RP-HPLC法测定川芎中阿魏酸的含量

目的 建立一种测定川芎原药材中主要成分阿魏酸含量的方法。方法 采用InertsilC18柱（250mm×4.6mm,5μm）甲醇-水-冰醋酸（35∶65∶0.5）为流动相,检测波长321nm,流速1ml.min^-1,柱温：室温。结果 当阿魏酸的浓度在2.53～40.40μg.ml-1范围时,其峰面积与浓度的线性关系良好（r=0.9999n=6）;平均回收率99.67%,RSD=1.8%。结论 方法准确,可靠,可作为川芎原药材或含有川芎的中成药建立对阿魏酸含量测定方法时应用。     

RNA干扰hTERT基因对人乳腺癌细胞株MCF-7周期及凋亡影响的研究

目的观察载体介导的RNA干扰技术能否有效抑制人乳腺癌细胞株MCF-7的hTERT的表达及其对细胞周期及凋亡的影响。方法构建2个针对hTERT基因表达短发夹状siRNA的真核表达载体(pshRNA-hTERT)并转染人乳腺癌细胞株MCF-7,通过RT-PCR检测该基因mRNA,Western blot蛋白质检测,端粒酶活性检测,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡等方法检测RNAi效果,从中筛选出基因沉默效果好的靶位点。结果转染乳腺癌细胞后,pshRNA-hTERT1,2质粒均能抑制hTERT基因表达,mRNA表达分别下调了54.6%,55.2%;蛋白表达分别下调46.6%,47.8%。端粒酶活性均明显下降。对乳腺癌细胞周期中S期细胞明显减少,G1/G0期细胞显著增加。结论 RNAi在体外明显抑制乳腺癌细胞中hTERT基因的表达和瘤细胞增殖。     

室性心律失常患者导管射频消融后T波峰末间期的变化

目的探讨室性心律失常患者导管射频消融后T波峰末间期的变化。方法选取我院2009年1月-2012年12月42例室性心律失常患者,应用导管射频消融,检测Tp-Ted、Tp-Tecd、QTd、QTcd变化情况,并选取42例健康者作为对照组,对比其差异性。结果室性心律失常者手术后Tp-Ted、Tp-Tecd、QTd、QTcd和手术前对比均减少,差异有统计学意义（P〈0.05）。术后和对照组对比无明显差异（P〉0.05）。结论导管射频消融治疗室性心律失常具有较为明显的效果,可以提高心肌复极稳定性,减少Tp-Te间期。     

蓝科肤宁治疗面部接触性皮炎疗效观察

目的评价蓝科肤宁治疗面部接触性皮炎的临床疗效及安全性。方法将117例面部接触性皮炎患者随机分成两组,治疗组60例,予蓝科肤宁湿敷,1次/日;对照组57例,予3%硼酸溶液湿敷及丁酸氢化可的松乳膏(尤卓尔)外搽,2次/日。两组均口服氯雷他定10mg,1次/日,疗程1周。结果治疗1周后两组患者症状和体征明显改善,治疗组有效率86.66%,对照组有效率84.21%,两组有效率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论蓝科肤宁治疗面部接触性皮炎疗效显著,作用与尤卓尔相当,但无引起激素不良反应的风险,值得临床推广。     

eIF4E基因下调对人乳腺癌Bcap37细胞凋亡的影响

目的应用化学合成的siRNA干扰乳腺癌Bcap37细胞真核细胞翻译起始因子4E(eukaryotic translation initiationfactor 4E,eIF4E)的表达,探讨其对乳腺癌细胞凋亡和生长周期的影响。方法化学合成eIF4E基因的siRNA,转染人乳腺癌Bcap37细胞,采用Western blotting法及RT-PCR法检测转染前后Bcap37细胞中eIF4E蛋白和mRNA表达;应用流式细胞技术检测转染前后细胞周期的变化;AO/EB双染色法检测细胞凋亡;酶标仪检测caspase-3活性。结果 RT-PCR与Western blot-ting法检测结果显示,转染eIF4E-siRNA-3#组细胞eIF4E基因的mRNA和蛋白表达均明显下降(P<0.01);eIF4E-siRNA转染组G1期细胞比例显著增加,S期细胞比例相对减少,差异显著(P<0.05);转染eIF4E-siRNA可诱导细胞凋亡,caspase-3活性亦增强。结论 eIF4E-siRNA可下调eIF4E基因在乳腺癌Bcap37细胞中的表达水平,诱导细胞凋亡。     

镇肝熄风汤载药脑脊液对MPP^＋诱导的PC12细胞c-Jun磷酸化的影响

目的探讨镇肝熄风汤载药脑脊液对甲基-苯基-吡啶离子（1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP＋）诱导的PC12细胞c-Jun磷酸化的影响。方法镇肝熄风汤载药脑脊液预处理体外培养的PC12细胞后,加入MPP＋诱导PC12细胞损伤模型。用Western blotting检测c-Jun和phospho-c-jun蛋白表达。结果 MPP＋处理72h,与空白对照组比较,模型组phospho-c-jun蛋白表达显著上调,差异具有统计学意义（P〈0.05）。与模型组比较,镇肝熄风汤载药脑脊液组phospho-c-jun蛋白表达显著下调,差异具有统计学意义（P〈0.05）。而各组之间c-jun蛋白表达无显著性差异（P〉0.05）。结论镇肝熄风汤载药脑脊液对MPP＋诱导的PC12细胞c-Jun磷酸化具有抑制作用。     

早产极低出生体重儿听性脑干诱发电位特征分析

目的：探讨早产极低出生体重儿（VLBW）听性脑干诱发电位（ABR）的特征,及其与患儿生理特征的关系。方法：选取本院新生儿病区、新生儿重症监护室及听力专科就诊接受检查的早产VLBW儿纳入研究,共59例（118耳）,登记围产期高危因素;选取30例（60耳）同期足月正常出生体重儿作为对照组。对所有患儿进行中耳分析,畸变产物耳声发射和ABR。结果：早产VLBW儿中听力异常的构成比明显大于正常人群,伴有其他高危因素的患儿（42例）阈值高于不伴有其他高危因素者（17例）;相关分析显示,ABR阈值与出生体重、孕周、评估时年龄和调整年龄之间没有相关性（P〉0．05）;ABRI、Ⅲ、Ⅴ波潜伏期和Ⅰ-Ⅲ、Ⅲ-Ⅴ、Ⅰ—Ⅴ波间期等特征参数与患儿评估时年龄和调整年龄呈负相关（P〈0．05）;早产VLBW儿与足月儿在ABR Ⅰ、Ⅴ波潜伏期及Ⅰ-Ⅲ、Ⅲ-Ⅴ波间期等参数间存在差异。结论：早产VLBW儿导致听力损失的根本原因可能并不是胎龄和体重本身,而是与并发症有关;早产VLBW儿中,外周听觉功能异常率高;对于VLBW儿需建立耳声发射与自动ABR两者结合的听力筛查方式并定期随访。     

围手术期可逆性后部脑病综合征: 1例病例报道及文献回顾

可逆性后部脑病综合征(posterior reversible encephalopathy syndrome, PRES)是一种临床上罕见的放射学综合征, 其特征是头痛、癫痫发作、意识障碍和视觉变化。大量输血、应用免疫抑制药物、低颅内压、围手术期高血压和神经外科术后的患者需警惕PRES的发生。此例PRES患者存在严重贫血, 既往无高血压病史, 术后出现癫痫发作和意识丧失, 磁共振检查证实为PRES。通过文献检索, 回顾分析了29例围手术期PRES患者, 其中14例患者为女性, 23例(79.3%)发生了术中或术后高血压, 术后神经症状的平均发病时间为5.4 d。有效的围手术期血压管理、避免大量输血和早期诊断治疗有助于避免疾病发生、发展, 促进患者早期康复, 降低病死率和后遗症发生率。     

RNA干扰hTERT基因对人乳腺癌细胞株MCF-7周期及凋亡影响的研究

目的 观察载体介导的RNA干扰技术能否有效抑制人乳腺癌细胞株MCF-7的hTERT的表达及其对细胞周期及凋亡的影响.方法 构建2个针对hTERT基因表达短发夹状siRNA的真核表达载体（pshRNA-hTERT）并转染人乳腺癌细胞株MCF-7,通过RT-PCR检测该基因mRNA,Western blot蛋白质检测,端粒酶活性检测,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡等方法检测RNAi效果,从中筛选出基因沉默效果好的靶位点.结果 转染乳腺癌细胞后,pshRNA - hTERT1,2质粒均能抑制hTERT基因表达,mRNA表达分别下调了54.6%,55.2% 蛋白表达分别下调46.6%,47.8%.端粒酶活性均明显下降.对乳腺癌细胞周期中S期细胞明显减少,G1/G0期细胞显著增加.结论 RNAi在体外明显抑制乳腺癌细胞中hTERT基因的表达和瘤细胞增殖.     

注射用磷霉素钠中磷霉素钠二醇物含量测定方法的研究

目的:建立液相色谱串联质谱法和高效液相色谱-示差折光法测定注射用磷霉素钠中的磷霉素钠二醇物含量,并与现行中国药典方法比较,提高对药品的质量控制。方法:液相色谱串联质谱法采用Promosil CN(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为5 mmol.L-1醋酸铵-甲醇(82∶18),采用(-)ESI电离源,多反应监测(MRM)扫描方式,用于定量分析的离子分别为m/z 154.9→80.9(磷霉素二醇物)和m/z 120.9→77.1(内标苯甲酸)。高效液相色谱-示差折光法采用Agilent Zorb-ax NH2(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为10.89 g.L-1磷酸二氢钾溶液,流速为1.0 mL.min-1;柱温36℃;检测器温度为35℃。结果:采用液相色谱串联质谱法,二醇物在22.46～359.4 ng.mL-1范围内线性关系良好,定量限为4.492 ng.mL-1,每一样品的分析时间为5 min。采用高效液相色谱-示差折光法,二醇物在0.104～5.205 mg.mL-1浓度范围内线性关系良好,精密度为0.7%,重复性良好。结论:本研究2种方法专属性高、简便、可靠,可用于注射用磷霉素钠的质量研究和质量控制。