2007-2008年北京地区儿童手足口病的病原学分析

目的 通过病毒分离和鉴定了解2007-2008年春夏北京地区手足口病的病原学特征,为手足口病防治工作提供科学依据.方法 分别于2007年4-8月及2008年5-9月收集256例手足口病患儿的咽拭子和疱疹液标本共356份,其中咽拭子255份(包括10份重症患儿标本),疱疹液标本101份.将所有标本接种Vero细胞进行病毒分离,分离阳性的毒株用RT-PCR进行鉴定;对10份重症患儿标本除病毒分离外,还直接进行RT-PCR检测病毒核酸.结果 256例被检测患儿中188例为肠道病毒阳性,阳性率为73.4%.356份标本中共分离到239株肠道病毒,总阳性率为67.1%.其中疱疹液标本分离阳性率为75.2%(76/101),咽拭子标本分离阳性率63.9%(163/255),但两种标本接种细胞后出现病变的速度没有差别.重症患儿标本病毒分离阳性率50%(5/10).2007年的45例病毒分离株经肠道病毒通用引物PCR检测均为阳性,分型PCR显示,其中CA16占95.6%(43/45),EV71占4.4%(2/45);而2008年的143例病毒分离株经肠道病毒通用引物PCR检测142例为阳性,PCR分型显示,EV71占82.4%(117/142),CA16占16.8%(24/142).10份重症患儿标本直接分型检测结果均为EV71.结论 北京儿童手足口病病原体以EV71和CAV16为主,2007年与2008年流行的优势型别不同,2007年主要为CA16,而2008年主要为EV71.本组重症手足口病患儿的病原均为EV71.     

多病原感染继发噬血细胞综合征1例

目的 探讨儿童感染继发噬血细胞综合征的诊治及预后.方法 对1例多病原感染继发噬血细胞综合征的患儿进行临床分析,并复习相关文献.结果 该例患儿以肺炎住院,反复高热、存在粒细胞缺乏及贫血,骨髓中发现噬血细胞、NK细胞活性降低、可溶性IL-2R (CD25)≥2 400 U/ml,噬血细胞综合征相关基因突变分析报告未提示有病理意义的突变,感染相关性噬血细胞综合征诊断成立.予丙种球蛋白及地塞米松治疗.后因半乳甘露聚糖(GM)试验显著升高,监测胸部影像学检查逐渐出现真菌性肺炎表现,加用抗真菌治疗,病情渐趋好转.入院后多次呼吸道分泌物直接免疫荧光法7项病毒抗原检测均无阳性发现,血清学检查结果也不支持EB病毒、柯萨奇病毒、埃柯病毒、HIV、巨细胞病毒(CMV)、风疹病毒、单纯疱疹病毒I、弓形体及肺炎支原体感染,后经PCR、实时PCR及Luminex技术平台检测证实存在甲型H1N1流感病毒及呼吸道合胞病毒B亚型合并感染.结论 对感染相关性噬血细胞综合征,除对症、支持治疗外,按HLH-2004方案,同时兼顾并发症的治疗.预后可能取决于有无基础疾病、诊断的早晚及是否出现严重并发症等.     

肠道病毒EV71及CA16在不同细胞系中细胞病变作用的研究

目的研究CA16和EV71在4种细胞系中细胞病变作用的差异.方法随机选择滴度相似的EV71轻症、EV71重症和CA16轻症毒株各1株,分别感染RD、Vero、U251和SY5Y细胞,比较3株病毒在细胞病变的形态及程度、感染后的细胞存活率、病毒在细胞中的复制水平和病毒所致凋亡蛋白相关mRNA的表达水平等方面的差别.结果3株病毒的感染在同一细胞系中表现相似.镜下从形态学上无法对三株病毒加以区别;感染后病毒载量均表现为从高到低依次为Vero、RD、SY5Y细胞到U251细胞的顺序;病毒感染后细胞存活率的顺序与细胞内复制水平与相反,两者之间存在类似负相关的趋势.3株病毒的感染在3种细胞系中均有凋亡蛋白caspase-8、9和3相关mRNA的表达,提示可能3种细胞系中凋亡启动的途径相同.结论细胞水平的感染,提示这两种病毒感染所致临床表现的差异性并非单独由病毒所决定.     

儿童腺病毒肺炎临床及相关危险因素分析

目的通过研究腺病毒肺炎患儿临床表现和各项指标,探讨这些因素对该病预后的影响。方法回顾分析2008年6月-2011年4月52例确诊为腺病毒肺炎患儿的临床资料。并采用单因素和Logistic回归分析,筛选出影响腺病毒肺炎发生呼吸衰竭的可能危险因素。结果 52例患儿男39例,女13例,年龄3岁以下多发。病毒分型主要为3型和7型。24例患儿发生了呼吸衰竭,其中有3例死亡。对15项变量行单因素分析结果显示有8项因素有统计学意义。Logistic多因素分析显示:病变累及肺叶2个、器官功能不全、早期激素治疗是腺病毒肺炎发生呼吸衰竭的独立危险因素。结论动态监测、早期发现、早期干预是腺病毒肺炎减少死亡、改善预后的关键。     

人腺病毒重组研究进展

人腺病毒(HAdV)是急性呼吸道感染、腹泻、急性眼角结膜炎等多种疾病的常见病原体。许多研究表明HAdV基因组易发生基因重组, 进而形成新的基因型别, 迄今已报道的104个型别中53～104型为重组形成的新基因型, 在全球范围内引起多次疫情, 对疾病的防控提出新挑战。目前对其重组研究较少, 亟需深入研究以揭示重组机制及临床意义。     

B亚型呼吸道合胞病毒毛细支气管炎临床研究

目的 了解呼吸道合胞病毒(RSV)的亚型感染情况及其所致毛细支气管炎的临床特点。方法 对121例临床诊断为毛细支气管炎患儿的鼻咽分泌物采用巢氏PCR方法进行RSV及亚型检测，并分析亚型感染患儿的临床资料。结果 ①：RSV阳性87例(71．9％)，其中A亚型60例，B亚型27例；②Bierman’s病情评分显示B亚型毛细支气管炎的临床症状较A亚型轻，恢复快；③A、B亚型RSV感染毛细支气管炎患儿在发病年龄、发热、血气、胸片上无显著性差异；④与间接免疫荧光等方法相比较，巢氏PCR是检测RSV灵敏度较高的方法。结论 B亚型RSV毛细支气管炎的临床症状较A亚型为轻。     

血清与骨髓中细小病毒B19的检测及相关疾病探讨

目的 建立巢式PCR方法进行血清与骨髓标本中细小病毒B19(PVB19)的检测，并比较两者间的差异，进一步探讨某些疾病与PVB19感染的可能关系。方法 对住院治疗的108例血液病患儿、133例正常儿童以及23例成人血液病患者的血清标本应用巢式PCR进行PVB19 DNA检测。108例患儿中有37例同时收集血清与骨髓涂片进行PCR扩增，另外有37例同时应用ELISA方法进行PVBl9特异性IgM检测。结果 ELISA实验中的37例有2例(2／37，5．4％)PVB19特异性IgM阳性。而巢式PCR检测阳性为11例(11／37，29．7％)。血液病患儿PVB19 DNA总阳性率为27．8％，其中ITP患儿中阳性率为26．9％，白血病患儿中阳性率83．3％；成人医院收集的血液标本中阳性率为26．1％；正常儿童中未检测到PVB19 DNA。同时收集了血清与骨髓涂片的37例标本中血清PVB19 DNA阳性率27．0％(10／37)，骨髓涂片总检出率为37．8％(14／37)。结论 巢式PCR方法与ELISA实验比较具有灵敏度高、特异性强的特点，而血清标本的敏感性要低于骨髓标本，在ITP、白血病等患者中PVB19有较高的检出率。     

北京地区新生儿先天巨细胞病毒感染状况研究

目的评估北京地区新生儿先天性巨细胞病毒(CMV)感染状态及其对新生儿的危害。方法选择2004年11月至2008年3月在北京居住、怀孕12周之内的孕妇,分别于孕早期和孕中期进行血清CMV IgG定量和CMV IgM定性检测;活动感染者接受CMV IgG亲和力、CMV pp65抗原血症和白细胞CMV巢式聚合酶链反应(nPCR)检测;白细胞CMV DNA阳性孕妇接受羊水CMV nPCR检测。所有入选孕妇分娩的新生儿出生后均检测脐血CMV nPCR,阳性者于生后2周内复查尿CMV nPCR。结果本研究共收入孕妇1752例,新生儿1756例;孕期血清学检查CMV活动感染51例,占2.91%(95%CI 2.12%～3.70%),其中原发活动感染2例,占全部孕妇的0.11%(95%CI 0.10%～0.41%);CMV nPCR阳性的孕期活动性感染占0.34%;活动感染孕妇羊水CMV nPCR检测全部阴性;新生儿先天性CMV感染发生率0.23%(95%CI 0.06%～0.58%)。所有先天性CMV感染新生儿出生时均为无症状性感染。结论北京地区CMV感染垂直传播率低,先天CMV感染发生率0.23%,未见到症状性先天性CMV感染患儿。     

我国人副流感病毒3型HN基因的遗传变异及进化特征分析

目的:基于血凝素-神经氨酸酶蛋白(hemagglutinin-neuraminidase,HN)基因分析我国流行人副流感病毒3型(human parainfluenza virus 3, HPIV3)的基因变异规律和进化特征。方法:采用多重荧光PCR方法对2007—2020年5个省市(北京、浙江、安徽、河南、湖南)急性...     

血清与骨髓中细小病毒B19的检测及相关疾病探讨

目的 　建立巢式PCR方法进行血清与骨髓标本中细小病毒B1 9(PVB1 9)的检测 ,并比较两者间的差异 ,进一步探讨某些疾病与PVB1 9感染的可能关系。方法 　对住院治疗的 1 0 8例血液病患儿、1 33例正常儿童以及 2 3例成人血液病患者的血清标本应用巢式PCR进行PVB1 9DNA检测。 1 0 8例患儿中有 37例同时收集血清与骨髓涂片进行PCR扩增 ,另外有 37例同时应用ELISA方法进行PVB1 9特异性IgM检测。结果 　ELISA实验中的 37例有 2例 ( 2 / 37,5 4 % )PVB1 9特异性IgM阳性。而巢式PCR检测阳性为 1 1例 ( 1 1 / 37,2 9 7% )。血液病患儿PVB1 9DNA总阳性率为2 7 8% ,其中ITP患儿中阳性率为 2 6 9% ,白血病患儿中阳性率 83 3% ;成人医院收集的血液标本中阳性率为 2 6 1 % ;正常儿童中未检测到PVB1 9DNA。同时收集了血清与骨髓涂片的 37例标本中血清PVB1 9DNA阳性率 2 7 0 % ( 1 0 / 37) ,骨髓涂片总检出率为 37 8% ( 1 4 / 37)。结论 　巢式PCR方法与ELISA实验比较具有灵敏度高、特异性强的特点 ,而血清标本的敏感性要低于骨髓标本 ,在ITP、白血病等患者中PVB1 9有较高的检出率