人感染高致病性H5N6禽流感病毒的分子生物学特征

目的分析2014-2015年3例新型人感染高致病性禽流感(HPAI)H5N6毒株的血凝素(HA)与神经氨酸酶(NA)基因序列,探讨该病毒的遗传变异及分子生物学特征。方法收集Gen Bank、全球共享禽流感数据倡议组织(GISAID)及浙江大学传染病诊治国家重点实验室提供的H5N6病毒基因序列,利用生物信息软件MEGA6.0及Net Nglyc服务器对基因序列进行遗传进化和分子变异特征分析。结果 3例感染HPAI-H5N6患者毒株的HA与NA氨基酸序列的同源性分别为96.5%~98.7%和90.1%~98.2%;HA氨基酸序列比对分析发现A/Guangzhou/39715/2014(H5N6)和A/Sichuan/26221/2014(H5N6)与A/duck/Eastern China/1111/2011(H5N2)同源性最近,分别为97.7%和98.5%;A/Yunnan/0127/2015(H5N6)与A/muscovy duck/Vietnam/LBM631/2014(H5N1)同源性最近(97.2%);NA氨基酸序列比对分析发现A/Guangzhou/39715/2014(H5N6)和A/Yunnan/0127/2015(H5N6)与A/swine/Guangdong/K6/2010(H6N6)同源性最近,分别为97.2%和97.6%,A/Sichuan/26221/2014(H5N6)与A/duck/Guangdong/S3073/2010(H6N6)同源性最近(97.4%);进化树分析显示3例患者毒株处于2个不同的分支;HA基因包含有S137A、T160A等突变,糖基化分析显示有6~7个N-糖基化位点。结论新型人感染HPAI-H5N6病毒是一种重组病毒,其HA基因来源于亚洲禽类H5亚型,NA基因来源于亚洲禽类H6N6;HA基因位点突变及N-糖基化改变可能有助于增强对人类的感染。     

甘草抗氧灵的生殖毒性研究

本研究采用整体动物实验，选用不同的生殖毒性检测指标，对国内首次从植物中提取的天然抗氧化剂──甘草抗氧灵进行了生殖毒性研究。结果发现，甘草抗氧又对雌鼠生殖未产生不良好影响，对仔鼠无致畸作用，对雄鼠的生精过程，受精亦未产生不良影响。实验表明，该物质不具有生殖毒性。     

早期落下灰内照射生物效应

本文的目的是研究狗的内照射损伤效应与甲状腺吸收剂量之间的关系.实验用93只健康成年狗(对照35只,实验58只),一次食入不同量(0.024-89mCi)的早期落下灰,铀混合裂变产物或碘-131.估算狗甲状腺吸收剂量为5.0×10²～1.7×10⁵拉德,观察时间为中毒后6.5～7.8年.     

消痈饮加阿是穴艾灸治疗早期肛痈60例

目的 :观察消痈饮加阿是穴艾灸治疗早期肛痈的临床疗效。方法 :治疗组 60例用消痈饮内服外洗 ,配合阿是穴艾灸 ;对照组 4 0例 ,静脉滴注青霉素和甲硝唑。用药 10天比较两组药物疗法对早期肛痈的疗效。结果 :治疗组总有效率为 90 % ,对照组总有效率为 67 5 % ,两组比较差异显著 (P <0 0 5 )。结论 :消痈饮加阿是穴艾灸治疗早期肛痈疗效显著 ,且无毒性副作用     

自拟参赭升降消痔汤治疗肉痔60例

目的：探讨参赭升降消痔汤对内痔的疗效。方法：采用自拟参赭升降消痔汤（人参、代赭石、升麻、蒲黄等）治疗内痔60例，总有效率为90％，提示本方有升阳缩肛、降浊通幽、散结消痔的功效。     

131I及132I在大鼠甲状腺的比较效应

甲状腺吸收剂量¹³¹I各组为25,59、92Gy;¹³²I各组为7、14,29Gy。结果表明,各剂量组甲状腺滤泡长,宽乘积与对照组相比,除不给MTU的25Gy组(A₁)外,其他各组均随吸收剂量增加而相应减少(P<0.01,P<0.001)。甲状腺重量/体重与吸收剂量呈幂函数关系。     

浙江省急性腹泻患儿中肠道病毒检测分析研究

目的 探讨浙江省急性腹泻患儿的常见病毒组成.方法 采集5岁以下（≤5岁）急性腹泻患儿的811份粪便标本,采用ELISA方法检测A组轮状病毒（RV）,应用多重PCR方法同时检测B/C组RV、诺如病毒（NoV）、札如病毒（SaV）、肠道腺病毒（AdV）、星状病毒（AstV）,并利用RT-PCR对RV的阳性标本进行G、P分型.结果 811份粪便样本中,RV、NoV、SaV、AdV 及AstV总的阳性比例分别为25.52%、18.37%、4.44%、2.71%和1.23%;65份（8.01%）混合感染标本中以RV和NoV混合感染所占比例最大（56.92%）; 116份RV的G/P分型中,G3型（37.93%）、G1型（32.75%）和P[8]型（57.76%）是RV的优势型别,且G3/P[8]（27.59%）是混合感染最主要的组合.结论浙江省五种常见腹泻病毒及其混合感染的流行状况,为临床治疗和疾病监测提供参考价值.     

手足口病患儿大便中病毒核酸检出时间观察

目的 观察手足口病患儿大便中肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)的持续存在时间;探讨手足口病患儿肠道排毒时间与病情严重程度的关系.方法 对113例EV71、CoxA16感染的手足口病患儿进行随访,每隔4～7d收集1次大便标本,用荧光聚合酶链式反应(PCR)法进行病毒核酸检测,直至大便病毒核酸转阴为止.并用Kaplan-Meier生存分析法进行分析.结果 113例患儿中,EV71阳性者65例,CoxA16阳性者44例,混合感染者4例.EV71组患儿在第1、4、6、10周的大便病毒核酸阳性率分别为100％、48.1％、17.2％、0;CoxA16组患儿在第1、4、6周的大便病毒核酸阳性率分别为95.5％、53.8％、0.两组大便病毒核酸阳性率的分布差异无统计学意义(x2=0.18,P＞0.05).EV71普通型组患儿在第1、4、6周的大便病毒核酸阳性率分别为100％、23.5％、0;EV71重症组患儿在第1、4、6、10周的大便病毒核酸阳性率分别为100％、62.4％、26.0％、0.EV71普通型组和重症组大便病毒核酸阳性率的分布差异有统计学意义(x2=5.689,P＜0.05).结论 手足口病患儿大便中病毒可存在较长的时间:EV71持续最长时问为10周;CoxA16持续最长时间为6周.感染EV71的手足口病患儿的肠道排毒持续时间与病情轻重相关.     

2013~2014年杭州地区手足口病柯萨奇病毒A6型和A10型VP1基因特征分析

目的了解2013~2014年杭州地区手足口病病原谱的分布,并对其病原基因特征进行分析。方法采集2013年3月至2014年4月手足口病患儿标本1 340例,提取病毒核酸,通过逆转录和PCR扩增肠道病毒VP1序列并测序,经Blast比对确定病毒基因型。对柯萨奇病毒A6型(CA-A6)和A10型(CA-A10)VP1全长序列进行同源性比对分析,并构建系统进化树。结果1 340例手足口病患儿标本中,肠道病毒检出阳性率为81.43%(1 090/1 340)。其中,CV-A6阳性率为41.04%,取代EV-71(14.48%)成为杭州地区检出阳性率最高的肠道病毒;CV-A10检出率(8.51%)也高于CV-A16(3.81%),列于第三位。同源性比对及系统进化分析显示,2013~2014年的25株CV-A6病毒核苷酸同源性为89.0%~99.7%,主要分布于G、H基因亚型;15株CV-A10病毒核苷酸同源性为95.3%~99.9%,分布于F、G基因亚型。结论 2013~2014年杭州地区儿童手足口病的主要病原体发生重大变化,CV-A6病毒成为最主要病原,CV-A10病毒也存在潜在威胁,需加强对其他肠道病毒的持续监测和分子特征分析。     

双重荧光定量RT-PCR法检测柯萨奇病毒A2和A5型

目的建立同时检测柯萨奇病毒A2和A5型(CVA2、CVA5)的双重实时荧光定量RT-PCR法。方法用Primer Express3.0软件设计高度特异性引物和荧光标记探针。通过优化反应体系,建立标准曲线,并评价双重荧光定量RT-PCR法的特异性、灵敏度和重复性。用建立的方法检测367例疑似手足口病患儿的粪便标本,并对阳性结果测序验证。结果荧光定量RT-PCR结果表明本实验所选的引物和探针可特异性检测并区分出CVA2、CVA5亚型,与其他肠道病毒的阳性核酸未发生交叉反应。该方法最低检测限达到102copies/m L,批内变异系数(CV)均1.49%。367份临床标本中CVA2型阳性23份,阳性率6.3%;CVA5阳性11份,阳性率3%,检测阳性结果与测序结果一致。结论成功建立了在单管中同时检测并鉴别CVA2、CVA5型的双重实时荧光定量RT-PCR检测方法。该方法具有较好的灵敏度、特异性、重复性,可用于CVA2、CVA5型引起的暴发疫情的快速筛查和手足口病的流行病学的研究。