细胞穿透肽核靶向运输蛋白表达载体的构建及其蛋白转导功能的研究

目的 构建基于细胞穿透肽靶向细胞核运输的蛋白表达载体，并研究其蛋白转导功能。方法 在带His标记的增强型绿色荧光蛋白（EGFP）表达载体pET14b—HE（pET14b-His-EGFP）基础上，利用点突变的方法构建依次含细胞穿透肽（CPP）、连接子、核定位信号（NLS）序列和EGFP的融合蛋白表达载体pET14b—HC（L）NE（pET14b—His—CPP—Linker-NLS—EGFP）；经酶切、测序鉴定载体构建正确后，将重组质粒转化BL21（DE3）宿主菌，经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导表达后、用Ni^2＋亲和层析纯化得到融合蛋白：将融合蛋白透析、过滤除菌后加入培养的真核细胞中，荧光显微镜下观察并进行Western blot检测分析其在活细胞的蛋白转导功能。结果 酶切、测序证实载体构建成功，融合蛋白在大肠杆菌中可有效表达：蛋白转导实验可见融合蛋白可快速穿透细胞膜并进入细胞核，并且这种内化转导功能存在时间和剂量依赖效应。结论 成功构建了基于细胞穿透肽的蛋白表达运输载体，建立了可携带外源蛋白进入细胞浆及细胞核的运输系统，为研究蛋白或多肽的细胞内功能以及运输药物提供了一种经济有效的工具。     

中-重度阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的危险因素分析

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(Obstrucve sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS)是指睡眠时上气道塌陷阻塞引起的呼吸暂停和通气不足,伴有打鼾、睡眠结构紊乱、频繁发生血氧饱和度下降、白天嗜睡等症状.患者常有睡眠时打鼾、呼吸暂停或憋醒,晨起头昏、头痛、嗜睡、疲劳、记忆力减退等临床表现.中重度OSAHS除改善生活方式外,需要积极进行治疗已受到高度重视.本文旨在通过了解中重度阻塞性OSAHS的相关危险因素,提高对中重度OSAHS的认识.     

先天性心脏病并心力衰竭患儿血浆肾上腺髓质素和内皮素水平变化的意义

目的探讨左向右分流先天性心脏病(CHD)患儿并充血性心力衰竭(CHF)血浆肾上腺髓质素(ADM)和内皮素(ET-1)变化的意义。方法左向右分流CHD并CHF患儿18例。正常对照组20例,检测CHD患儿心力衰竭期和症状、心衰体征消失的恢复期及对照组儿童血浆ADM和ET-1。结果CHF急性期ADM、ET-1明显高于恢复期和正常对照,恢复期ADM或ET-1仍高于正常对照组(P<0.01或0.02)。结论ADM和ET-1均参与了左向右分流CHD并CHF的病理生理过程,观察其血浆水平变化,可能对判断心衰患者病情有一定意义。     

宫颈癌宫旁残留两种后程加量方式剂量学比较

目的 对三维宫旁插植后装放疗与体外调强放射治疗在宫颈癌放疗后宫旁残留后程加量中对靶区、膀胱、乙状结肠及直肠的剂量学对比研究.方法 12例局部晚期宫颈癌在完成全部放疗后宫旁残留进行宫旁后程加量,用ONCENTRA治疗系统分别设计三维后装放疗计划及体外调强放射治疗计划.利用体积直方图分别评价膀胱、直肠、乙状结肠的受照剂量;比较两组间膀胱、直肠、乙状结肠受照剂量的差别.结果 两种放疗方法均能很好覆盖靶区,满足计划要求,三维插植后装放疗直肠剂量在1 cm3、2 cm3、5 cm3时分别为(3.24±1.21)Gy、(2.98±1.01)Gy、(2.43±0.87)Gy,膀胱平均剂量在1 cm3、2 cm3、5 cm3时分别为(2.04±0.58)Gy、(1.82±0.56)Gy、(1.46±0.32)Gy,乙状结肠平均剂量在1 cm3、2 cm3、5 cm3时分别为(1.37±0.61)Gy、(0.91±0.24)Gy、(0.76±0.19)Gy.体外调强放射治疗直肠剂量在1 cm3、2 cm3、5 cm3时分别为(4.84±1.34)Gy、(4.32±1.12)Gy、(3.76±1.01)Gy,膀胱剂量在1 cm3、2 cm3、5 cm3时分别为(3.43±1.12)Gy、(3.10±1.02)Gy、(2.69±1.01)Gy,乙状结肠平均剂量在1 cm3、2 cm3、5 cm3时分别为(2.37±0.98)Gy、(2.05±0.78)Gy、(1.77±0.88)Gy.与体外调强放疗计划对后程加量中相比,三维宫旁插植后装放疗对直肠、乙状结肠、直肠的剂量更低,存在统计学差异(P<0.01).结论 CT图像引导下三维宫旁插植后装放疗在宫旁残留后程加量中对膀胱、乙状结肠及直肠的保护更好,将能降低膀胱、乙状结肠、直肠并发症出现概率.     

银杏叶制剂的临床新用途

银杏叶为银杏科植物银杏的叶，现代药理研究表明，银杏叶提取物中含有银杏黄酮苷、银杏内酯和白果内酯等多种活性成分,有抗自由基、抗血小板活性、降低血液粘度等多种药理作用。目前广泛用于治疗心脑血管疾病。现将近年来其在临床上的其他用途总结如下。     

不同程度老年COPD患者6分钟步行试验结果分析

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一种以气流受限为特征的肺部疾病,气流受限不完全可逆,呈进行性发展。COPD是呼吸系统疾病中的常见病和多发病,具有高患病率、高致残率和高死亡率。世界卫生组织(WHO)资料显示,COPD的死亡率居全球死因的第4位,且有逐年增加趋势,预计到2020年,COPD将成为全球第5大疾病,第3大死因[1]。目前COPD的     

重组腺病毒驱动KDR-CDglyTK融合基因系统对MCF-7细胞及血管内皮细胞的靶向杀伤作用

目的探讨腺病毒介导血管内皮生长因子受体(KDR)启动子驱动的CDglyTK融合基因体系对人乳腺癌细胞株MCF-7及血管内皮细胞(ECV304)选择性杀伤作用。方法将质粒pAdEasy-KDR-CDglyTK在293细胞内包装、扩增后,体外感染表达KDR的MCF-7、ECV304细胞株和对照组不表达KDR的LS174T细胞株,并给予不同浓度的前药5-FC和/或GCV,观察该体系对不同细胞株的杀伤效应及其旁观者效应。并通过流式细胞仪检测前药对瘤细胞周期的影响。结果所得病毒滴度为2.0×1012pfu/ml。3种细胞的感染率相似,其感染率随腺病毒滴度的递增而增加,当感染复数(MOI)为200时,所有细胞株均达约100%感染。以MOI为100的重组体分别感染各细胞株表现出对前药的不同敏感性:表达KDR的MCF-7细胞和ECV304细胞对前药具有较高的敏感性,二者敏感性差异无显著性意义(P=1.00);与前2者相比,不表达KDR的LS174T细胞对前药不敏感(P<0.001)。CDglyTK融合基因的疗效优于任一单自杀基因(P<0.001)。将感染腺病毒的细胞与未感染细胞以不同混合培养,观察到该体系明显的旁观者效应。流式细胞术检测表明该体系抑制MCF-7细胞DNA的合成,表现为G1期细胞比率增多及S期细胞减少(P<0.001)。结论KDR基因启动子调控的CDglyTK融合基因体系可选择性杀伤乳腺癌MCF-7细胞及血管内皮细胞。     

创伤性膈疝18例误诊分析

创伤性膈疝(traumatic d iaphragmatic hernia,TDH)多合并其他复合伤,伤情隐蔽和复杂,早期诊断较困难,严重的膈疝易发生嵌顿、坏死等严重后果[1]。我院1988年4月~2005年12月收治创伤性膈疝42例,术前经X线胸、腹部透视和CT检查明确诊断24例(57·14%),误诊18例(42·86%),均经手术     

三维插植后装放疗在放疗期间宫颈局部肿瘤退缩欠佳宫颈癌中的应用

目的 探讨宫颈癌放疗中宫颈局部肿瘤退缩欠佳的危险因素及三维插植后装放疗在该部分患者中的应用。方法 选取福建省肿瘤医院妇科肿瘤放疗科2017年10月至2018年11月收治的251例宫颈癌根治性调强放疗患者,分析宫颈局部肿瘤退缩欠佳的危险因素,建立风险模型,并在腔内后装放疗A点累积量1 400 cGy/次和(或)2 100 cGy/3次时,对妇检、影像学提示宫颈局部肿瘤退缩不满意的宫颈癌患者第3次和(或)4次腔内后装放疗行三维插植后装放疗。结果 251例根治性调强放疗的宫颈癌患者中,45例(17.9%)宫颈局部肿瘤退缩不满意,其独立危险因素主要为感染、贫血、肿瘤直径。经过三维插植后装放疗,45例宫颈局部肿瘤退缩欠佳患者中,36例获得完全缓解、9例获得部分缓解,有效率为80.0%。所有患者治疗顺利,可耐受治疗。列线图建立风险预测模型显示,64分为欠佳评分的临界值,评分>64分可以预测为欠佳。结论 建立风险预测模型,及时筛选出放疗期间宫颈局部肿瘤退缩欠佳的宫颈癌患者,并予三维插植后装放疗,可最大程度提高疾病局部控制率,提高治疗效果。     

内服外治法治疗小儿急性肺炎85例

目的观察内服外治法治疗小儿急性肺炎的临床疗效。方法采用随机对照、双盲法,将166例急性肺炎患儿随机分为治疗组（85例）和对照组（81例）。治疗组予西医基础治疗加中药内服及敷胸膏外敷,对照组予西医基础治疗加内服、外敷安慰剂,观察各组疾病疗效和中医证候疗效。结果普通肺炎治疗组总体疗效和中医证候疗效愈显率分别为83.33%、87.5%,对照组分别为65.22%、69.57%,两组比较,差异均具有统计学意义（P〈0.05）;支原体肺炎治疗组总体疗效和中医证候疗效的愈显率分别为81.08%、83.78%,对照组分别是60.00%、62.86%,两组比较,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。结论内服外治法治疗小儿急性肺炎具有良好的临床疗效。