噬菌体展示技术在肿瘤研究中的应用

目的:总结噬菌体展示技术在肿瘤研究中的应用现状.方法:检索PubMed central及CNKI期刊全文数据库,以"噬菌体展示技术"和"肿瘤"等为关键词,筛选2004-2008年的110篇相关文献.纳入标准:1)噬菌体展示技术的原理;2)噬菌体展示技术的发展;3)噬菌体展示技术在肿瘤研究中的应用.根据标准最终精选23篇文献纳入分析.结果:噬菌体展示技术在肿瘤研究的很多方面都有重要用途,如探索蛋白质之间的相互作用,寻找肿瘤抗原和治疗性靶肽,制备抗体和研制疫苗等;但在临床应用上仍存在一些限制,需进一步深入研究和发展.结论:噬菌体展示技术在肿瘤研究领域已得到广泛应用,但大量投入临床仍需完善.     

肾癌T7噬菌体展示肽库构建的实验研究

目的:构建肾细胞癌T7噬菌体展示肽库,为下一步筛选肾癌早期诊断分子标志群打下基础.方法:用传统Trizol方法分别抽取31例涵盖各种组织类型肾癌组织标本的总RNA,确定完整性后再根据OD值等量混合总RNA,用试剂盒完成mRNA的分离并电泳检测其质量,经反转录、末端平齐、片段长短筛选、加接头、双酶切、去除多余接头和<300 bp的cDNA片段等步骤,再与T7Select10-3b载体连接、体外包装并扩增得到肾癌T7噬菌体展示cDNA文库.通过铺平板测定和PCR技术鉴定所建文库质量.结果:建成原始文库的库容量为5.0×107 pfu/mL,扩增后文库滴度为3.5×1012 pfu/mL,重组率为95%,插入片段为300～2 000 bp.结论:成功用T7噬菌体构建了高质量的肾癌cDNA文库,为筛选可用于临床早期诊断的肾癌特异标志奠定基础.     

急性胰腺炎中前列腺素类物质变化及复方丹参对胰腺炎治疗作用的观察

我们观察了23例急性胰腺炎病人的血浆TXB_2和6—Koto-PGF_(1α)的水平,并应用复方丹参对患者进行治疗。结果表明:急性胰腺炎中血浆TXA_2和PGI_2的水平出现明显的不平衡;复方丹参能明显降低血浆TXA_2水平,相对增加PGI_2的生成,有改善胰腺的微循环,促使胰腺炎康复的作用与激素和优布芬比较,具有更好的治疗价值。     

RID和PCR诊断结核病的比较研究

ＲＩＤ和ＰＣＲ诊断结核病的比较研究邓松华，沈际佳，张林杰（安徽医科大学，合肥２３００００）单向免疫扩散法（ＲＩＤ）检测活动性结核标志物诊断结核病取得了比较满意的结果［１，２］。为验证ＲＩＤ的敏感性与特异性，我们将ＲＩＤ法与多聚酶链反应技术（ＰＣＲ）用...     

不同转移潜能的人前列腺癌细胞原位转移模型的建立与比较

目的 建立不同转移潜能的人前列腺癌细胞转移模型，并比较其结果。方法 利用人前列腺癌细胞系PC3单克隆细胞株裸鼠皮下移植瘤，通过外科原位移植技术植入BALB／c-nu／nu雄性裸小鼠，建立人前列腺癌高、低转移细胞株转移模型；并观察比较两细胞株转移模型的原位成瘤率、自发转移率、两细胞株形态学特征和转移抑制基因CD44s的表达。结果 人前列腺癌高转移细胞株裸鼠原位种植后原位成瘤率100％，主动脉旁淋巴结转移率为100％，低转移细胞株裸鼠原位种植后原位成瘤率100％，主动脉旁淋巴结转移率为40％，两者主动脉旁淋巴结转移率差异有显著性（P〈0．05）。高、低转移细胞株形态学特征亦不同。CD44s蛋白在人前列腺癌高转移性单克隆细胞株PC3-H中的表达强度低于低转移性单克隆细胞株PC3-L。结论 遗传背景相似的人前列腺癌高、低转移细胞株原位移植转移模型为研究人前列腺癌转移机制提供了有力工具。     

HIV-1 HXB2株Tat蛋白在大肠杆菌中的分段表达及免疫原性分析

目的研究对人类免疫缺陷病毒Ⅰ型HXB2株调控蛋白Tat原核表达产生影响的区域和Tat蛋白重要的抗原表位。方法用PCR方法获得Tat(1-48aa)、Tat(22-72aa)和Tat(38-101aa)DNA片段,构建其原核表达质粒pET32a-Tat(1-48aa)、pET32a-Tat(22-72aa)和pET32a-Tat(38-101aa),并转入E.coliBL21(DE3)中进行诱导表达及纯化,SDS-PAGE鉴定表达及纯化产物。采用间接ELISA方法用兔抗pET32a-Tat抗血清对三种肽段进行免疫原性分析。结果成功构建了pET32a-Tat(1-48aa)、pET32a-Tat(22-72aa)和pET32a-Tat(38-101aa)质粒,分别表达出相对分子质量(Mr)为23×103、23×103和25×103的融合肽段,其浓度分别为4.26、3.35和5.11mg/ml。间接ELISA结果表明三种融合肽段与兔抗pET32a-Tat抗血清均呈特异性结合反应,其抗体滴度分别为1:128000、1:32000、1:64000,而抗血清与pET32a蛋白仅有较弱结合。结论半胱氨酸富集区(22-37位氨基酸)对Tat蛋白的原核表达有较显著影响;Tat蛋白的N端区、碱性区和C端区是其重要的抗原表位,其中N端区的免疫原性最强。     

结核分枝杆菌CE复合物对人单核-巨噬细胞的功能表型的影响及其作用机制

目的研究结核分枝杆菌早期分泌抗原CFP-10-ES-AT-6复合物(CE复合物)对人单核-巨噬细胞功能表型的影响及其作用的细胞信号传导通路。方法分别采用ELISA法以及流式细胞仪检测大肠杆菌克隆表达纯化的CE复合物在不同时间及浓度对人单核-巨噬细胞TNFα-产生对细胞表型的影响,并且应用各种细胞信号传导通路抑制剂来探讨CE复合物作用的细胞信号传导通路。结果结核分枝杆菌CE复合物能够在早期(6~8h)诱导人单核-巨噬细胞活化,大量产生TNFα-,但在晚期(>48 h),则没有此作用;细胞信号传导通路MEK1/2和p38MAPK的选择性抑制剂SB203580、PD98059、U0126能抑制CE的这种作用;CE复合物在早期(18 h)促进单核-巨噬细胞表面抗原提呈功能分子CD80、CD40的表达。结论CE复合物在感染早期可能通过激活MEK1/2和p38MAPK刺激单核巨噬细胞活化,但在晚期则没有此作用。在感染早期可能具有重要的抗结核保护作用。     

肛门直肠周围脓肿误诊12例分析

我院2003~2006年共收治肛门直肠周围脓肿128例,其中12例在入院前发生误诊,分析如下。1临床资料本组男11例,女1例。其中20~40岁5例,40~55岁5例,55岁以上2例。术前诊断:痔疮4例,肛窦炎2例,肛瘘2例,肛周炎2例,肛周感染1例,肛门囊肿1例。术后诊断:肛周皮下间隙脓肿4例,肛周前深间隙