乳头状甲状腺癌患者血清中特异性标志物的检测与鉴定

目的 探讨并鉴定乳头状甲状腺癌患者血清中肿瘤相关蛋白作为特异性标志物的可能性.方法 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测35例乳头状甲状腺癌、40例甲状腺良性结节和34例健康对照者的血清标本,应用生物信息学方法筛选差异蛋白峰,经高效液相色谱(HPLC)分离出差异蛋白,酶解后进行液质联用串联质谱(LC-MS/MS)分析,用SEQUEST检索程序查询Bioworks数据库蛋白序列进行鉴定.结果 筛选出6个最显著的差异蛋白质,质荷比(M/Z)分别位于6651、6452、7653、7932、15 106和15 848.M/Z位于6651、6452处的蛋白质在乳头状甲状腺癌组表达低于甲状腺良性结节和健康对照组;M/Z位于7653、7932、15 106、15 848处的蛋白质在乳头状甲状腺癌组表达高于甲状腺良性结节和健康对照组,差异均有统计学意义(均P<0.01).联合6种潜在蛋白质标志物,区别乳头状甲状腺癌和非乳头状甲状腺癌的特异度为88.0%,敏感度为92.5%.bl/Z位于6651、6452、7653和15 106、7932和15 848处的蛋白标志物分别为载脂蛋白C-Ⅰ、载脂蛋白C一Ⅲ、α-珠蛋白、β-珠蛋白.结论 鉴定出的载脂蛋白C-Ⅰ、载脂蛋白C-Ⅲ、α-珠蛋白和β-珠蛋白在乳头状甲状腺癌的诊断中具有一定的价值和广泛的应用前景,值得进一步研究和探讨.     

构建血清蛋白质质谱模型判别家族性腺瘤性息肉病与散发性肠腺瘤

目的 筛选家族性腺瘤性息肉病(FAP)的特异表达蛋白,构建判别FAP与散发性肠腺瘤的血清蛋白指纹图谱诊断模型.方法 采集19例FAP和16例散发性肠腺瘤患者的血清,以表面增强激光解吸电离飞行时间质谱仪(SELDI-MS-TOF)和阴离子CM01蛋白质芯片检测并筛选两组对象间的血清差异表达蛋白质峰,以支持向量机方法构建判别模型.结果 FAP与散发性肠腺瘤相比,P<0.01的蛋白质峰有6个,其中质荷比为5640、3160、4180和4290的蛋白质峰在FAP中高表达,质荷比为3940和3400的蛋白质峰在散发性肠腺瘤患者中高表达.以质倚比分别为5640、3160和4290的蛋白质峰为基础,联合质荷比为3940、13 750和4300的蛋白质峰所建立的模型判别效果最佳,对FAP与散发性肠腺瘤的判别准确率分别为94.7%和93.7%.结论 SELDI-TOF-MS能有效筛选FAP与散发性肠腺瘤的差异表达蛋白,支持向量机方法所建立的质谱模型判别效果较好,为进一步研究FAP的分子发病机制提供了切入点.     

多药耐药相关蛋白1与肿瘤

多药耐药相关蛋白(MRP)家族与P-糖蛋白同属人ABC转运蛋白超家族,介导肿瘤细胞的多药耐药,目前已发现7个成员.MRP1是190kD的跨膜糖蛋白,MRP1与P-糖蛋白介导的多药耐药有诸多差异.现综述MRP1的结构、主要生理功能、转运底物、转运功能的调控和逆转及其在肿瘤研究中的意义等方面的研究进展.     

应用抑制性消减杂交技术克隆和筛选白血病多药耐药相关基因

目的 克隆和筛选白血病多药耐药（MDR）相关基因。方法 以MDR白血病细胞株K562/DOX为检测样本。以K562细胞株为驱赶样本（对照）。应用抑制性消减杂交（SSH）技术分离和克隆K562/DOX细胞中过高表达的基因。构建cDNA消减库；通过反向Northern斑点杂交法进一步筛选消减库，对阳性克隆进行序列测定和同源性分析；并采用RT-PCR和Northern blot方法对某些阳性克隆进行进一步的验证。结果 发现了11个在K562/DOX细胞中高表达的基因。包括S3核糖体蛋白（S3ribosomal protein,S3rp)基因，尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位2（NADHdehydrogenase subunit2,ND2）基因，My023基因等，其中多数基因与肿瘤MDR的关系尚未见报道。结论 筛选到几个可能与白血病MDR形成有关的基因。提示了白血病MDR发生的新机制。     

中国人遗传性非息肉病性结直肠癌临床及遗传学特征分析

目的分析中国人遗传性非息肉病性结直肠癌(hereditary nonpolyposis colorectal cancer,HNPCC)家系的临床及遗传性突变特点。方法收集整理符合中国人HNPCC诊断标准的31个家系资料,应用PCR及变性高效液相色谱分析(denaturing high-performance liquid chromatography,DHPLC)筛查hMLH1和hMSH2基因的突变,对DHPLC图形异常的样本进行测序。结果31个家系中共发生136例次恶性肿瘤(多原发肿瘤14例),其中结直肠癌106例次,占所有肿瘤患者的77．9%,诊断年龄均数为48．6±29．0岁；胃癌14例。肿瘤先证者中共检出分属于17个不同家系的23个碱基变异位点,经DNA序列分析,证实10个家系存在10个不同的碱基突变(10/31,32．9%),其中3个为同义突变未引起蛋白质序列的改变,另外7个为病理性改变,分别为错义突变、无义突变、移码突变。这10个突变中7个位点为首次报道。外显子区检测到5个已知SNP,内含子区检测到8个碱基改变。结论(1)符合中国人HNPCC标准家系约有1/3可检出hMLH1、hMSH2基因遗传性种系突变。(2)中国人HNPCC家系以左半结肠癌和直肠癌多见。     

HER-2靶向硼脂质体的细胞靶向与细胞内分布研究

目的分析新制备的HER2靶向硼脂质体在细胞靶向、滞留及细胞内分布等方面的特性,探讨该脂质体作为靶向给药系统用于硼中子俘获治疗研究的可能性。方法分别从靶向剂Trastuzumab、脂质体和装载的WSA3个方面观察SKBR3细胞对125ITrastuzumabWSA3H脂质体的摄取与滞留。Trastuzumab标记了125I用伽玛计数器检测;脂质体标记了3H用液闪计数器检测;WSA用感应耦合等离子体质谱仪检测。激光共聚焦显微镜观察WSA在细胞内的分布。结果最初8h细胞对125ITrastuzumab的摄取量快速增加,24h后细胞内125I量反而有所下降。细胞对3H脂质体的摄取随培养时间而增加,直到48h也没有达到平台期。培养4、8及24h,细胞含硼量分别达到55、78及132×10-6。细胞摄取125ITrastuzumabWSA3H脂质体后,在普通培养液中培养24和48h,分别有90%、67%的WSA滞留在细胞内。激光共聚焦显微镜下显示大部分WSA位于细胞浆。结论细胞摄取量满意,WSA在细胞内滞留时间长,说明125ITrastuzumabWSA3H脂质体是一个很好的运载工具,有希望应用于硼中子俘获治疗研究。     

微卫星不稳定与Ⅱ期结直肠癌化疗的相关性探讨

FOLFOX方案[氟尿嘧啶（5-FU）、甲酰四氢叶酸（LV）加奥沙利铂]为目前Ⅲ期结肠癌术后标准辅助治疗方案,其中FOLFOX4方案的5年无病生存率达66.4%[1].而Ⅱ期结直肠癌术后是否需要辅助化疗,一直是争论的热点,至今仍未达成共识.研究表明,结直肠肿瘤的临床特征对Ⅱ期患者预后评估和化疗反应性预测作用是有限的[2].具有类似临床特征的患者对相同化疗方案的反应性不同,这很可能与肿瘤的遗传学和表观遗传学特征有关,同时也取决于个体的微环境.因此,理想的治疗方案应着眼于肿瘤和宿主的分子（基因组学和蛋白组学）特征,并结合患者的临床病理特点综合决定.目前,对肿瘤分子生物学认识的进展,提示肿瘤相关分子标记物可能更好的辨别能从辅助化疗中受益的高危群体.其中微卫星不稳定性（microsatellite instability,MSI）是目前的研究热点之一.     

应用直肠镜筛检和长期随访直肠癌的意义

浙江省嘉善县大肠癌死亡率为26.16/10万,标化死亡率为22.65/10万,居全省首位。大肠癌病例就诊时病变严重程度明显地决定着预后。诊断时已有症状表现为较晚期的病人,其五年生存率<40％,然而无症状的,病变局限于肠壁的病人,五年生存率>85％。目前在大肠癌的治疗中并无新的突破。早期发现病人是改善预后和提高     

壶腹周围癌

作者报导了 Iowa 大学医院,1938～1970年的55例壶腹周围癌,占同时期收治的实体瘤病例的0.01%。黄疸是最常见的症状,其次为体重减轻,腹痛、恶心呕吐、乏力、寒战发热及腹泻。体检见60%有肝大,40%有上腹压痛,20%患者可触及胆囊。故显然壶腹周围癌并不是无痛,     

应用直肠镜筛检和长期随访直肠癌的意义

浙江省嘉善县大肠癌死亡率为26.16/10万,标化死亡率为22.65/10万,居全省首位。大肠癌病例就诊时病变严重程度明显地决定着预后。诊断时已有症状表现为较晚期的病人,其五年生存率<40％,然而无症状的,病变局限于肠壁的病人,五年生存率>85％。目前在大肠癌的治疗中并无新的突破。早期发现病人是改善预后和提高生存率的极重要一环。现就我们在嘉善县利用直肠镜筛检和长期随访直肠癌的工作及对直肠镜的应用价值作一些分析和讨论。材料与方法1980～1884年浙江医科大学与嘉善县卫生局对11个公社30岁及以上的成人,利用15cm长硬直肠镜进行直肠癌和有关病变的普查。其中8个公社以隐血试验(联苯胺试纸法)为初筛。隐血阳性者再进行直肠镜检查。另3个公社是以直肠镜检查为初筛。如发现