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101.
为探索退变寡核甘酸引物多聚酶链反应(DOP-PCR)比较基因组杂交(CGH)单细胞基因组研究的可能性,用DOP-PCR扩增正常XX、XY,异常XO、XXY、13三体和21三体单个细胞基因组DNA,经萤光标记后,分别以正常男性基因组DNA和正常男性单个淋巴细胞DOP—PCR产物为参照,进行CGH分析。结果以基因组DNA为参照的CGH双色荧光强度比均数波动围大,约30%区域的标准差超过正常允许范围,X染色体呈假性过度表达,未能检出13,21三体。以单细胞DOP-PCR产物为参照的CGH强度比均数接近期望值1.0,仅6%的标准差超出正常波动范围,13和21三体的相应染色体大部分常染色质区过度表达。结论:单细胞DOP-PCR存在非随机的不均匀扩增,其对CGH的影响,能通过应用单细胞DOP-PCR产物为参照而得以纠正。单细胞DOP-PCR-CGH及其用于着床前胚胎及母体血胎儿单细胞全基因组研究具有可能性。 相似文献
102.
103.
结肠腺瘤性息肉病基因的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
结肠腺瘤性息肉病基因(adenomatous polyposis coli, APC)是家族性腺瘤样息肉病(familial adenomatous polyposis,FAP)的致病基因。本文从分子水平对APC的结构功能及检测作一探讨,展示肿瘤抑制基因APC的突变如何启动激活癌基因参与细胞调亡,从而导致肿瘤发生。对APC的研究,可为未来的基因治疗, FAP家系管理及遗传咨询提供理论依据,进行产前和遗传学诊断等手段终止突变基因的遗传,从源头上控制遗传病的发生,对于提高人口遗传素质,降低人口的遗传负荷意义深远。 相似文献
104.
小鼠植入前胚胎对输卵管上皮细胞DNA甲基转移酶1表达的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨小鼠植入前胚胎对输卵管上皮细胞DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,Dnmt1)表达的影响。方法 应用免疫组织化学方法确定Dnmt1蛋白在小鼠输卵管的组织学定位;选取植入前胚胎的2细胞期、4细胞期和8细胞期作为3个观察点,采用实时逆转录-聚合酶链反应和Western印迹分别检测正常妊娠和假孕小鼠输卵管上皮Dnmt1 mRNA和蛋白表达水平的变化。结果 Dnmt1蛋白主要表达于上皮层;妊娠组小鼠各期Dnmt1 mRNA表达水平均显著性低于同期假孕组(P〈0.05),妊娠组4细胞期Dnmt1蛋白表达水平显著性低于同期假孕组(P〈0.05)。结论 小鼠植入前期的胚胎对母体输卵管上皮Dnmt1 mRNA和蛋白表达存在调节作用,提示胚胎可能通过DNA甲基化间接调控输卵管上皮某些基因的表达,Dnmt1可能参与胚胎-母体交流的部分机制。 相似文献
105.
DNA甲基化的研究方法学 总被引:6,自引:0,他引:6
随着胚胎学和肿瘤学基础研究的迅速发展,DNA甲基化作为基因表遗传学(epigenetics)的重要机制之一,受到越来越多的关注。对于DNA甲基化的研究,目前有很多方法,大致可以分为两类:一类是从DNA甲基转移酶(DNMTs)的角度,另一类是从DNA甲基化水平的角度进行研究,后者又分为总体DNA甲基化水平和特异基因序列DNA甲基化水平的检测。 相似文献
106.
雌激素对中枢神经系统有重要的保护作用。雌激素能改善因雌激素缺乏引起的更年期症状、认知功能减退、痴呆等,其作用机制主要通过雌激素受体途径介导。对绝经后妇女进行雌激素替代治疗是促进老年妇女健康的重要措施,但是由此引起的子宫、乳房肿瘤等副作用是潜在的障碍,选择性雌激素替代治疗可能是一种较理想的方法。 相似文献
107.
目的:建立单细胞扩增前引物延伸法及巢式PCR技术,研究该技术在杜氏肌营养不良症植入前遗传学诊断中的可行性。方法:获取单个正常男女淋巴细胞和无杜氏肌营养不良(DMD)家族史的单个卵裂球,15碱基随机引物PEP扩增单细胞全基因组,再以巢式PCR技术检测PEP反应产物中DMD基因外显子8,17,19,44,45,48及Y染色体上的睾丸决定基因SRY。结果:单个淋巴细胞和单个卵裂球的6个DMD外显子扩增成功率分别为97.2%(175/180)和100%(60/60),单个男性淋巴细胞SRY的扩增成功率为100%(15/15),而单个女性淋巴细胞无SRY的扩增(0/15)。结论:检测单细胞DMD基因外显子8,17,19,44,45,48和SRY的PEP-巢式PCR技术具有较高扩增成功率和特异性,可望应用于 DMD的植入前遗传学诊断的单细胞基因诊断中。 相似文献
108.
简并寡核苷酸引物聚合酶链反应扩增单细胞全基因组均匀性研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 探讨单细胞简并寡核苷酸引物聚合酶链反应 (DOP PCR)扩增全基因组DNA的均匀性及植入前胚胎遗传学研究的新途径。方法 获取正常男女性、X单体、X、13和 2 1三体细胞 ,行单细胞DOP PCR ,通过比较基因组杂交 (CGH )双色荧光强度比变化 ,分析扩增均匀性。结果 (1)DOP PCR产物 /正常男性基因组DNACGH :约 1/ 3常染色质区强度比均数及标准差超过正常允许范围 ,X染色体假性过度表达 ,13、2 1三体无明显变化。 (2 )DOP PCR产物 /正常男性单细胞DOP PCR产物CGH :94%强度比均数及标准差接近期望值 ,能显示正常男女性、X单体、X、13和 2 1三体染色体拷贝数变化。结论 单细胞DOP PCR扩增基因组DNA存在明显的不均匀性 ,但这种不均匀扩增是非随机的。如选择合适的参照 ,扩增产物可用于植入前胚胎等单细胞全基因组研究。 相似文献
109.
目的探讨多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)患者血清及卵泡液氧化应激水平与卵子及胚胎质量的关系。方法采用前瞻性随访研究分析2019年1月至2020年10月期间在浙江省人民医院生殖医学中心行体外受精治疗的67例PCOS患者(PCOS组)和66例单纯输卵管因素行体外受精的患者(对照组)的临床资料。采集患者取卵日血清及直径大于18 mm卵泡的卵泡液。比色法检测总抗氧化能力(total antioxidant capacity, TAC)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和丙二醛(malondialdehyde, MDA)水平, 分析氧化应激指标与卵子质量、胚胎培养结局和移植后临床结局的相关性。结果 PCOS组血清SOD水平[(22.11±3.70)U/mL)]显著低于对照组[(25.70±3.32)U/mL, P<0.001];PCOS组的卵泡液TAC水平[(0.62±0.05)mmol/L]、MDA水平[(16.64±3.85)nmol/mL]和血清MDA水平[(18.20±4.68)nmol/mL]显著... 相似文献
110.
多精受精与体外受精-胚胎移植结局的关系 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)过程中多精受精对IVF结局的影响。方法:回顾性分析496个IVF-ET周期、5349个卵细胞的资料,比较有多精受精与无多精受精周期的获卵数、成熟卵比例、受精率、分裂率、卵裂胚胎数、妊娠率等指标。结果:有多精受精发生的周期,成熟卵比例、受精率以及分裂率分别为67%、76.7%和95.6%,均显著高于无多精受精周期(分别为60%、60.7%和88.7%),P<0.01。有多精受精的周期妊娠率略高于无多精受精周期(分别为25.7%和23.6%),但无统计学上的显著性差异(P>0.05)。结论:多精受精与卵细胞对精子的接受能力有关,预示较好的IVF结局。 相似文献