联系疫情和相关知识在医学微生物学教学中的应用

医学微生物学是一门理论性、实践性、应用性很强的基础医学课程,但在教学上,医学微生物学却有知识繁杂、信息量大以及教学内容模式化等特点。理论联系实际开展教学并把医学微生物学与其他基础医学和临床医学课程相联系,能提高学生对医学微生物学重要性的认识,激发学生的学习兴趣,取得更好的教学效果。     

柯萨奇病毒B3VP1重组腺病毒载体疫苗rAd/VP22-L-VP1的构建及表达

背景：VP22是单纯疱疹病毒1型（Herpes simplex virus type1,HSV-1）UL49基因编码的碱性蛋白质,具有蛋白转导结构域（protein transduction domain,PTD）,能够把与之融合的蛋白或与之结合的DNA等大分子跨膜送递到邻近细胞,在基因靶向预防中表现出优势。目的：构建表达单纯疱疹病毒1型VP22与柯萨奇病毒B3主要中和抗原VP1融合蛋白的重组腺病毒载体疫苗,观察外源基因在HEK293细胞中的良好表达。方法：PCR法扩增目的基因HSV-1VP22和CVB3VP1,经Linker连接,将VP22-L-VP1插入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,构建重组穿梭质粒AdTrack-CMV/VP22-L-VP1。再将此载体与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,生成重组腺病毒质粒pAd/VP22-L-VP1,脂质体介导pAd/VP22-L-VP1转染HEK293细胞包装重组腺病毒rAd/VP22-L-VP1。HEK293细胞上进行病毒扩增和滴定并检测外源基因的表达。结果与结论：构建的重组腺病毒载体pAd/VP22-L-VP1经过第4轮扩增,其滴度达到6.77×107pfu/mL,体外感染293细胞可见VP22和VP1融合蛋白的表达。说明实验成功构建并包装重组腺病毒rAd/VP22-L-VP1。     

肠道病毒RNA RT-PCR检测在病毒性心肌炎诊断中的应用

目的 探讨ＲＴ－ＰＣＲ方法在肠道病毒感染诊断中的应用。方法 根据肠道病毒５’非编码区和ＶＰ２基因区共同序列设计一对引物,建立了检测各型肠道病毒的ＲＴ－ＰＣＲ方法。用该方法扩增已知病毒,并用于临床标本检测。结果 所检测１１种已知病毒中,只对肠道病毒的９个型别扩增,１８６例心肌炎患者血清标本中,５２例（２７．９５％）阳性,１５例脑炎患者脑脊液标本中,４例（２６．６７％）,阳性。结论 该ＲＴ－ＰＣＲ方法     

氧化修饰低密度脂蛋白的免疫原性及其研究进展

低密度脂蛋白发生氧化修饰后 ,化学结构与生物学特性发生明显改变 ,产生新的抗原决定簇 ,具有较强的免疫原性。可以引起免疫反应 ,刺激机体产生特异性抗氧化修饰低密度脂蛋白抗体。从而使ox LDL可以通过免疫学途径参与动脉粥样硬化的发生和发展。本文就ox LDL的免疫原性及其研究进展作一综述。     

抗氧化修饰低密度脂蛋白抗体的检测及其与动脉粥样硬化关系的研究进展

低密度脂蛋白的升高及其发生氧化修饰形成氧化修饰低密度脂蛋白 (ox LDL)是动脉粥样硬化 (AS)发生发展的关键步骤。它可以通过四种机制参与AS的形成过程。但ox LDL可以通过免疫学机制参与动脉粥样硬化的发生并未引起太多的注意。ox LDL具有较强的免疫原性 ,血液中也可以检测到抗ox LDL自身抗体。实际上 ,这不仅仅反映了ox LDL可存在于血液循环中 ,此抗体本身及其形成的免疫复合物在动脉粥样硬化的发病机理中可能发挥更为重要的作用。     

CVB3腺病毒载体疫苗Ad/MDC-VP1与DNA疫苗联合应用的免疫效果

目的 构建重组腺病毒Ad/MDC-VP1,观察Ad/MDC-VP1与NA疫苗联合应用的免疫效果.方法 构建、包装重组腺病毒Ad/MDC-VP1并检测目的 蛋白的表达.BALB/c小鼠随机分为Ad/MDC-VP1、pcDNA3/MDC-VP1、pcDNA3/MDC-VPl+Ad/MDC-VP1和PBS 4组,肌肉注射免疫小鼠.用ELISA法和微量中和试验法分别检测血清柯萨奇病毒B3(CVB3)VP1 IgG和中和抗体滴度;CCK-8法检测淋巴细胞增殖活性和特异性CTL杀伤活性;用致死量CVB3攻击小鼠后,检测血中病毒滴度并观察小鼠的存活率.结果 成功构建并包装了重组腺病毒Ad/MDC-VP1,检测到目的 蛋白的表达.peDNA3/MDC-VP1+Ad/MDC-VP1组血清CVB3 VP1 IsG滴度、淋巴细胞增殖指数、CTL杀伤活性和对小鼠的保护率明显高于其他各组(P<0.05),血清病毒滴度低于其他各组(P<0.05).结论 Ad/MDC-VP1与DNA疫苗联合应用能显著提高小鼠细胞和体液免疫应答.     

白细胞介素-2基因佐剂对柯萨奇病毒B3 VP1基因疫苗的免疫增强作用

目的探讨白细胞介素 2 (interleukin 2 ,IL 2 )基因佐剂对柯萨奇病毒B3(CoxsackievirusB3,CVB3)基因疫苗的免疫增强作用。方法将 pcDNA3/IL 2 pcDNA3/VP1、pcDNA3/VP1、pcDNA3/IL 2、空白质粒 pcDNA3和生理盐水分别肌内注射免疫BALB/C小鼠 ,1次 /周 ,共注射 3次 ,每次注射后的第 6天断尾取血 ,用微量中和试验方法检测血清中和抗体 ;第 3次注射后的第 7天用 80 0TCID50 CVB3感染小鼠 ,观察各组小鼠的生存情况。结果pcDNA3/IL 2 pcDNA3/VP1和 pcDNA3/VP1组小鼠能产生中和抗体 ,抗体滴度随免疫次数增加而提高 ,pcDNA3/IL 2 pcDNA3/VP1组抗体水平高于同期 pcDNA3/VP1组抗体水平 ,但各组小鼠的生存率无显著性差异(P >0 .0 5 )。结论IL 2基因佐剂对 pcDNA3/VP1诱导抗体产生有一定免疫增强作用。     

自分泌生长因子与癌瘤

生长因子的自分泌概念,是在研究分子和细胞基础的恶性转化中提出的统一题目。最近发现,癌基因能提供癌细胞生长因子自主性,从而导致过去独立的两个研究领域——癌基因和多肽生长因子——的统一。多年来,人们早就认识到恶性细胞具有相对的自主性。这就是,恶性细胞维持最佳生长和增殖所需要的外源性生长因子,比他们的正常对应细胞要少。为了解释这一现象,有人设想:细胞产生内源性多肽生长因子,这些因子作用于原来细胞的功能性外部受体,引起该细胞肽的表型表达,从而发生恶变。这一过程叫做自分泌。