融合，张力钢丝内固定治疗复发性腰椎间盘突出并腰椎不稳症，既能彻底减压，又重建脊椎的稳定性和减轻术后椎板切除膜的形成，达到治疗的目的。     

犬内皮与平滑肌细胞的短期静态联合培养

目的:为获得组织工程化自体血管,观察体外静态培养条件下犬内皮细胞与平滑肌细胞联合培养组织学及形态学的特征。方法:实验于2004-07/2005-06在首都医科大学宣武医院外科院级实验室完成。①实验材料:雄性杂种犬,3个月龄,体质量8～12kg。②实验方法:贴块法及酶解法对犬内皮细胞及平滑肌细胞进行原代分离培养及扩增,将第Ⅱ代平滑肌细胞以1×109L-1的密度种植于胶原膜上培养13d,再将第Ⅱ代内皮细胞接种于生长平滑肌细胞的胶原膜上2d。③实验评估:行苏木精-伊红染色同时扫描电镜和透射电镜观察平滑肌细胞和内皮细胞在胶原载体上联合培养后的形态。结果:苏木精-伊红染色见平滑肌细胞较均匀的分布于支架材料表面及内部;扫描电镜下,平滑肌细胞可以在胶原载体材料上生长,增殖明显并在短期内形成多层细胞。内皮细胞与平滑肌细胞联合培养2d就可在平滑肌细胞层表面获得连续的单层内皮细胞层。结论:在短期静态培养条件下犬的血管平滑肌细胞和内皮细胞可以在胶原载体材料上形成具有两层细胞结构的组织工程化动脉血管组织片。     

Stretta微量射频治疗胃食管反流病的护理

胃食管反流病（gastroesophageal reflux disease,GERD ）是由于下食管括约肌功能障碍引起胃内容物反流食管导致的一系列慢性症状和食管黏膜损害,临床表现为烧心、反酸、反食等,甚至出现反复发作的难治性哮喘、慢性咳嗽、胸闷、不典型胸骨后疼痛、咽部不适、咽部异物感。传统的治疗方法包括抑酸、促进胃动力、保护胃黏膜及外科手术治疗等,但患者花费多、治疗周期长,手术则创伤大、疼痛明显、留有手术瘢痕。自2006年4月以来,我中心在国内首创应用Stretta微量射频治疗胃食管反流病,本法为无创治疗,且临床效果明显。现将我中心Stretta微量射频治疗胃食管反流病10例患者围术期的护理心得报告如下。     

一氧化氮外源性供体L-arginine对破骨细胞骨吸收功能的影响

目的:一氧化氮在维持机体多个系统的生理功能中起重要作用,许多慢性疾病可造成一氧化氮产生减少,此时一氧化氮供体是一种必要的补充。观察一氧化氮外源性供体L-arginine对体外培养破骨细胞增殖及骨吸收功能的影响。方法:实验于2005-06/2006-05在四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室干细胞与组织工程研究室完成。选择出生1d的清洁级SD大鼠乳鼠,采用骨髓诱导法体外培养破骨细胞,培养液内分别加入0.3,0.6,1.0g/L不同浓度的L-arginine,并以等体积三蒸水作为对照。培养7d后,以抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察破骨细胞数目、形态,MIAS-2000图像分析仪检测骨片上骨吸收陷窝的数目和面积,并用扫描电镜观察不同浓度L-arginine对骨吸收陷窝的影响。结果:①破骨细胞的一般形态:破骨细胞较其他细胞大,形态不规则,呈油煎蛋形、长条形、腊肠形或漏斗形等,细胞内可见几个至几十个核不等。抗酒石酸酸性磷酸酶染色酶活性部分酒红色,颗粒状。②抗酒石酸酸性磷酸酶阳性细胞数:各组破骨细胞数目随着L-arginine浓度增加而减少(P<0.05)。③骨吸收陷窝的面积和数目:骨片培养7d,吸收陷窝计数的结果显示,0.3g/L以上浓度L-arginine对破骨细胞吸收功能均有明显抑制作用,并呈剂量相关性。0.3g/LL-arginine组陷窝面积为对照组的91%(P<0.05),0.6g/LL-arginine组为对照组的80%(P<0.05),1.0g/LL-arginine组为对照组的69%(P<0.01)。结论:采用骨髓诱导法培养的破骨细胞数量多、纯度高,且具有明显的骨吸收功能。L-arginine抑制破骨细胞增殖,抑制破骨细胞骨吸收功能,并呈剂量相关性。     

减／低压引流根治术治疗高位肛周脓肿的临床研究

目的探讨减/低压引流根治术在高位肛周脓肿治疗中的临床效果。方法选取我院2014年10月至2016年10月收治的86例高位肛周脓肿患者随机分为观察组44例,对照组42例。观察组患者采用减低压引流根治术治疗,对照组采用一期切开挂线根治术治疗。观察两组患者术后情况,包括疼痛、肛门功能、愈合时间、临床效果,并对以上指标量化评分进行统计学分析比较。结果观察组的治愈率100%（44/44）,明显优于对照组90.47%（38/42）,两组比较差异有统计学意义（χ2＝4.395,P＝0.036）;观察组术后疼痛评分（1.681±0.945）分,明显低于对照组（3.328±1.300）分,差异有统计学意义（t＝－4.504,P＝0.000）;观察组复发例数0例,明显低于对照组4例（P＝0.036）;观察组愈合时间（22.08±2.12） d,明显少于对照组（37.52±2.61） d,两组比较差异有统计学意义（t＝29.041,P＝0.000）;观察组的肛门功能评分（1.681±0.838）分,明显低于对照组（2.809±0.928）分,两组比较差异有统计学意义（t＝－3.217,P＝0.000）。结论减压引流根治术是一种保留括约肌的根治高位肛周脓肿的有效手术方法,不仅充分保留了括约肌和肛直环,又减轻了术后肛门功能和形态受损的程度,既减轻了手术痛苦又节省了住院时间和费用。     

约氏疟原虫感染不同小鼠免疫分子的应答差异

目的探讨在约氏疟原虫感染过程中不同宿主的免疫应答差异。方法以约氏疟原虫（致死型）感染DBA／2和BALB／c小鼠，计算红细胞感染率；收集感染前和感染后1、3、6、9、12、15、20d小鼠血清，并无菌取出脾脏，培养脾细胞。应用ELISA试剂盒检测小鼠血清中IFN-γ和IL-12水平，并通过Griess方法检测脾细胞培养上清中NO含量。结果DBA／2小鼠的原虫血症峰值水平明显低于BALB／c小鼠，并于感染后第20d左右自愈；BALB／c小鼠于原虫血症达到峰值水平后全部死亡；DBA／2小鼠的IFN-γ和IL-12水平于感染后1d即出现了有意义的升高并持续到第20d；BALB／c小鼠的IFN-γ和IL-12水平仅干感染后1d出现了有意义的升高；DBA／2小鼠NO的产生于感染后3d出现了有意义的升高，第6d达到峰值，而BALB／c小鼠的NO水平始终未见明显升高。结论DBA／2小鼠通过感染早期Th1细胞免疫应答的有效建立能够抑制原虫血症，IL-12是启动并维持Th1细胞免疫应答的关键性细胞因子。