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目的对云南地区3049名育龄人群进行脊髓性肌萎缩症(spinal muscular atrophy,SMA)的携带者筛查,探讨本地区人群运动神经元存活基因(survival motor neuron,SMN)的拷贝数情况及携带频率。方法应用多重连接探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)对SMN1及SMN2基因第7外显子的拷贝数进行检测,筛查出SMN1基因第7外显子拷贝数为1的SMA携带者。对双方均为携带者的夫妇提供产前诊断。结果在3049名育龄人群中,共检测出SMA携带者62例,携带率为1/49(2.03%)。男性携带率为1.91%(40/2094),女性携带率为2.30%(22/955),二者的差异无统计学意义(P>0.05)。SMN1杂合缺失占1.30%(41/3049),由SMN1转换为SMN2者占0.69%(21/3049)。SMN1等位基因的平均拷贝数为1.99。检出双方均为SMA携带者的夫妇2对,通过产前诊断避免了1例患病胎儿的出生。结论云南地区SMA男女携带者的频率无显著差异,符合常染色体隐性遗传模式。阐明SMA携带者的频率和SMN基因的拷贝数情况,可为遗传咨询和产前预防提供依据。 相似文献
233.
目的通过频域光相干断层扫描(SD-OCT)观察光感受器内外节在特发性黄斑裂孔手术前后的变化。方法前瞻性对比分析23例(25只眼)确诊并接受玻璃体手术治疗的特发性黄斑裂孔患者的临床资料,采用Topcon公司Version 3.21型频域OCT测量并对比分析手术前后水平方向上光感受器内外节缺失区直径(diameter of IS/OS absence,DIOA)的变化。结果手术后有18只眼黄斑裂孔闭合,裂孔封闭率为72%。术前DIOA为(551~2900)μm,平均(1933.16±650.80)μm;术后12月DIOA为(412~2811)μm,平均(1329.20±780.13)μm。经配对样本的t检验,术前DIOA与术后DIOA之间不存在相关关系(r=0.37,P=0.069),手术前后差异有显著性意义(t=3.73,P=0.001)。结论频域OCT能清晰观察视网膜IS/OS层的结构,特发性黄斑裂孔患者术后水平方向上光感受器内外节缺失区直径较术前明显减少。 相似文献
234.
235.
重叠延伸PCR法克隆重组复合干扰素 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:用重叠延伸PCR(overlap extension PCR)法获得人工优化的干扰素.重组复合干扰素(consensus interferon,clFN)基因,用原核表达系统对其进行表达,鉴定表达的clFN活性.方法:根据大肠杆茵的偏爱密码子,人工设计cIFN的高表达基因,用overlap PCR法合成cIFN全基因.用基因重组技术构建其原核表达载体pRA-cIFN,在大肠杆茵BL21中进行高效表达,用SDS-PAGE和Western blotting鉴定cIFN表达,用GuHC1阶段透析法进行蛋白变性、复性,用TALON(His)6亲和层析柱进行纯化.用EUSA、MTS比色定量法及血凝抑制试验检测cIFN的免疫活性和生物活性.结果:成功合成了cIFN全基因,其DNA长度与理论长度534 bp相符;用基因重组技术成功构建了cIFN原核表达栽体pRA.cIFN,并用大肠杆茵BL21进行了高效表达,SDS.PAGE和western blotting鉴定结果显示,表达蛋白主要以包涵体形式存在,其分子质量符合理论值23.3 kDa:用GuHCl阶段透析法成功进行包涵体蛋白的复性.亲和层析法纯化后cIFN的ELISA、MTS比色定量法及血凝抑制试验结果显示,表达蛋白具有明显的cIFN免疫学活性、剂量依赖性PLC/PRF/5细胞增殖抑制作用和HBsAg分泌抑制作用.结论:重叠延伸PCR法是获得重组复合基因的有效简便的方法,我们通过重叠延伸PCR法获得并表达的cIFN具有明显的抗病毒、抗细胞增殖活性. 相似文献
236.
目的 获得保留Ov-ASP-1佐剂活性的功能区。方法 用前期制备的Ov-ASP-1单克隆抗体对Ov-ASP-1的9个肽进行特异性结合,根据肽的结合情况设计功能区ASPPRM,并进行密码子优化、构建原核表达载体后在大肠杆菌中表达。表达产物经 Western印迹鉴定后的用镍柱纯化蛋白,复性完全后对获得的ASPPRM活性蛋白进行生物学特性分析。结果 ASPPRM以包涵体形式表达,分子量为17 kD。将其和OVA共同免疫小鼠后ASPPRM组抗OVA的IgG抗体显著高于OVA组。结论 本研究获得了保留佐剂活性的ASPPRM蛋白,为后续ASPPRM体内的免疫增效作用及Ov-ASP-1佐剂活性功能域的探索奠定基础。 相似文献
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目的 检测奥曲肽和雷替曲塞不同药物及浓度作用下胃癌细胞株SGC-7901表达VEGF-C阳性率,从细胞水平探讨联合用药对胃癌细胞的抑制作用.方法 选择胃癌细胞株SGC-7901进行常规培养、传代后,进行MTT实验,各组相应给予奥曲肽500μg/L、250 μg/L,雷替曲塞320 μg/L、160μg/L,联合用药组奥曲肽+雷替曲塞250 μg/L+ 160μg/L、125 μg/L+ 80μg/L,分别培养24 h、48 h、72 h后,测定各组细胞的抑制率并进行比较.另选择奥曲肽组500μg/L、雷替曲塞组320μg/L、联合用药组奥曲肽+雷替曲塞250 μg/L+160μg/L 3组培养48 h后,通过免疫组化方法测定各组VEGF-C的表达,用半定量法统计阳性率,进行比较.结果 奥曲肽及雷替曲塞组均随着浓度增高及作用时间的延长,对胃癌细胞抑制率逐渐增加,奥曲肽500 μg/L组作用72 h达到最大抑制率,高于250 μg/L组(P<0.05);雷替曲塞组320μg/L作用72 h达到最大抑制率,高于160μg/L组(P<0.05).联合用药奥曲肽250 μg/L+雷替曲塞160 μg/L组对胃癌细胞的抑制率均明显高于奥曲肽500 μg/L组以及雷替曲塞320μg/L组(P<0.05).免疫组化实验显示奥曲肽、雷替曲塞及联合用药组均可以抑制VEGF-C的表达,各组阳性率与对照组相比均有显著性差异(P<0.05),奥曲肽+雷替曲塞250 μg/L+ 160μg/L组VEGF-C表达阳性率为与奥曲肤500 μg/L组与雷替曲塞320 μg/L组相比有显著性差异(P均<0.05).结论 奥曲肽具有雷替曲塞的增效作用.两药联合可以明显降低VEGF-C的表达,提示在抑制胃癌细胞生长的同时还可以抑制胃癌淋巴管形成,降低胃癌细胞的浸润和转移. 相似文献
238.
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目的 分析2016-2020年许昌市学校肺结核患者和密切接触者筛查情况,为制定学校结核病防控策略提供科学依据。方法 以2016-2020年确诊的学校肺结核患者和密切接触者为研究对象,筛查方式包括:可疑症状、结核菌素(PPD)试验和(或)胸部X线检查(胸片),采用描述性分析方法,对筛查结果进行回顾性分析。结果 2016-2020年许昌市共发现学校肺结核患者427例,男女比为1.74∶1,其中,15~18岁组患者数最多,244例(57.14%);病原学阴性及无病原学结果肺结核患者332例(77.75%);发现方式以因症就诊发现为主,305例(71.43%);第二季度报告学校肺结核患者数最多,147例(34.39%)。共筛查密切接触者41 986人,PPD试验41 635人,PPD强阳性者2 567人(6.17%);胸片筛查9 484人,胸片异常59人(0.62%),通过进一步检查确诊新患者18例;2017年密切接触者PPD强阳性率(7.29%)和胸片异常率(0.99%)最高;病原学阳性患者密切接触者PPD强阳性率(6.85%)高于病原学阴性(包括无病原学结果)患者密切接触者PPD强阳性率(... 相似文献
240.
目的 分析腹膜透析患者配合应用改进型腹膜透析管路固定装置的效果。方法 选择2021年4—9月某医院肾内科的62例腹膜透析患者和20名参与临床护理的工作人员作为研究对象,按照腹膜透析时导管固定方法不同将患者分为对照组与观察组,每组31例。对照组采用常规医疗导管绑带进行导管固定,观察组采用改进型腹膜透析管路固定装置进行导管固定,两组均由同一组护理人员(20名)负责,比较两组固定效果(管路移位、意外脱管、管路折扁)、主观评分(固定舒适程度评分、卧床自由活动评分、导管自由拉扯评分、固定过程安全评分)及护理人员满意度(方便安装拆卸、减少移位风险、保证引流通畅、预防牵拉脱管)。结果 观察组管路移位、意外脱管及管路折扁的发生率均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组固定舒适程度、卧床自由活动、导管自由拉扯评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组固定过程安全评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组方便安装拆卸、减少移位风险、保证引流通畅及预防牵拉脱管的护理人员满意度均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 改进型腹膜透析管路固... 相似文献