单细胞凝胶电泳技术及其应用进展

单细胞凝胶电泳又称彗星试验 ,是一种在单细胞水平上检测DNA单、双链断裂和碱性不稳定位点的方法 ,具有敏感、稳定、快速的优点。近些年来 ,该方法广泛应用于DNA修复、遗传毒理、环境监测和细胞凋亡的研究。本文就彗星试验结合荧光原位杂交、检测DNA碱基氧化损伤、以及在染色、玻片储存和彗星图像分析方面的进展进行了综述     

单细胞凝胶电泳技术的进展及应用

单细胞凝胶电泳技术（ｓｉｎｇｌｅｃｅｌｌｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓａｓｓａｙ，ＳＣＧＥ）又称彗星试验（Ｃｏｍｅｔａｓｓａｙ），是一种快速、灵敏、简便、价廉、重复性好的检测单细胞ＤＮＡ损伤的方法。首先由Ｏｓｔｌｉｎｇ等（１９８４）建立，随后Ｓｉｎｇｈ等（１９８８）改善了试验条件，使之得以更广泛地应用。ＳＣＧＥ在遗传毒理学、肿瘤学、放射生物学、人群监测、环境监测、临床诊断与治疗等方面有着广泛的应用前景。我们就ＳＣＧＥ的发展、原理、分析方法及在遗传毒理学、ＤＮＡ损伤与修复、人群监测、环境监测…     

DNA损伤修复能力与慢性苯中毒关系研究

目的探讨DNA修复能力与慢性苯中毒的关系。方法以γ射线作为诱变剂造成淋巴细胞DNA损伤,应用彗星试验和外周血淋巴细胞胞质分裂阻滞微核检测法,评价63名慢性苯中毒工人和45名同期接苯但无苯中毒表现的同工种对照工人外周血淋巴细胞DNA链断裂和染色体损伤微核形成的修复能力。结果苯中毒组的彗星尾长差[(4·64±1·57)μm]显著高于对照组[(3·77±1·30)μm](P=0·0029)。3AB指数与对照组无显著性差异。彗星尾长差>3·81μm的研究对象发生慢性苯中毒的相对危险性显著增高(OR=2·490,95%CI1·068~5·806,P=0·0346),而且,慢性苯中毒危险性与彗星尾长差之间存在显著性的趋势关系(P=0·0024)。3AB指数<0·20的研究对象发生慢性苯中毒的相对危险性与3AB指数≥0·20的研究对象无显著性差异。结论DNA链水平的修复能力与慢性苯中毒的发生关系密切,修复能力越差,发生慢性苯中毒的危险性越高。本研究未证明染色体水平的修复能力与慢性苯中毒的联系。     

单细胞凝胶电泳法检测苯作业工人淋巴细胞DNA损伤

目的 用碱性单细胞凝胶电泳技术检测苯作业工人外周血淋巴细胞DNA损伤,研究苯的遗传毒性。方法 采用碱性单细胞凝胶电泳技术。将接苯工人按累积浓度、历史平均浓度和测定当时8h时间加权平均浓度（8hTWA）分组。观察指标包括DNA断裂分级（将DNA断裂损伤细胞按其损伤程度分级）及DNA彗星尾长（彗头末端到彗尾的长度）。结果 接苯工人DNA断裂程度及DNA彗星尾长[Ig(尾长＋1）]两个参数,接苯组按累积浓度、历史平均浓度和8hTWA浓度计算,均明显高于对照组,差异有显著性（P＜0．01）,并有明显的剂量－反应关系。结论 彗星试验能够快速,敏感地检测苯引起的人类淋巴细胞DNA损伤,提示对于检测环境致癌物和致突变物可能是一有用工具。