中老年肺科疾病血栓弹力图检测分析

应用血栓弹力图检测技术对23例中老年肺科疾病患者进行了检测,并与26例正常人进行对比分析,以观察中老年肺科疾病患者血液凝固机能的改变、结果发现本组52％的病人血液处于高凝状态,其中慢性支气管炎患者高凝状态为3/4,肺心病为5/13,肺癌为3/4.肺梗塞1例,经血栓弹力图动态监测,配合肝素治疗抢救成功。本文结果认为中老年肺科疾病患者血液处于高凝状态是以缺氧为中心环节的多种病理因素所致。     

重组人神经肽Y受体Y2融合蛋白的表达、纯化及其生物信息学分析研究

目的 在大肠杆菌中表达人神经肽Y Y2受体,并对之进行纯化、鉴定及生物信息学分析.方法 取已构建好且经测序确认无误的重组质粒pET28a-Y2转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白,并经SDS-PAGE检测和Western 印迹鉴定,表达产物包涵体经Ni~(2+)-NTA亲和层析纯化.然后利用相关在线软件进行生物信息学分析Y2受体蛋白.结果 经IPTG诱导含有pET28a-Y2重组质粒的DE3菌,表达出重组人Y2融合蛋白.重组蛋白经Ni~(2+)-NTA亲和层析进行纯化后,得到了较高纯度的融合蛋白.经相关在线软件分析后获得了Y2受体的相关生物学特性.结论 重组质粒pET28a-Y2在大肠杆菌DE3中成功表达,亲和层析纯化后获得较高纯度融合蛋白,并对Y2受体蛋白的生物学特征进行了预测,为进一步研究其生物学功能及其抗体的研制奠定了基础.     

p21基因转染人胃癌细胞对化疗药物敏感性的影响

目的：探讨p21基因转染人胃癌细胞系（BGC）对化疗药物的敏感性。方法：应用MTT摄入方法测定5-氟尿嘧啶、阿霉素、长春新碱、环磷酰胺、平阳霉素和替尼泊甙对p21基因转染人胃癌细胞增殖抑制作用,并进行72 h观察。结果：p21基因转染人胃癌细胞对5-氟尿嘧啶最敏感,72 h抑制率为77.9%;其次为阿霉素、长春新碱、环磷酰胺、平阳霉素和替尼泊甙,其抑制率分别为62.7%、61.1%、59.3%、58.2%及45.9%。其敏感性与对照组相比差异有显著性（P<0.05）,随时间延长而逐渐增加。结论：用MTT法检测p21基因转染人胃癌细胞对化疗药物敏感性的实验,即可以针对性指导临床对肿瘤敏感性化疗药物的选用,又可避免盲目用药而产生对机体免疫细胞的毒性作用。p21基因可提高对5-氟尿嘧啶的敏感性。     

低剂量电离辐射对小鼠派伊氏板细胞Bcl-2转录水平的影响

目的：研究不同剂量X射线全身照射对小鼠派伊氏板细胞凋讯的影响及作用机理。方法：采用反转录PCR法检测了派伊板细胞Bcl-2转水平的变化,并用琼脂糖凝胶电泳,流式细胞术检测了不同剂量X射线全身照射后小鼠派伊氏板细胞DNA及凋亡小体的改变。结果：2GyX射线身照射使派伊氏板细胞凋亡增多,Bcl-2转录水平表达下降,而75mGyX射全身照射使派伊氏板细胞凋亡减少,同时Bcl-2转录水平表达升高,结论：Bcl-2参与了幅射诱导小鼠派伊氏板细胞凋亡的基本调控。     

C-MYC基因与老年胃癌及直肠癌的关系研究

目的：研究老年人胃癌和直肠癌中的Ｃ－ＭＹＣ基因扩增情况,方法用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）测定８４例老年胃癌和直肠癌患者中的Ｃ－ＭＹＣ基因,通过激光密度扫描仪对琼脂糖凝胶ＥＢ染色底片进行积分光密度分析。结果正常组织无Ｃ－ＭＹＣ扩增,Ｃ－ＭＹＣ／Ｎ＋Ｌ－ＭＹＣ比值９５％可信区间为０．０８６９－０．６２５７,胃癌组织Ｃ－ＭＹＣ基因扩增阳性率为６９．２％,的癌组织的Ｃ－ＭＹＣ基因扩增阳性率为６２．５％,８４     

人胸苷激酶单克隆抗体的制备

目的 制备人胸苷激酶单克隆抗体。方法 用大肠杆菌表达和纯化的人胸苷激酶免疫Balb／C小鼠，免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合，HAT选择培养和ELISA筛选阳性克隆，阳性克隆杂交瘤注入小鼠腹腔制备腹水，用ELISA和免疫组化鉴定胸苷激酶单克隆抗体。结果 经细胞融合和筛选得到37个阳性单克隆杂交瘤，其中有二株杂交瘤可以稳定地产生人胸苷激酶的特异性抗体，制备的腹水中有高效价的抗体活性。结论 用原核表达的人胸苷激酶免疫小鼠可以制备出人胸苷激酶特异性单克隆抗体。     

引起急性结膜炎的7型腺病毒

为了研究长春市1988年7月流行的急性结膜炎的致病原,在10例急性结膜炎患儿的眼分泌物中有7例分离出腺病毒,采用中合试验,限制性内切酶图谱分析,确定腺病毒血清型别为7型,基因组型为7d.临床观察本型干扰素治疗效果好.     

申克孢子丝菌基因型鉴定在临床诊断中的应用

目的：探讨申克孢子丝菌临床分离株的基因型鉴定在临床诊断中的应用。方法：使用PCR法扩增引起三种临床类型的申克孢子丝菌菌株核糖体保守区及内转录间隔区（5．8SrDNA，ITSII）的基因序列，并进行测序。结果：三株临床分离菌株核糖体保守区及ITSII区基因序列完全一致，经测定为申克孢子丝菌，该基因序列与基因库中申克孢子丝菌菌株（AB089138）相关序列的同源性达100％。结论：申克孢子丝菌的ITS区相对保守，通过对ITS段基因序列的测定可在基因水平上对孢子丝菌进行菌种鉴定，为临床快速、准确诊断和治疗提供确切依据。     

与人体肥胖相关的神经肽Y受体Y2基因的克隆及序列分析

目的 克隆与肥胖相关的人神经肽Y受体Y2(NPY2R)基因,并鉴定该克隆基因序列的正确性.方法 从人的脂肪组织中提取总RNA并进行反转录,以此为模板用PCR扩增NPY2R基因的eDNA,然后与pET 28a+载体重组,筛选阳性克隆和DNA序列分析鉴定,测序后与GeneBank中NPY2R基因进行同源性比较和序列分析.结果 PCR扩增出一个1100 bp左右的DNA片段,与载体重组和DNA序列分析鉴定,DNA序列分析显示克隆的DNA片段是人NPY2R基因,且所克隆的基因共编码381个氨基酸,分子量为4.2 kD,与GeneBank中NPY2R基因序列同源性达100%.结论 克隆的人NPY2R基因与GeneBank中NPY2R序列完全一致,为进一步应用分子生物学技术深入研究NPY2R与人体肥胖发生、发展及转化等相关作用机制及应用该基因进行其基因蛋白表达奠定了基础.