卵巢癌组织及腹腔积液中肿瘤干细胞的分离与培养

目的:从人卵巢癌组织和腹腔积液中分离培养肿瘤干细胞,分析细胞表型和化疗药物敏感性。方法:取卵巢浆腺癌患者的原发肿瘤组织及腹腔积液,通过无血清培养形成悬浮生长的球体。采用FCM及免疫荧光法检测干细胞标志物的表达。体外药敏实验检测获得的球体细胞和分化细胞对紫杉醇和卡铂的药物敏感性。结果:卵巢癌组织及腹腔积液中的卵巢癌细胞经无血清悬浮培养可以形成球体,后者具有CD44+CD24-表型并表达Oct4、Nanog及Sox2等干细胞标志物;腹腔积液及组织来源的球体细胞经血清培养液培养3周后发生分化,CD44+CD24-细胞比例分别下降至47%和3%;分化细胞对紫杉醇和卡铂的敏感性均显著高于球体细胞(P<0.01)。结论:卵巢癌的肿瘤干细胞属于CD44+CD24-细胞,后者表达Oct4等干细胞标志并具有显著耐药性。     

肿瘤诱导树突状细胞凋亡研究进展

树突状细胞作为最重要的抗原递呈细胞，在抗肿瘤免疫中起重要作用。恶性肿瘤可以通过分泌细胞因子、蛋白质、神经酰胺和神经节苷脂引起树突状细胞功能缺陷及数量减少，还可以诱导树突状细胞发生凋亡。因此，肿瘤相关抗原不能有效传递给T细胞，激活抗肿瘤免疫应答。利用某些蛋白和细胞因子对树突状细胞进行预处理，可以减少肿瘤诱导凋亡的发生，基因技术可以增强树突状细胞耐受凋亡的能力。现综述恶性肿瘤诱导树突状细胞凋亡的研究进展。     

显微授精技术的研究进展

显微授精指在显微镜直视下将精子注入卵子使其受精,包括精子种殖和精子显微注射两种,均为继常规IVF-ET技术后的重要进展。精子种植的基本步骤包括卵于制备、精子制备、精子种植及孵育观察等。许多因素可影响精子种植的成功,正确控制这些因素对提高受精率及防止不良后果的发生甚为重要。精子显微注射的卵子损伤率大,受精率低,其技术相对欠成熟。显微授精不仅可作为部分常规IVF失败患者的治疗手段,而且是生殖医学研究的有用工具。     

放线菌素D,环磷酰胺,氨甲喋呤序贯化疗对卵巢功能的影响

目的　探讨放线菌素－Ｄ、环磷酰胺、氨甲喋呤（ＡＣＭ）三联序贯方案治疗滋养细胞肿瘤时对卵巢功能的影响。方法观察了１７例滋养细胞肿瘤化疗前后月经、基础体温、血绒毛膜促性腺激素 亚单位（ ｈＣＧ）、雌二醇（Ｅ_２）、卵泡刺激素（ＦＳＨ）、黄体生成素（ＬＨ）的变化，并对部分病例做了卵巢活检进行形态学研究。结果 ＡＣＭ化疗对卵巢功能影响主要为月经量减少、黄体功能不全、Ｅ_２降低、促性腺激素增高。形态学观察表明卵巢各级卵泡数量减少但雌激素受体无改变。随着化疗的结束，上述功能多数可在一年内自行恢复正常。结论 ＡＣＭ化疗仅轻度抑制卵巢功能，主要影响卵巢内卵泡的生长与发育，说明对有生育要求的年轻患者首选ＡＣＭ化疗是合适的。     

侧群细胞及其在干细胞研究中的应用

肿瘤干细胞学说的提出为肿瘤的治疗提供了新的靶点和方向。尽管已经从白血病、乳腺癌、脑肿瘤等肿瘤中初步分离鉴定出肿瘤干细胞，但是还有许多恶性肿瘤由于肿瘤干细胞表面标记尚不清楚而无法鉴定，通过侧群细胞(side population cells，SP) 分选来初筛肿瘤干细胞，方法简便、有效，正被越来越多地应用。     

宫颈癌S—100^＋Langerhans细胞的检测

Langerhans cells (LC) in the normal cervix (control, 19 cases) and cervical carcinoma in situ (CIS, 19 cases), interdigitating cells (IDC) and follicular dendritic cells (FDC) in obturator lymph node draining infiltrating cervical carcinoma (30 cases) were quantitatively assayed by ABC immunohistochemical method using anti-S-100 protein antibody. The results indicated that S-100+ LC in situ, S-100+ IDC and S-100+ FDC in obturator lymph node showed dendritic features with a specific distribution. The number of LC in situ in infiltrating carcinoma increased significantly as compared with CIS and control groups. There was no change in LC number between Grades II and III of squamous cell carcinoma. The number of IDC was significantly less in Stage II than in Stage I lesion. FDC number in different depths of invasion and clinical stages showed no obvious change. The results suggest that progression of cervical carcinoma is closely related to decrease in LC in situ and IDC in regional lymph node. Predominant immune response of the host to cervical carcinoma should be cellular immune.     

子宫颈人乳头状瘤病毒感染的流行病学特征

人乳头状瘤病毒 (HPV)是一种无包膜的小DNA病毒 ,具有强烈嗜上皮性、高度组织和宿主特异性 ,可致人类皮肤和黏膜异常增生。目前 ,已知的HPV有 10 0多种 ,其中 30余种可从受感染的生殖道组织中分离出来。根据病毒致癌性的大小分为两大类 :(1)低危型HPV(非癌相关型 ,LRHPV) :包括HPV6、11、4 2、4 3和一些新型HPV ;感染LRHPV ,可导致轻度宫颈上皮内瘤样变 (CINⅠ )和部分中度宫颈上皮内瘤样变(CINⅡ ) ,HPVDNA常为二倍体和多倍体 ,这种病变多能自行消退 ,几乎未见到感染LRHPV者发展为重度宫颈上皮内瘤样变 (CINⅢ )或宫颈…     

卵巢上皮性癌患者28例血清和腹腔液VEGF测定及其诊断价值初探

目的　测定卵巢上皮性癌 (OEC)患者血清和腹腔液中VEGF蛋白水平 ,并探讨它的诊断价值。方法　采用酶链免疫吸附试验检测 2 8例OEC患者血清和腹腔液中VEGF蛋白水平 ,利用ROC曲线分析灵敏度和特异性。结果　①OEC组血清VEGF蛋白水平分别显著高于健康志愿组 (中位数 4 6 3 2ng/Lvs 194 5ng/L ,P <0 0 5 )及良性肿瘤组 (中位数 4 6 3 2ng/Lvs 2 0 4 1ng/L ,P <0 0 1) ,良性肿瘤组与健康志愿组之间无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;OEC组腹腔液VEGF蛋白水平极显著高于良性肿瘤组 (中位数为 2 6 30 5ng/Lvs 2 4 1 1ng/L ,P <0 0 0 1)。②ROC曲线显示 ,OEC血清VEGF测定特异性在 6 0 %～ 70 %范围内 ,其灵敏度可达 70 %～ 80 % ;OEC腹腔液VEGF测定特异性在 90 %～ 10 0 %范围内 ,其灵敏度可达 90 %以上。结论　OEC患者血清和腹腔液VEGF水平显著升高 ;血清和腹腔液VEGF测定 ,尤其是腹腔液VEGF ,可能有望成为OEC诊断的辅助性指标     

胎儿宫内行为的研究

对胎儿宫内行为的研究包括研究胎儿自发活动和受外界刺激后活动两大类.一些实验证实高危组胎儿行为状态较之正常胎儿发生改变,可通过观察胎儿宫内行为来评估胎儿安危.通过观察胎儿对不同外界刺激的反应来研究胎儿宫内早期智力发育.