中国人遗传性非息肉病性结直肠癌错配修复基因大片段缺失研究

目的了解中国人遗传性非息肉病性结直肠癌(hereditary nonpolyposis colorectal cancer．HNPCC)家系中MSH和MLH1基因大片段缺失情况及特点，以进一步完善中国人HNPCC家系遗传检测内容。方法取14个符合中国人HNPCC诊断标准的HNPCC家系肿瘤先证者外周血DNA，用荧光标记多重PCR技术结合GeneScan分析系统检测MSH2和MLH1基因大片段缺失。结果14例患者中有1例检测到MSH2基因第1～7外显子缺失，该家系另1例大肠癌患者和3个家系成员有同样的基因片段缺失。结论中国人HNPCC家系错配修复基因大片段缺失可能以MSH2比较常见。建议在中国人HNPCC家系遗传检测中常规包含错配修复基因大片段缺失检测。     

结肠癌Ⅱ级预防现场高危人群筛检模式的确立及其评价

如何从无症状阶段及时发现大肠癌及癌前病变,是大肠癌Ⅱ级预防的重要内容。普查对于早期发现、早期诊断肿瘤的作用是明显的,但由于普查人群大,效益并不理想。近10余年来在直肠癌的人群普查中,应用15cm直肠镜及时发现与治疗直肠病变,得到了满意的效果,降低了直肠癌的发病率与死亡率,而对于结肠癌的早期诊断未能解决。虽然目前在人群中用大便隐血试验及肠镜检查进行普查,但其实际效益并不理想,如若能对大肠癌高危人群作肠镜精检可能是一有效途径,为此我们在嘉善县几个自然乡对30岁以上人群,进行了以数学模型判别AD值及粪便潜血试验(FOB)联合初筛,筛选出高危人群,进而对该组人群以60cm纤维肠镜作进一步精筛确诊,为诊     

含人类乳头瘤病毒16E7—L1的嵌合型病毒样颗粒的构建,表达和纯化 …

目的 研究人类乳头瘤病毒（ＨＰＶ）１６型的早期基因Ｅ７,构建、表达并纯化鉴定了６Ｅ７与ＢＰＶＬ１重组的嵌合型病毒样颗粒ＶＬＰＳ。方法ＨＰＶ１６Ｅ７基因分３段经ＰＣＲ增扩后分别克隆入连有ＢＰＶＬ１的质粒ＰＵＣ形成ＢＰＶＬ１－ＨＰＶ１６Ｅ７;以质粒ＰＶＬ１３９３为载体将ＢＰＶＬ１－ＨＰＶ１６Ｅ７基因转染杆状病毒并在昆虫细胞中进行表达;用超声粉和蔗糖超高、氯化工离心等方法纯化以及免疫印迹、ＥＣＬ、透射电     

小檗胺对多药耐药K562/Adr细胞作用的研究

目的研究小檗胺诱导人白血病K562／Adr细胞凋亡及逆转多药耐药的作用及机理。方法采用MTT法测IC50值,流式细胞仪Annexin V FITC-PI法检测细胞凋亡发生率,PI染色法检测凋亡峰及细胞周期,同时以FCM检测Caspase-3、P-GP蛋白表达及细胞内药物积聚能力,RT-PCR法检测mdr-1基因表达。结果小檗胺能抑制人白血病K562／Adr细胞生长且呈剂量依赖关系,并能诱导细胞凋亡,使Caspase-3蛋白表达及细胞药物外排能力增加,同时降低mdr-1基因mRNA和蛋白表达水平。结论小檗胺能激活Caspase-3以诱导人白血病K562／Adr细胞凋亡,同时能通过降低mdr-1表达逆转多药耐药。     

基于芯片和生物信息学分析结直肠癌肝转移中差异表达的微小RNA及其意义

目的 分析有肝转移与无肝转移的结直肠癌微小RNA(microRNA,miRNA)表达的差异及其与结直肠癌肝转移（colorectal liver metastases,CRLM）发生的关系。方法 收集2011年2月1日至2018年9月10日浙江大学医学院附属第二医院60例有肝转移（n=29）和无肝转移（n=31）的结直肠癌新鲜标本,采用Agilent芯片检测miRNA表达,利用Gene Spring GX v11.5.1软件筛选出差异表达的miRNA。进一步收集2003年3月1日至2012年12月31日浙江大学医学院附属第二医院62例有肝转移（n=31）和无肝转移（n=31）的结直肠癌4%甲醛固定的石蜡包埋（formalin-fixed and paraffinembedded,FFPE）标本,对差异miRNA表达进行验证。利用Gene Ontology (GO)功能数据库及Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG)数据库进行靶基因的信号通路的富集,推测CRLM相关通路。TCGA数据库分析CRLM组织与正常肝脏组织中miR494、miR...     

癌症早诊早治工作评价指标的探讨

[目的]探讨癌症早诊早治工作的评价指标。[方法]分析2006～2009年卫生部早诊早治项目宫颈癌、食管癌/贲门癌、结直肠癌、肝癌、鼻咽癌及胃癌的筛查和早诊早治数据,提出并定义癌症早诊早治工作的初步评价指标。筛查早诊率,检出率和治疗率为工作绩效指标;早期发现成本系数（early detection cost index,EDCI）为综合评价指标。[结果]宫颈癌、食管癌/贲门癌、结直肠癌、肝癌、鼻咽癌及胃癌6种癌症的诊断性筛查检出率分别为：5.6%、2.4%、3.9%、1.3%、5.5%、1.5%;筛查早诊率分别为：93.5%、82.3%、91.9%、58.2%、60.0%、80.0%;治疗率分别为：90.9%、68.4%、100%、69.1%、80.0%、85.0%;早期发现成本系数分别为：0.22、0.42、0.48、0.80、2.45、1.68。[结论]宫颈癌、结直肠癌及食管癌/贲门癌的早诊早治有良好的效益,应进一步推广。     

结直肠癌转移复发的转化医学研究

结直肠癌复发转移是患者死亡的主因,早期发现肿瘤转移的证据能提高复发肿瘤的疗效。寻找结直肠癌复发转移的分子标志物是结直肠癌转化医学研究的重要内容之一。结直肠癌复发转移分子标志物转化研究的一般过程包括高通量数据处理基础上的分子标志物发掘,分子功能的鉴定,单中心小样本验证和多中心大样本的确认等四个关键步骤。     

血清蛋白质指纹图谱对晚期结直肠癌一线化疗效果的预测作用

目的寻找能预测晚期结直肠癌一线化疗疗效的血清蛋白标记物。 方法选择2008年8月至2010年7月在浙江大学医学院附属第二医院的70例从未接受过治疗的晚期结直肠癌患者,其中44例患者接受FOLFOX方案化疗,26例患者接受FOLFIRI方案化疗,进行4个疗程治疗后使用RECIST评价标准区分化疗受益者(R)和化疗无效者(NR)。留取化疗前患者血清标本,采用SELDI-TOF-MS和人工神经网络对一线化疗的疗效进行预测分析。 结果根据RECIST标准,42例患者为化疗受益者,28例患者为化疗无效者,分析两组患者血清蛋白质指纹图谱的差异,筛选出10个蛋白质峰在化疗受益组的表达明显高于化疗无效组;并由这10个峰构建出结直肠癌一线化疗疗效的预测模型。经交叉验证,该模型的总准确率为90.0%(63/70)。 结论蛋白质指纹图谱模型是预测晚期结直肠癌患者一线化疗方案治疗效果的有效方法之一。     

循环肿瘤细胞及循环肿瘤DNA检测在乳腺癌中的研究进展

乳腺癌是中国女性最常见的癌症,其早期检测、个体化治疗及实时疾病监测一直是科研及临床工作者关注的重点。癌症患者血液中循环肿瘤细胞(CTC)和循环肿瘤DNA(ctDNA)的检测微创、简便,易实时获取信息。目前,有关CTC富集鉴定方法多种多样,CTC及ctDNA检测的敏感度和特异度较前有所提高,未来研究面临的最大挑战为肿瘤细胞特异性标志物的开发以及ctDNA临床意义的研究。CTC及ctDNA在基础研究、检测方法、CTC培养、早期肿瘤检测、个体化治疗及临床预后等方面的研究均有开展。笔者对乳腺癌CTC及ctDNA的研究进展作一总结。