检测HCV抗体ELISA法的改进和应用

用基因工程表达的Core和NS3抗原,检测人血清中对HCV的抗体。对反应成份及过程作了改进,建立了快速的检测HCV抗体的ELISA法,全部检测过程只需一小时。用此抗原和改进的方法组建阳HCV抗体检测试剂盒与国际上第二代试剂盒比铰,为临床和筛选献血员检查HCV抗体,提供了快速、敏感和特异的方法.     

用基因工程表达的特异性抗原检测HCV抗体

用基因工程表达的 Core 和 NS3优势表位抗原,建立了检测 HCV-IgG 抗体的间接ELISA 方法。本方法与美国 Abbott 公司第二代诊断试剂盒比较,其特异性、敏感性一致.用此抗原所获的 ELISA 结果经免疫印迹法确认,进一步证实了该方法的准确性和可靠性。它适用于大规模筛选献血员和临床诊断,具有特异、敏感和方便等优点.     

EB病毒膜抗原的表达致转基因小鼠发生淋巴瘤的观察

目的：研究转基因小鼠EB病毒膜抗原（membrane antigen,MA）BLLF1基因的表达与淋巴瘤的关系,探讨EB病毒BLLF1基因作为淋巴瘤致癌基因的可能性。方法（1）观察4只EB病毒膜抗原（MA）BLLF1基因转基因首建鼠（Founder)淋巴瘤的发病时间、发病频率。（2）对发病小鼠进行解剖,观察肿瘤发生部位及特征,取肿瘤组织进行病理学观察。（3）用流式细胞仪分析MA在瘤细胞中的表达并用激光共聚焦显微镜分析MA在瘤细胞中的表达部位。（4）对瘤细胞用碘化丙啶（PropidiumIodide,PI)染色,用激光共聚焦显微镜观察细胞核形改变。（5）用异硫氰酸荧光素（FITC）标记的抗CD3单抗及抗SIgM多抗染色,分析瘤细胞的免疫表型。结果（1）4只转基因首建鼠中,2只MA表达阳性鼠分别在4月龄和8月龄时发生淋巴瘤,而2只MA表达阴性小鼠同期内未发生淋巴瘤,发病率为2／4。（2）组织病理学检查及瘤细胞免疫表型分析证明为T细胞淋巴瘤。（3）流式细胞仪分析表明MA在瘤细胞中表达,激光共聚焦显微镜观察证明MA表达部在细胞及细胞膜上。（4）碘化丙啶（PI）染色后,用激光共聚焦显微镜观察证明MA表达部位在细胞浆及细胞膜上。（4）碘化丙啶（PI）染色后,用激光共聚焦显微镜观察细胞核呈分叶状改变,符合癌细胞核形特点。结论EB病毒膜抗原（MA）BLLFI基因的表达可导致转基因小鼠发生淋巴瘤,提示EB病毒BLLF1基因可能为淋巴瘤的致癌基因。     

鼻咽癌患者血清中EB病毒四种特异性IgG抗体的测定

用间接免疫荧光法检测了２４例鼻咽癌患者与１１９例正常人血清中ＥＢ病毒４种特异性ＩｇＧ抗体，结果表明，正常人血清中ＥＢ病毒衣壳抗原（ＷＣＡ）的抗体效价为１：１６０以下，而鼻咽癌患者血清抗体效价为ｌ：１６０～１：５１２０，抗体阳性率均为１００％；正常人血清中ＥＢ病毒核抗原（ＥＢＮＡ）的抗体效价为１：８０以下，而鼻咽患者血清抗体价为１：８０～１：２５６０，阳性率均为１００％；正常人血清中ＥＢ病毒早期抗原（ＥＡ）的抗体效价为ｌ：１０，阳性率只有１３．３％，而鼻咽癌患者血清抗体效价为ｌ：２０～１：１２８０，阳性率为１００％；正常人血清中ＥＢ病毒抗原（ＭＡ）的抗体效价为１：１０～１：４０，阳性率为７１％，而鼻咽癌患者血清抗体效价为１：１０～１：３２０，阳性率为１００％．以上４种抗体中．ＶＣＡ、ＥＢＮＡ和ＥＡ抗体的效价和分布在正常人与鼻咽癌患者之间有明显差异（Ｐ＜姜勇男，男，３１岁，讲师．延吉市局子街２１号（１３３０００）０．０ｌ），ＥＡ抗体的阳性率也比正常人明显升高（Ｐ＜０．０ｌ），ＭＡ抗体的效价和阳性率与正常人相比无显著差异（Ｐ＞０．０５）。     

表达2型单纯疱疹病毒糖蛋白D的重组痘苗病毒对动物的免疫效果

用表达２型单纯疱疹病毒（ＨＳＶ－２）糖蛋白Ｄ的重组痘苗病毒（Ｒ－ｇＤ－Ｖ）免疫ＣＢＡ小鼠，通过间接免疫荧光（ＩＦ）（观察小鼠抗体滴度变化）和四甲基偶氮唑蓝法（ＭＴＴ）动态观察细胞毒性Ｔ细胞活性（ＣＴＬ），均见增高并检测了其产生的抗体对动物的保护作用。同时对Ｒ－ｇＤ－Ｖ和２型单纯疱疹病毒（ＨＳＶ－２）产生的二次ＣＴＬ活性进行了比较，结果表明，Ｒ－ｇＤ－Ｖ产生抗体３周达高峰（１：６４０），７周下降为１：３２０，抗体对病毒攻击动物有保护作用，其中和指数（Ｎ）为６３。Ｒ－ｇＤ－Ｖ在鼠体内产生初次ＣＴＬ８ｄ达高峰，１２ｄ后消失；二次ＣＴＬ持续８周之久，且ＣＴＬ活性明显高于初次。Ｒ－ｇＤ－Ｖ和ＨＳＶ－２相比较产生ＣＴＬ在统计学上有差异（Ｐ＜０．０５）。说明Ｒ－ｇＤ－Ｖ能引起体液免疫和细胞免疫，对动物有保护作用。     

人肉瘤病毒病因和免疫研究的新进展

在动物肿瘤的研究中,主要成绩之一是证明了某些自发的肿瘤是由病毒引起的。已发现的动物肿瘤病毒有一百多种,包括核糖核酸病毒(RNA病毒)和脱氧核糖核酸病毒(DNA病毒)。     

带EB病毒膜抗原基因痘苗病毒的构建和表达

以痘苗病毒天坛株为载体,构建表达EB病毒膜抗原的重组痘苗病毒株。在重组病毒的感染细胞膜上表达病毒的膜抗原。该抗原免疫家兔能产生抗体。     

人乳头瘤病毒与结直肠癌相关性的研究

结直肠癌病因及发生机制目前并不十分清楚.许多证据表明,人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)与人类肿瘤关系密切,因此HPV与结直肠癌的关系目前也越来越受到关注.为了解结直肠疾病中HPV感染情况,以明确HPV与结直肠癌的关系,我们对112例结肠镜活检标本进行了HPV检测,结果报道如下.     

Epstein-Barr病毒膜抗原在昆虫细胞中的表达

目的　探索影响EpsteinBarr病毒膜抗原(EBVMA)在昆虫细胞中表达的因素。方法　携有截去穿膜区序列的EBVMA基因的重组昆虫杆状病毒感染不同生长阶段及生长条件的昆虫细胞,应用免疫打点法及MasterImagineVDS影像摄录分析系统测定目的蛋白的表达量。结果　重组病毒感染不同生长阶段的细胞,MA表达量不同。处于对数生长早期的细胞表达量明显高于处于对数生长晚期及静止期的细胞。将不同生长阶段的细胞补充新鲜培养液,MA的表达量在原基础上有所提高。进一步研究表明,在感染重组病毒之前,更换新鲜培养液,同时在感染过程中补充葡萄糖,L谷氨酰胺等营养物质,会大大提高MA表达量。结论　细胞培养液中营养物质的消耗和代谢产物的蓄积是影响EBVMA在昆虫细胞中表达的主要因素。     

小儿白血病与N细胞

小儿白血病与ＮＫ细胞北京医科大学人民医院儿科于贵杰，李静华，刘桂兰，谷淑燕近年来人们日益重视ＮＫ细胞在抗肿瘤免疫中的作用。已公认ＮＫ细胞在肿瘤的发生与转移的免疫监视中起重要作用，与白血病的发生、发展及治疗的关系也受到重视。目前国内报道较少。本文就我们...