早孕因子对淋巴细胞增殖的影响

目的：探讨早孕因子（ＥＰＦ）活性物对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响及其在胎母免疫中的作用。方法：使用离子交换层析、亲和层析和凝胶过滤技术提纯３～６周孕妇血清中ＥＰＦ；用淋巴细胞转化法观察ＥＰＦ对淋巴细胞的作用。结果：ＥＰＦ活性物Ｇ４、Ｇ３及孕血清均能抑制淋巴细胞ＤＮＡ合成，尤以Ｇ４作用更为明显，并呈一定剂量依赖性。结论：ＥＰＦ可能在介导、调控妊娠早期诱导的免疫抑制，保证妊娠的持续中起重要作用     

孕妇血清提取物—早孕因子样物质的花结抑制活性测定

以花结抑制试验检测50名妊娠3～8周妇女静脉血混合血清及其经DEAE纤维素离子交换层折和经Sephadex-G-100凝胶过滤后,所得各阶段提取物的花抑滴度,并以HCG胶体金试剂盒测定HCG。对照组为50名处女混合血清,结果证明:混合孕血清经DE-52柱层析后未吸附蛋白部分(DE-I)及Sephadex-G100凝胶过滤后洗脱峰DE-I-GⅡ及DE-I-GⅢ均具花抑活性,DE-I-GⅡ为HCG( )而DE-I-GⅢ为HCG(-)°提示DE-I-GⅡ峰为EPF与HCG混合物,而DE-I-GⅢ峰为不含HCG而具花抑活性的EPF粗提物。     

两种抗弓形虫抗体的检测与临床应用

目的 探讨自然流产与弓形虫感染的关系。方法 用酶联免疫吸附试验检测了４９例自然流产妇女和７５例妊娠８个月以上的健康孕妇血清物异性ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体。结果 流产组ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体阳性率（３４．７％）和（１８．４％）均明显高于健康对照组（９．３％和３．１％）,并随流产次数的增加,两种抗体阳性呈逐渐升高的趋势。另外,两种抗体阳性率还随患者年龄增加而逐渐增高。结论 弓形虫感染与孕妇流产有一定关系。ＩｇＭ     

围刺埋线配合体穴埋线治疗肛周湿疹163例分析

目的探讨围刺埋线配合体穴埋线在肛周湿疹治疗中的价值。方法总结163例采用局部围刺埋线配合体穴埋线治疗肛周湿疹患者的临床疗效及3个月后随访情况。结果痊愈147例,治愈率为90．18％,好转163例,有效率100％;3个月随访,复发3例,占1．84％。结论围刺埋线配合体穴埋线是治疗肛周湿疹的一种有效方法,近期疗效确切,疼痛少、疗程短、疗效佳,复发率低。可重复操作,具有很好的推广价值。     

构建SPA和SPG单结构域随机组合噬菌体展示文库

目的 构建免疫球蛋白结合分子金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)和链球菌蛋白G(SPG)单结构域随机组合噬菌体展示文库,为研究其分子功能与结构的关系奠定基础.方法 PCR扩增制备SPA的A、B、C 、D、 E结构域和SPG的B2结构域核苷酸片段,在片段两端通过引物引入XbaⅠ酶切位点和保护碱基,3′端引入3个氨基酸大小的随机连接肽核苷酸序列,各结构域核苷酸片段经XbaⅠ酶消化,在T4连接酶作用下随机相互连接并克隆于噬菌体展示载体pCANTAB5S,克隆产物转化E.coli DH5α,提取原代库质粒转化E.coli TG1,经M13K07辅助噬菌体拯救,构建成SPA和SPG单结构域随机组合噬菌体展示文库.结果 该噬菌体展示文库库容量为1.87×107 cfu,滴度为1.3×1014 TU/ml,文库的片段插入率近100%,其中插入多个结构域的阳性克隆占21.7%,序列分析显示各结构域之间的连接和随机连接肽序列具有随机性.结论 成功地构建了SPA和SPG单结构域随机组合噬菌体展示文库,该文库在库容量、多样性和随机性方面满足体外分子进化研究的要求.     

肛周湿疹的治疗近况及进展

肛周湿疹是肛肠科常见病,是由各种原因引起的肛门周围皮肤的一种过敏性炎症性皮肤病。临床主要表现是局部皮肤潮红、丘疹、渗液、糜烂、瘙痒剧烈,或皮损表面粗糙、肥厚、苔藓样变、色素脱失、皲裂等。目前,临床治疗方法颇多,大致有内服中药兼外治、熏洗治疗、药物封闭、外用药、微波激光、针灸及手术等。总的来讲,急性期容易治愈,但慢性期反复发作,难以治愈,治疗较为棘手。     

噬菌体展示耐药突变HIV-1蛋白酶敏感切割位点六肽随机文库的构建

目的构建耐药性突变HIV-1蛋白酶(protease PR)敏感切割位点序列体外噬菌体筛选模型,研究HIV-1蛋白酶耐药性突变与敏感切割序列的关系。方法用含随机核苷酸序列的引物PCR方法对HIV-1gag基因上的CAP2片段的PR切割位点处的氨基酸序列进行随机化,再将重组CAP2片段和NC片段拼接克隆于噬菌体展示载体LD3-pCANT-AB5S上,建立HIV-1蛋白酶靶蛋白切割位点随机化的噬菌体展示文库。结果该噬菌体展示文库库容量为2.6×106,滴度为4.1×1015TU·L-1,CAP2片段插入率为47.8%;序列分析显示切割位点中随机化的核苷酸与氨基酸均呈随机性分布。结论成功地构建HIV-1蛋白酶的敏感切割序列噬菌体筛选文库,为筛选到突变PR敏感切割序列噬菌体及研究耐药HIV-1蛋白酶抑制剂与突变PR的关系打下基础。     

3腺病毒介导的LacZ基因在B16小鼠黑色素瘤细胞中的表达

目的　观察腺病毒介导的LacZ基因转移在B1 6细胞的转导效率。方法　腺病毒介导的LacZ基因转导B1 6细胞。结果　当MOI为 50～ 1 0 0 ,即可获得较高的转导效率 ,达 90 %± 1 %。结论　腺病毒介导的基因转移在B1 6细胞能获得较高的转导效率和目的基因的有效表达。提示腺病毒载体作为一种高效的基因转移载体 ,在肿瘤的基因治疗中有着良好的应用前景     

SPA单结构域突变体组合噬菌体文库的构建及体外进化筛选

目的 使用人免疫球蛋白G( IgG)对金黄色葡萄球菌蛋白A( SPA)单结构域突变体组合文库进行体外分子进化筛选,判断不同突变体组合的特异结合优势,探索优势组合分子结构与功能间的关系. 方法 通过 Overlap PCR获得SPA中A和C单结构域突变体片段组合构成的噬菌体文库,再使用人IgG对文库进行体外亲和筛选,期望通过对特定结合分子的定向改造及体外进化获得具有高结合优势的组合分子. 结果 成功构建符合体外筛选要求的SPA单结构域A在29、30位氨基酸定点突变文库( A1 )、SPA单结构域C在36、37位定点突变文库( C1 )和SPA单结构域A在37位后插入3个氨基酸随机肽( AI37 )、SPA单结构域C在20位后插入3个随机连接肽( CI20 ) ,将A1、C1随机组合构建的噬菌体展示文库命名为库A1C1,将AI37、CI20随机组合构建的噬菌体展示文库命名为库AI37 CI20. 两个文库各自经过4、5轮亲和筛选,文库进化完全.Phage-ELISA高光密度值的单克隆,测序结果分析为A(Q29K30) A(I29I30)和AI-TQS A. 结论 通过定向改造技术获得了高结合能力的定点突变分子A(Q29K30) A(I29I30)和插入突变分子AI37-TQS A,为Ig结合分子的定向改造及具有新的Ig结合特性的重组Ig结合分子的进一步研究奠定了基础.