健脾解毒汤治疗脾虚湿盛证银屑病的临床研究

目的探讨健脾解毒汤治疗脾虚湿盛证银屑病的临床疗效及其部分作用机制。方法 58例辨证为脾虚湿盛证的寻常型银屑病患者,按随机数字表分为健脾解毒汤治疗组(30例)和阿维A胶囊对照组(28例),分别予以4w药物治疗,采用银屑病面积严重程度指数(Psoriasis Area and Severity Index,PASI)评分法观察其临床疗效。问卷调查皮肤病患者治疗前后的生活质量(Dermatology Life Quality Index,DLQI),并检测治疗组患者及正常对照组的肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF-α)水平变化。结果治疗组总有效率为76.67%,对照组总有效率为78.57%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者DLQI评分在用药4w后均下降(P<0.05);治疗组血清TNF-α水平较治疗前降低(P<0.05),但较正常组仍偏高。结论健脾解毒汤能明显改善患者皮损状况和生活质量,其机制可能与下调患者血清TNF-α水平调节免疫、改善炎症有关。     

急性心肌梗死患者直接经皮冠状动脉内介入治疗术后脑钠素的变化

血浆脑钠素浓度的测定在心力衰竭的鉴别诊断、预测恢复期心力衰竭的发生和长期预后以及用来指导目前心力衰竭的经验治疗等方面已令人瞩目，本研究通过对急性心肌梗死的冠心病患者入院后直接行经皮冠状动脉内介入治疗术（Percutaneous coronary interventions，PCI）后血浆脑钠素（Brain natriureticpeptide，BNP）水平的动态变化与未行PCI治疗的急性心肌梗死患者血浆脑钠素（BNP）水平的比较，     

共同养育在婚姻质量与母亲焦虑之间的调节作用

目的考察儿童母亲焦虑状况及影响因素,探讨婚姻质量与母亲焦虑的关系,以及共同养育在其中的调节作用。方法采用广泛性焦虑量表、婚姻调适问卷以及共同养育关系量表对522名孩子年龄0~12岁的母亲进行问卷调查,通过SPSS 20.0软件进行χ2检验、Spearman相关分析、非参数百分位Bootstrap法进行数据分析处理。结果(1)本研究中有48.7%的母亲存在不同程度的焦虑,其中轻度焦虑占37.4%,中度焦虑占8.4%,重度焦虑占2.9%;(2)χ2检验结果显示,母亲焦虑状况在母亲年龄、母亲工作压力、经济压力、父亲工作压力、子女年龄,子女健康状况、祖辈与父辈冲突、祖辈参与养育意愿等方面差异有统计学意义(χ^2=4.292~23.170,均P<0.05);(3)母亲焦虑与婚姻质量呈显著负相关(r=-0.419,P<0.01);(4)父亲积极共同养育和消极共同养育均对婚姻质量与母亲焦虑的关系有显著的调节作用(B积极共同养育=0.013,P<0.01;B消极共同养育=-0.010,P<0.05),J-N法简单斜率检验显示,简单斜率95%的Bootstrap置信区间不包含0。结论婚姻质量是影响母亲焦虑的重要因素,父亲在共同养育中的表现在其中起一定的调节作用。     

超纯透析对维持性血液透析患者氧化应激和血清C-反应蛋白水平的影响

目的 探讨超纯透析对维持性血液透析患者氧化应激及炎症状态的影响.方法 对26例符合条件的透析患者采用重复测量自身对照的方法,测定普通透析、超纯透析6个月及超纯透析12个月时的透前血中髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、白蛋白(ALB)、C-反应蛋白的水平.结果 超纯透析12月时MPO、MDA较普通透析时下降(P均＜0.05),ALB上升(P＜0.05),C-反应蛋白降低(P＜0.05).超纯透析6个月、12个月MPO、MDA较普通透析逐渐下降(P均＜0.05);超纯透析6个月、12个月ALB较普通透析时逐渐上升(P＜0.05).结论 超纯透析可以明显改善血液透析患者的全身状况,其机制之一可能是通过降低透析液内的内毒素来改善透析患者体内的氧化应激水平、炎症状态来实现的.     

T淋巴细胞亚群、淋巴细胞和C-反应蛋白在急、慢性布鲁杆菌病诊断中的意义

目的 探讨T淋巴细胞亚群、淋巴细胞和C-反应蛋白在急、慢性布鲁杆菌病(布病)中的变化,为 辅助诊断布病和急、慢性布病鉴别提供参考.方法 35例急性布病(急性组)、62例慢性布病(慢性组)患者及30例健康体检人群(对照组)血样标本来自于黑龙江省农垦总局总医院检验科.采用细胞流术法和速率散射比浊法分别测定T淋巴细胞亚群(CD3+、CD19+、CD3+/CD4+、CD3+/CD8+)、淋巴细胞和C-反应蛋白.结果 与对照组比较,急、慢性组CD3+升高(％:74.71±6.79、70.61±8.99比65.00±7.50;F=12.40,P＜ 0.05),其中急性组高于慢性组(P＜0.05);CD19+、CD3+/CD4+降低(％:7.79±3.93、9.94±4.53比11.50±3.25;30.56±6.38、35.56±8.22比39.00±4.00;F值分别为18.62、13.03,P均＜0.05),其中急性组低于慢性组(P均＜0.05);CD3+/CD8+急性组高于对照组和慢性组(％:34.06±835比29.50±7.25、28.72±8.30;F=12.06,P＜0.05).急、慢性组淋巴细胞高于对照组(％:34.29±10.91、39.12±12.08比30.84±6.45;F=13.78,P＜0.05),但急性组低于慢性组(P＜0.05).与对照比较,急、慢性组C-反应蛋白明显升高(mg/L:27.43、15.87比0.60;H=19.42,P＜0.05),其中急性组高于慢性组(P＜0.05);C-反应蛋白阳性率组间比较差异有统计学意义(x2=9.94,P＜0.01),与对照组比较,急、慢性组C-反应蛋白阳性率升高(65.7％、61.3％比3.3％,x2值分别为27.54、23.16,P均＜0.01).结论 急、慢性布病患者T淋巴细胞亚群、淋巴细胞和C-反应蛋白均发生不同的改变,在辅助诊断布病和急、慢性布病的鉴别诊断与治疗中有一定的参考意义.     

镧对内毒素/脂多糖诱导的巨噬细胞核因子KB活化的抑制作用

目的了解稀土元素镧对内毒素/脂多糖(LPS)诱导的小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)核因子κB(NF-κB)活化的影响,并探讨其机制。方法分离培养小鼠腹腔 Mφ,分为:空白对照组,无刺激因素;LPS 组,用1μg/ml LPS 刺激30 min;镧离子(La~(3 ))组,用2.5 μmol/L La~(3 )刺激30 min;La~(3 ) LPS 组,先后用2.5μmol/L La~(3 )、1μg/mI LPS 各刺激30 min;La~(3 )/LPS 组,2.5μmol/L La~(3 )刺激30 min 后,洗涤细胞,再加入1μg/ml LPS 刺激30 min。采用细胞免疫荧光染色法观察 NF-κB在各组细胞中的分布与表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)法捡测胞核中 NF-κB/p65蛋白活性;蛋白质印迹法检测细胞核内 NF-κB/p65蛋白及胞质中核因子抑制蛋白α(IκBα)的表达量。ELISA 法测定各组细胞培养上清液中肿瘤坏死冈子α(TNF-α)的含量。结果 (1)免疫荧光染色显示,空白对照组、La~(3 )组、La~(3 ) LPS 组和 La~(3 )/LPS 组 Mφ绿色荧光多分布于胞质,胞核荧光强度分别为42±7、73±30、48±11和67±19;LPS 组绿色荧光集中于胞核,荧光强度为116±14,明显高于其余4组(P<0.01)。(2)胞核 NF-κB/p65蛋白活性:LPS 组吸光度值为0.435±0.066.与空白对照组(0.048±0.027)、La~(3 )组(0.062±0.049)、La~(3 ) LPS 组(0.066±0.031)、La~(3 )/LPS 组(0.108±0.017)比较,明显偏高(P<0.01)。(3)LPS 组 Mφ胞核 NF-κB/p65蛋白表达水平明显高于其余4组,胞质 IκBα蛋白表达水平明显低于其余4组。(4)TNF-α含量:La~(3 )组培养上清液中 TNF-α含量低于试剂盒检测下限(25 pg/ml)及空白对照组(P<0.05),La~(3 ) LPS 组和 La~(3 )/LPS 组低于 LPS 组(P<0.01),但高于空白对照组。结论 LPS 可激活小鼠腹腔 MφNF-κB/p65核移位,并使胞核中 NF-κB/p65的表达量和活性升高、胞质 IκBα蛋白表达下调,导致 TNF-α分泌增多。镧可抑制上述效应。     

氯化镧阻断LPS诱导巨噬细胞钙信号通路激活及TNF-α释放

目的探讨氯化镧（LaCl3）对脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）诱导巨噬细胞钙信号通路激活及肿瘤坏死因子α（TNF-α）释放的影响。方法将巨噬细胞RAW 264.7随机分成四组：LPS组（培养液中含1μg/ml LPS）,LaCl3＋LPS组（以含2.5μmol/ml LaCl3的培养基孵育细胞一定时间后,再予以1μg/ml LPS刺激）,LaCl3组（培养液中含2.5μmol/ml LaCl3）及对照组（培养液中不含LaCl3和LPS）。于不同时间点分别收集各组细胞及其培养上清待测。以Fluo-3/Am加载细胞,经上述不同分组处理一定时间后,流式细胞术观察细胞内Ca2＋浓度（[Ca^2＋]i）的变化;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测上清中TNF-α水平。结果流式细胞术测定结果显示：LPS组细胞内[Ca^2＋]i为（336.67±26.16nmol/L）,与对照组比较差异显著（P〈0.01）;LaCl3＋LPS组（162.67±26.41nmol/L）显著低于LPS组（P〈0.01）;LaCl3组（29.84±6.42nmol/L）与对照组相比略低但无统计学意义（P〉0.05）。LPS组细胞培养上清TNF-α含量（152.19±15.68pg/ml）与对照组相比,显著升高（P〈0.01）;而LaCl3＋LPS组细胞培养上清中TNF-α含量为43.95±6.55 pg/ml,与LPS组相比显著下降（P〈0.01）且与对照组相比无差异;LaCl3组细胞培养上清中TNF-α含量（27.84±3.73pg/ml）与LPS组相比显著下调（P〈0.01）,并且与对照组相比亦显著下调（P〈0.05）。结论一定浓度的LaCl3可阻断LPS诱导巨噬细胞钙信号通路激活及抑制TNF-α的释放。     

人诱导性多能干细胞的培养及鉴定

目的建立稳定的人诱导性多能干细胞（iPS细胞）培养体系。方法取第3．5代的小鼠胚胎成纤维细胞．丝裂霉素C处理后用作饲养层。人iPS细胞接种于饲养层上生长,胶原酶消化或机械法传代。倒置显微镜下观察iPS细胞生长状态：观察拟胚体形成能力;RT—PCR检测iPS细胞多能性基因的表达情况。结果（1）小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）为贴壁生长细胞,呈梭形或多角形。细胞增殖旺盛。（2）生长在饲养层上的人iPS细胞呈典型的克隆状生长。克隆呈圆形或椭圆形．边界清晰。克隆内细胞排列紧密,细胞体积小,核大,细胞核／质比高。RT—PCR结果显示人iPS细胞强表达多能性基因Oct4,Nanog,Sox2;去除饲养层后悬浮培养能形成拟胚体（EB）。结论本实验的培养体系适合人iPS细胞的培养,人iPS细胞能稳定增殖,保持自我更新及分化潜能。     

miRNA－92a在缺血再灌注肾损伤中的表达变化

目的观察miRNA-92a在缺血再灌注（I／R）损伤4h、24h后小鼠肾组织的表达变化,探讨肾脏缺血损伤后血管生成的可能机制。方法采用双侧夹闭小鼠肾蒂的方法制备急性缺血再灌注肾损伤模型,术后灌注24h后收集血清和。肾脏标本,分别检测肾功能及观察肾组织病理学改变。实时定量逆转录聚合酶链反应（real—time RT-PCR）的方法检测小鼠I／R损伤4h和24h组中miRNA-92a的表达水平。结果（1）采用血清肌酐（Scr）和尿素氮（UN）评估肾功能,肾脏I／R 24h组与假手术组（sham）比较有显著性差异（P〈0．05）;HE染色观察肾组织病理改变明显,肾缺血再灌注模型成功。（2）而I／R4h和24h后,miRNA-92a的表达上调,其上调倍数分别为3．23±0．74．1．53±0．33（P〈0．05）。结论小鼠I／R损伤中miRNA-92a表达显著上调,miRNA-92a可能参与缺血再灌注肾组织损伤的血管再生的调控过程。     

联合进口与国产试剂检测献血者抗-HCV的必要性分析

目的　探讨5种不同厂家酶免疫试剂的灵敏度和联合应用的必要性。方法　将2 0份抗 HCV阳性标本按1∶10 0～1∶15 0 0不同倍数进行稀释,用5种进口与国产酶免疫试剂检测不同稀释倍数抗 HCV阳性标本。结果　2 0份阳性标本经5种不同厂家试剂检测,结果均为阳性,无一漏检。随着2 0份血样稀释倍数增加,阳性标本检出数和检出阳性标本的试剂数逐渐减少,当稀释倍数达到1∶110 0～1∶130 0时,国产与进口试剂在灵敏度上的差异有显著性(P <0 .0 1)。结论　献血者初复检宜分别选用灵敏度不同的国产和进口试剂联合检测,以确保检测结果的可靠性。