Spoligotyping和MLVA用于71株浙江省结核分枝杆菌临床分离株基因分型的初步研究

目的初步探讨寡核苷酸分型(Spoligotyping)和多位点数目可变串联重复序列分析(MLVA)用于浙江省结核分枝杆菌临床分离菌株的分型,以初步了解浙江省结核分枝杆菌的基因型特征。方法随机选取浙江省结核分枝杆菌临床分离菌株,常规培养,收集菌体,提取基因组DNA。采用聚合酶链反应(PCR)扩增整个DR区进行Spoligotyping分型,同时分别扩增15个VNTR位点进行MLVA分型。聚类分析采用BioNumerics软件。统计学分析采用卡方检验。结果对70株菌进行了基因分型,Spoligotyping结果显示,可分为2个基因群,即北京家族(Beijingfamily)和非北京家族(Non-Beijingfamily),分别占70和30,49株北京家族菌株中,89.8为典型北京家族;MLVA结果显示,可分4个基因群,分别为Ⅰ群占8.5,含5个基因型,Ⅱ群占18.3,含13个基因型,Ⅲ群占70.4,含38个基因型,Ⅳ群占2.8,含2个基因型。两种方法对菌株的基因分型结果非常吻合,Spoligotyping分型为北京家族的菌株均分布在MLVAⅢ型中,非北京家族菌株的基因多态性,分属于MLVAⅠ、Ⅱ和Ⅳ型。MLVA将70株菌分为58个基因型(含53个独特基因型),而Spoligotyping只分为18种基因型(含12个独特基因型)。结合对临床一线4种药物的耐药检测结果分析,两种方法的分型结果均显示北京家族菌株中表现为全敏感者71.4(35/49),表现为耐药者为28.6(14/49);而非北京家族菌株中表现为全敏感者为66.7,表现为耐药者为33.3,经卡方检验,两者间的差异无统计学意义(χ2=0.158,P>0.05)。结论初步证实浙江省结核分枝杆菌存在明显的基因多态性,主要流行型为北京家族。北京家族与耐药无明显相关性。MLVA株水平鉴定能力明显高于Spoligotyping,尤其是在鉴别北京家族菌株上具有明显的优势。     

代浆全血的配制

为了解决抢救大面积灼伤重危病人血浆的需要及使剩余红细胞得到充分利用,我们利用现有的设备条件,将鲜血分浆后剩余之红细胞制成代浆全血,经临床应用,效果较好,介绍如下。目前分浆后剩余红细胞,除了可以配制红细胞悬液外,尚可用理化方法制备珠旦白抗休     

新形势下儿科护理带教体会

为使护生充分认识儿科护理的独特性与复杂性,我们采用多种形式的教学方法,取得良好效果,现报告如下。1强调儿科特点,巩固护理行为准则1.1由护士长带领护士参观环境,介绍科室情况、有关规章制度、儿科专业特点及护理要求,强化护士素质和职业道德,让护生认识到作为儿科护理人员不仅要有端庄的仪表、高尚的医德、精湛的技术,还要有爱心。1.2宣传有关的护理工作制度和法规,加强护生的法律意识,遵守各项规章制度,不做超越权限范围的事,为患儿提供高品质服务的同时实现自我保护。2多种形式带教,培养护生的综合能力2.1带教老师统一安排护生班次,使…     

中国结核分枝杆菌复合群菌株pstS1基因中人T/B细胞表位多态性分析

目的研究我国结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTBC)菌株中pstS1基因及其中的人T细胞和B细胞表位区的序列多态性。方法选取180株临床分离MTBC菌株及11株世界不同来源的BCG疫苗株,PCR扩增其pstS1基因并测序后,结合已经公布的1株牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)及3株BCG菌株的pstS1基因序列,与从免疫表位数据库(Immune Epitope Database,IEDB)中查询到的表位序列进行比对和分析,总结该基因序列中的变异特征。结果在所有菌株中,共发现2个单碱基插入造成的移码突变(Frame-shift mutation)和4个单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)位点,共造成79.17%(19/24)的B细胞表位和65.22%(15/23)T细胞表位区的序列变异。pstS1基因的dN值为0.000 14,其中T细胞表位区与非T细胞表位区的dN值分别为0.000 17和0.000 05,B细胞表位区与非B细胞表位区的dN值分别为0.000 23和0,由于未发现同义突变位点,所有序列区的dS值均为零。结论 MTBC菌株的pstS1基因具有较高的序列多态性,且其中的T、B细胞表位区具有更高的多态性水平。     

大剂量莨菪浸膏片治疗小儿神经性尿频121例分析

小儿神经性尿频是儿童时期较为常见的一种功能性疾病。它虽非器质性病变 ,且预后尚好 ,但常被误诊为泌尿系感染而反复应用多种抗生素治疗 ,造成药源浪费 ,副反应明显增多。为此 ,1997年～ 2 0 0 2年 ,我们对 12 1例神经性尿频患儿试用大剂量莨菪浸膏片治疗 ,取得了显著疗效 ,且无明显副作用。现报告如下。临床资料 :本组 12 1例神经性尿频患儿中 ,男 86例 ,女 3 5例 ;年龄 2～ 8岁 ,其中 5～ 8岁者 3 2例 ,病史 2天～ 9个月。其中91例曾误诊为泌尿系感染 ,并反复多次应用抗生素治疗无效。12 1例均按以下标准诊断 :1有尿频症状 ,隔 2 0～ 60…     

新疆出血热驱蜱灭蜱方法的研究

<正> 亚洲璃眼蜱(Hyalomma asoiaticum)系新疆出血热(蜱传出血热)的传播媒介。为了配合出血热的防制,达到个体防护的目的,特收集目前国内现有的杀虫剂,对亚洲璃眼蜱进行驱、灭蜱效果的研究,从中选出1种有驱蜱及6种有灭蜱效果的药物,为防制出血热个人防护提供有效手段。1 实验室内试验     

VNTR技术用于安徽省耐药结核分支杆菌基因分型的初步研究

目的 探讨VNTR（variable number of tandem repeat）技术在安徽省耐药结核分支杆菌基因分型中的应用。方法初步选取13个分型效果较好的VNTR基因位点。应用聚合酶链反应（PCR）和琼脂糖凝胶电泳，建立检测耐药结核分支杆菌DNA指纹多态性的方法，分析耐药结核分支杆菌DNA多态性。结果共对78株耐药结核分支杆菌的13个VNTR位点进行了检测，根据这些菌株的指纹多态性特征，共分为4个基因型（Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型），分别为Ⅰ型3．8％（3／78）、Ⅱ型6．4％（5／78）、Ⅲ型10．3％（8／78）、Ⅳ型所占比例最大，为79．5％（62／78）。在Ⅳ型菌中，耐药菌株主要为耐多药（结核分支杆菌至少耐异烟肼和利福平两种药）和单耐利福平菌株，其所占比例分别为45．8％和22．6％。结论本资料分析表明，安徽省耐药结核分支杆菌的传播似以Ⅳ型菌株为主，应加强此型菌株流行的监控。     

护理干预对哺乳期急性乳腺炎疗效分析

目的:探讨护理干预对哺乳期急性乳腺炎的临床疗效.方法:选取2015年5月-2016年5月于我院进行治疗的哺乳期急性乳腺炎患者128例,随机分为对照组和观察组各64例.对照组行常规护理模式,观察组在对照组的基础上行优质护理干预.观察并比较两组治疗效果.结果:观察组总有效35.94％,对照组总有效20.31％,观察组疗效优于对照组,P＜0.05,差异具有显著性.结论:对哺乳期急性乳腺炎初产妇在治疗中配合有效的护理,显著提高治疗效果,值得临床推广及应用.     

广东登革Ⅰ型病毒株变异性的初步研究

Objective　To study the variation of Guangdong dengue-1 virus strains. Methods　Partial nucleotide fragments in E/NS1 gene junction of 2 degue-1 isolates(LD-25, LD-26) and 1 positive sera sample (95-142) of Guangdong province collected in different years, were amplified by RT-PCR and sequenced. The 240bp sequences of the above-mentioned fragments were compared with those of other well-characterized dengue-1 strains. A divergence of 6% between the nucleotide sequences was taken as an indication for dengue virus subtype classification. Results　LD-25 and LD-36 or 95-142 may belong to two different subtypes. Dengue strains of LD-25 (1985), Thai(1980) and Taiwan of China(1987,1988) could fall into the same subtype in the light of their sequence homology ranging from 97.1% to 98.8%. The sequence homology among LD-36(1991), 95-142(1995), Philippine(1988) and three other dengue-1 virus strains ranged from 97.5% to 100%, indicating that they belonged to another subtype of dengue virus. Possible source of infection of these dengue virus strains is discussed. Conclusion　Guangdong dengue viruses may have not only one source.     

一种鉴定结核分枝杆菌"北京家族"菌株的新方法

目的 研究结核分枝杆菌"北京家族"菌株鉴定的新方法——RD105缺失检测的可行性.方法 分别应用间隙寡核苷酸分型(Spoligotyping)和RD105缺失检测两种方法对结核分枝杆菌进行"北京家族"的鉴定,比较分析两种方法进行菌株鉴定结果的差异.结果 共对来自北京、福建、新疆和吉林的342株结核分枝杆菌临床分离菌株进行了鉴定,"北京家族"菌株261株,占76.32%.非"北京家族"菌株81株,占23.68%.两种方法鉴定结果的符合度达100%.结论 简单、快速的新方法——RD105缺失检测可替代原始经典方法Spoligotyping用于结核分枝杆菌"北京家族"菌株的鉴定.