弥散黏附性大肠埃希菌多重PCR检测方法的建立及其在感染性腹泻患者中的流行情况

目的 建立一种快速检测弥散黏附性大肠埃希菌（DAEC）的普通多重PCR方法,了解DAEC在腹泻患者中的流行情况。方法 根据DAEC黏附基因afaB、afaC、afaD、daaE及16S rRNA基因rrs,建立4重PCR反应体系,对PCR引物、反应体系和反应条件进行优化,评价敏感性和特异性,并应用于389份腹泻患者粪便标本的筛查。结果 4重PCR反应可以特异性扩增DAEC菌株afaB/C、afaD、daaE基因片段,除2株肠集聚性大肠埃希菌（EAEC）外,检测引物对其他致泻性大肠埃希菌及常见肠道病原菌均无特异性扩增,此多重PCR方法的检测下限可达3.20 101 CFU/反应（8.01 103 CFU/ml）。利用本研究建立的多重PCR方法对腹泻患者粪便标本进行检测,发现DAEC菌株分离率为6.2%（24/389）。结论 本研究建立的多重PCR方法可用于DAEC菌株的快速鉴别,也可用于人粪便标本DAEC的初步筛查。     

胃癌根治术后早期营养支持对患者恢复的影响

胃癌患者因进食量不足和肿瘤本身的消耗,常出现营养不良和免疫功能下降。据报道,约50％的恶性肿瘤患者均存在营养不良。改善营养对促进胃癌术后患者机体的恢复具有重要意义。本文对胃癌患者根治术后早期肠内营养支持（EEN）与肠外营养支持（PN）二种方式作一比较。结果报告如下。     

2005-2011年河南省小肠结肠炎耶尔森菌分布状况

目的 了解2005-2011年河南省小肠结肠炎耶尔森菌分布情况.方法 于2005-2011年在监测点郑州、睢县和登封采集腹泻患者粪便标本,各种家禽家畜的粪便标本,苍蝇,以及生、熟肉制品涂抹标本,共6700份.采用冷增菌方法进行目的菌分离.对不同宿主样品中分离到的小肠结肠炎耶尔森菌进行系统生化鉴定、血清学分型、生物分型和毒力基因PCR检测.结果 从11种常见宿主和食品中共分离到216株小肠结肠炎耶尔森菌,29.6％ (64/216)分离自猪.所分离的小肠结肠炎耶尔森菌主要流行的血清型是0∶5和0∶8,所占比例分别为23.2％(50/216)和20.4％(44/216);生物分型以1A型为主,占84.7％ (183/216);不同宿主的优势血清型及生物分型各不相同;猪分离株中致病性菌株最多,为16株,其次是腹泻患者和犬分离株,均为6株.结论 河南省小肠结肠炎耶尔森菌宿主分布广泛,猪是主要宿主.     

水仙环素通过调控PLK1/AKT信号通路诱导三阴性乳腺癌细胞细胞周期阻滞和凋亡

摘 要：目的 研究水仙环素（Narciclasine，Nas）对人三阴性乳腺癌（Triple negative breast cancer，TNBC）细胞周期和凋亡的抑制作用及分子机制。方法 采用细胞增殖-毒性检测试剂盒（Cell Counting Kit-8，CCK-8）、克隆形成、Transwell、流式细胞术等实验分析Nas对TNBC细胞株MDA-MB-231细胞增殖和侵袭能力的抑制作用，及对细胞周期和凋亡的诱导作用；利用免疫印迹（Western blot，WB）实验分析Nas对MDA-MB-231细胞株cle-Caspase-3、PARP、cle-PARP、PLK1、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、CDK1、Cyclin B、Cyclin A、p-21、p-27、p-62、LC3、γ-H2AX等蛋白质的影响。结果 不同浓度的Nas（浓度分别为0.5 μmol/L、1.0 μmol/L、2.0 μmol/L）能抑制MDA-MB-231细胞株的克隆形成（48 h抑制率分别为15.99%、24.76%和54.17%）、侵袭能力（48h抑制率分别为0.68%、23.20%和45.27%），可将细胞周期阻滞于G2期（48 h阻滞率分别为75.50%、140.56%和316.06%），可对细胞凋亡起到诱导作用（48 h凋亡诱导率分别为105.39%、199.73%和375.74%；72 h凋亡诱导率分别为104.45%、244.96%和709.60%）。分子机制实验显示Nas可以显著促进cle-Caspase-3、cle-PARP、γ-H2AX、p-21及p-27等蛋白质的表达，显著抑制PLK1、p-PI3K、p-AKT、CDK1、Cyclin B等蛋白质的表达水平，而对PARP、p-62、LC3-II/I、PI3K、Cyclin A等蛋白质的表达水平影响不明显。结 论 Nas能抑制MDA-MB-231细胞株的克隆形成、侵袭能力，对凋亡起到诱导作用，并将细胞周期阻滞于G2期，该机制可能通过调节PLK1/AKT信号通路来实现。     

中华按蚊在低微丝蚴率、低密度地区传播马来丝虫病的研究

在经防治后以中华接蚊为媒介的低微丝蚴率和低密度的马来丝虫病流行区的三个村．进行了丝虫病传播状况观察。观察期间，每年对试点村人群进行血检．检出的微丝蚴血症者仅用维生素Ｃ安慰治疗，同时收集蚊媒各项有关参数，计算年叮人率和年传播潜势。结果显示：微丝蚴率低于１．５５％、微丝蚴密度小于１５条／１２μｌ，不再采取任何防治措施、丝虫病传播已停止；微丝蚴率为２．３１％，微丝蚴密度大于２２条／１２０μｌ时，其微丝蚴率仍在原水平徘徊。     

气相色谱法测定面粉中过氧化苯甲酰含量的方法探讨

过氧化苯甲酰(BPO)被广泛应用于面粉改良剂中,它能在短时间内增加白度,改善面粉品质,提高面粉质量等级,但加入过量的过氧化苯甲酰影响面制品的口感,直接导致面粉中B族维生素的大量破坏,从而降低其营养价值,同时,过氧化苯甲酰遇热不稳定或还原性物质分解为苯甲酸,长期摄入对人体造成一定的危害。因此,GB2760-1996规定面粉中BPO限定使用量为0.06 g/kg,准确测定过氧化苯甲酰含量十分必要。测定BPO一般采用高效液相色谱和气相色谱法,由于基层设备条件所限多采用气相色谱法,本文就是采用GB/T1239-2001气相色谱法(二)测定,此法样品的前处理…     

河南省睢县农村家庭自备井生活饮用水水质检测结果分析

目的:了解睢县农村生活饮用水水质卫生状况.方法:2007年对来自本县农村102份家庭自备井水样按照新的<生活饮用水标准检验方法))GB/T5750.6-2006进行检测.结果:102份农村家庭自备井水样中存在的问题是:总硬度、菌落总数、大肠菌群、氟化物、锰、溶解性总固体合格率较低,合格率分别为:47%、65.6%、79.4%、81.4%、87.3%、49%.结论:睢县农村家庭自备井生活饮用水需要尽快加强改进和监督检测.     

2011年睢县农村家庭自备井生活饮用水水质检测分析

目的了解睢县农村生活饮用水水质卫生状况。方法2011年6月对来自本县农村113份家庭自备井水样按照GB/T5750-2006进行检测。结果113份农村家庭自备井水样中存在的问题是总硬度、菌落总数、大肠菌群、氟化物、锰、溶解性总固体合格率较低,合格率分别为:49.60%、67.30%、90.30%、80.50%、85.00%、50.40%。结论睢县农村家庭自备井生活饮用水需要尽快加强改进和监督检测。     

乳腺癌非特异性免疫治疗研究进展

乳腺癌是全世界女性发病率最高的恶性肿瘤之一,尽管在经过手术、化疗、放疗、内分泌药物及分子靶向药物等系统治疗后大部分患者能长期生存,甚至治愈,但仍有30%~40%的患者可能复发转移。近年来,晚期乳腺癌的综合治疗取得了长足的进步,主要是由于一系列新药的诞生,特别是内分泌和靶向治疗药物,其中免疫检查点抑制剂开启了全新的抗肿瘤治疗模式,被认为是十分有效而免疫相关不良反应最小的免疫治疗方法,已经成为国内外肿瘤治疗领域中颇具研究前景的方向之一。     

雷公藤甲素促进三阴性乳腺癌细胞凋亡的机制研究

目的研究雷公藤甲素（Tpl）对人三阴性乳腺癌（TNBC）细胞凋亡的促进作用及可能的分子机制。方法体外培养TNBC细胞株MDA-MB-453细胞并分为4组,对照组正常培养,Tpl低、中、高剂量组分别添加10、20和40nmol/L的Tpl;MDA-MB-453细胞分别转染胎盘特异性8基因（PLAC8）过表达质粒和空载体质粒,添加或不添加20nmol/L处理,分别记作过表达组、过表达+Tpl组、空载组、空载+Tpl组。采用细胞增殖和毒性检验（CCK-8）法检测细胞增殖能力,采用克隆形成实验分析克隆形成能力,采用Transwell实验分析细胞迁移能力;应用流式细胞术检测细胞凋亡情况;利用Westernblot法分析切割型半胱氨酸蛋白酶（Cle-Cas-pase）-3、Cle-Caspase-9、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、PLAC8、Wnt3a及β-连环蛋白（β-catenin）相对表达量。结果与对照组比较,低、中、高剂量组细胞克隆形成率及迁移率均降低,凋亡率均升高,Cle-Caspase-3、Cle-Caspase-9、Bax蛋白相对表达量均升高,Bcl-2、Wnt3a、β-catenin、PLAC8蛋白相对表达量均下降（均P＜0.05）。与空载组比较,空载+Tpl组的上述指标表达趋势一致,过表达组上述指标表达均相反（均P＜0.05）。与过表达组比较,过表达+Tpl组各指标差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论Tpl能促进MDA-MB-453细胞株凋亡,该机制可能与PLAC8介导的Wnt/β-catenin信号通路有关。