BTBD10基因的原核表达和多克隆抗体制备

目的 克隆和表达BTBD10基因,为进一步研究BTBD 10与胰岛细胞增殖功能提供工具.方法 制备兔抗BTBD10多克隆抗体,利用PCR方法扩增BTBD10全长,经Bam H I和Sal I酶切后连接入pET32a原核表达载体,将重组表达质粒pET32a-BTBD 10转化大肠杆菌ROSSET,经IPTG诱导表达蛋白,并以亲和层析的方法进行纯化,以纯化的BTBD10蛋白免疫新两兰大白兔,制备兔抗BTBD10的多克隆抗体,利用Western blot方法分析鉴定.结果 经双酶切和核酸序列分析证实重组质粒包含有正确编码的BTBD10读码框.SDS-PAGE电泳分析显示IPTG诱导后表达约85kU的融合蛋白,与预期结果相符.将纯化的融合蛋白免疫家兔,获得兔抗BTBD10多克隆抗体血清,Western blot结果显示该抗体特异性好,效价高,目的条带位于56kU处.结论 成功构建人BTBD10原核表达载体,并获得了高纯度BTBD10重组蛋白及兔抗BTBD10多克隆抗体.     

膜联蛋白1(ANXA1)功能的研究进展

膜联蛋白(Annexins)是一类钙依赖的磷脂结合蛋白超家族,研究发现其普遍存在于除细菌外的动物、植物及菌类多种生物体内,几乎所有器官中均有表达.ANXA1是该家族第一个被发现的成员,参与抗炎症反应、细胞分化和增殖、细胞死亡信号调控、凋亡细胞吞噬清除等许多细胞生命活动.本文对ANXA1功能的研究进展作一综述.     

增龄对Wistar大鼠胰岛b细胞胰岛素受体的影响

目的观察增龄对大鼠胰岛β细胞胰岛素受体的影响,探讨老年糖耐量受损的机制。方法将Wistar大鼠30只分为青年组（15只）和老年组（15只）,观察空腹血糖、空腹胰岛素、血清游离脂肪酸（FFA）、血脂的变化,同时进行高胰岛素．正葡萄糖钳夹实验观察胰岛素敏感性。两组大鼠胰腺石蜡切片,免疫荧光双标染色,标染胰岛β细胞上胰岛素受体,利用软件进行荧光强度分析。结果青年组和老年组的大鼠体重分别为（490．6±7．72）g和（728．9±7．57）g,有明显统计学意义（P〈0．01）;两组大鼠空腹血糖无明显差异,空腹胰岛素青年组为（0．59±0．14）ng／ml,老年组为（2．37±0．04）ng／ml,差异有统计学意义（P〈0．01）;空腹血清FFA水平青年组为（0．76±0．14）mmol／L,老年组为（1．51±0．04）mmol／L,有统计学差异（P〈0．01）;高胰岛素-正葡萄糖钳夹结果显示青年组大鼠葡萄糖输出速率为（26．02±2．83）mg／（kg·min）,老年组为（10．73±0．72）mg／（kg·min）,差异有统计学意义（P〈0．01）;使用稳态模型评估胰岛素分泌指数（HOMA—β）随年龄增长呈递增趋势,未达到统计学差异;而胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）在青年组和老年组分别为3．09±0．80和13．14±1．59,差异有统计学意义（P〈0．01）：免疫荧光染色显示老年组胰岛13细胞上胰岛素受体荧光强度减弱,荧光强度分析值青年组为63．55±5．20、老年组为23．26±2．50,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论随着年龄的增长,老年大鼠存在一定的胰岛素抵抗和代偿性胰岛素分泌增加,同时胰岛13细胞胰岛素受体减少,可能存在胰岛p细胞自身胰岛素抵抗。     

不同葡萄糖浓度对小鼠胰岛β细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨不同葡萄糖浓度对小鼠胰岛β细胞株MIN-6细胞增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度葡萄糖培养MIN-6细胞72h,MTT法观察不同浓度葡萄糖作用后MIN-6的细胞活性增殖率,Annexin V-FITC染色流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果低浓度（5.6mmol/L、11.1mmol/L）及高浓度葡萄糖（33.3mmol/L）作用72h后可抑制MIN-6细胞的生长;5.6mmol/L、11.1mmol/L、33.3mmol/L组处理72h后,细胞凋亡明显（P〈0.05）。结论低浓度（5.6mmol/L）及高浓度（33.3mmol/L）葡萄糖均可抑制小鼠MIN-6细胞增殖并使其凋亡增加。     

老年患者低血糖相关的心源性死亡2例并文献复习

目的 分析老年糖尿病患者低血糖导致心源性死亡的相关影响因素.方法 回顾性分析我院近年的2例老年人低血糖相关的心源性死亡病例,并复习国内外相关文献.结果 病例1,男性,80岁,糖尿病史13年,有陈旧心肌梗死及冠状动脉搭桥术后病史,使用较大剂量胰岛素及口服降糖药治疗,并在院外自行加用含磺脲类降糖药的中成药,致严重低血糖昏迷...     

BTBD10蛋白在大鼠胰岛和INS-1细胞株的表达

目的观察BTBD10蛋白在大鼠胰岛和INS-1细胞株的表达。方法利用构建好的BTBD10多克隆抗体,采用多重免疫荧光技术和激光共聚焦显微镜观察BTBD10在3月龄Fischer344大鼠的胰腺组织和大鼠胰岛β细胞株INS-1细胞中的表达。结果 BTBD10蛋白定位在大鼠胰腺组织的胰岛β细胞中,与胰岛素的定位重叠,而在胰腺的外分泌腺和胰岛α细胞中无表达,同时显示BTBD10定位在大鼠胰岛β株INS-1细胞的细胞浆中,表达量高。结论 BTBD10特异性表达于大鼠胰岛β细胞中,提示BTBD10可能与胰岛β细胞功能和胰岛素分泌有关。     

不同糖代谢状态成年人血红蛋白与血尿酸的关联分析

目的探讨不同糖代谢状态成年人群血红蛋白与血尿酸的关联。方法收集2018年1月至2021年12月在解放军总医院第二医学中心进行健康体检的成年人群的人口学资料及生化指标, 按血尿酸水平分为正常血尿酸和高尿酸血症2组, 采用Pearson相关分析、logistic回归分析血红蛋白(按四分位分为Q1～Q4 4个亚层)与血尿酸的关联性, 并分析年龄和糖代谢状态对血红蛋白与血尿酸关联的影响。结果共纳入研究对象33 183名, 年龄(50.6±10.0)岁。正常血尿酸组血红蛋白(142.61±14.24)g/L显著低于高尿酸血症组(151.79±11.24)g/L, 差异有统计学意义(P<0.001)。单因素Pearson相关分析显示, 血红蛋白与血尿酸呈正相关(r=0.444, P<0.001)。在调整相关混杂因素后, 多因素logistic回归分析显示, 血红蛋白与血尿酸之间存在关联, 与血红蛋白Q1组相比, 血红蛋白Q2～Q4组出现高尿酸血症的OR(95%CI)值分别为1.29(1.13～1.48)、1.42(1.24～1.62)和1.51(1.32～1.72), P趋势<0...     

成年人群血清C肽与胰岛素的相关性及对应值的分析

目的探讨成年人群血清C肽与胰岛素的相关性, 建立血清C肽对应的胰岛素值。方法横断面研究。回顾性纳入2017年1月至2021年12月于解放军总医院第二医学中心行健康体检的成年人群的临床资料, 根据糖尿病诊断标准将受试者分为2型糖尿病组、糖尿病前期组和正常血糖组。采用Pearson相关分析、线性回归分析和非线性回归分析等方法探讨血清C肽与胰岛素的相关性, 并建立血清C肽对应的胰岛素值。结果共纳入48 008名成年受试者, 男31 633名(65.9%), 女16 375名(34.1%), 年龄(50.1±9.9)岁(18～89岁);其中2型糖尿病组8 160例(17.0%), 糖尿病前期组13 263例(27.6%), 正常血糖组26 585名(55.4%)。3组血清空腹C肽[FCP, M(Q1, Q3)]分别为2.76(2.18, 3.47)、2.54(1.99, 3.21)和2.18(1.71, 2.79)μg/L;3组空腹胰岛素[FINS, M(Q1, Q3)]分别为10.98(7.57, 16.09)、10.06(6.95, 14.47)和8.43(5.86, 12.12)mU/L...