四重荧光定量rRT-PCR法检测柯萨奇病毒B1、B2、B3及其他未分型肠道病毒

目的建立检测柯萨奇病毒(CoxB1、CoxB2、CoxB3)和其他未分型肠道病毒(EV)的四重荧光定量rRT-PCR法。方法用Primer Express 3.0软件设计特异性引物和探针,优化反应体系,评价建立的rRT-PCR法的灵敏度、特异性和重复性,并用该法检测535份病毒性心肌炎患儿粪便标本和43份咽拭子标本,对阳性结果测序验证。结果 rRT-PCR法检测CoxB1、CoxB2、CoxB3和其他未分型EV灵敏度均达103copies/mL,特异性较高,检测CV均<1.0%。578份临床标本用该法检测EV为153份,其中CoxB1病毒69份,CoxB2病毒18份,CoxB3病毒27份,其他未分型EV 39份。随机选取CoxB1、CoxB2、CoxB3病毒检测阳性样本各10例测序,均与该法的检测结果一致。结论建立的四重荧光定量rRT-PCR法可同时检测并区分CoxB1、CoxB2、CoxB3病毒和其他未分型EV,可用于此类病毒引起的暴发疫情的实验室应急诊断。     

国内高位肛瘘手术疗法近况

高位性肛瘘由于病变位置高，管道多弯曲复杂，常有支管、深部死腔，在治疗上难度较大，仍被列为外科领域难治性疾病之一。手术治疗是治疗肛瘘唯一可靠而有效的方法，现就近年国内常用手术方法综述如下。     

低位切开加五五丹引流治疗高位肛瘘60例

1997～ 2 0 0 0年 ,笔者以低位切开加五五丹引流治疗高位肛瘘 60例 ,并与切开挂线术治疗 60例进行对照观察 ,现报告如下。1　资料与方法1 .1　一般资料　 1 2 0例均为高位肛瘘住院患者 ,根据《中医病证诊断疗效标准》中的肛瘘诊断标准[1] 确诊 ,随机分为 2组。治疗组 60例 ,男 42例 ,女 1 8例 ;年龄 1 8～ 5 6岁 ,平均 44岁 ;病程 1个月～ 8年 ;其中单纯性高位肛瘘 36例 ,复杂性高位肛瘘伴支管、半马蹄形 2 0例 ,全马蹄形 4例 ;外口数目最多为 5个。对照组 60例 ,男 36例 ,女 2 4例 ;年龄 2 0～ 5 0岁 ,平均 43岁 ;病程 1个月～ 1 0年 ;其中…     

中药治疗青壮年肠道实热型便秘合并急性肛裂90例

1998～ 2 0 0 2年 ,我们运用自拟清热通便汤内服合清肛消痔洗剂坐浴治疗青壮年肠道实热型便秘合并急性肛裂 90例 ,并与用三黄片合 1 / 5 0 0 0PP液坐浴治疗 60例进行对照观察 ,现报告如下。1　资料与方法1 1　一般资料　 1 5 0例均为门诊患者 ,随机分为2组。治疗组 90例 ,男 61例 ,女 2 9例 ;年龄2 0～ 40岁 ,平均 31岁 ;病程 9～ 2 6日 ,平均 1 4日。对照组 60例 ,男 38例 ,女 2 2例 ;年龄 1 9～ 41岁 ,平均 2 9岁 ;病程 9～ 2 5日 ,平均 1 5日。所有病例均符合国家中医药管理局 1 994年颁布的《中医病证诊断疗效标准》中便秘和肛裂的诊…     

双重荧光定量RT-PCR法检测肠道病毒方法的建立及应用

目的建立检测肠道病毒(EV)、B1型柯萨奇病毒(CVB1)的双重荧光定量RT-PCR法。方法用Primer Express 3.0软件设计特异性引物和探针,优化双重荧光定量RT-PCR反应体系,建立标准曲线并评价该法的灵敏度、特异性和重复性,用该法检测150份病毒性心肌炎患儿治疗前肛拭子和29份治疗后粪便标本,并与文献提供的PCR法进行对比。结果该法对EV、CVB1型肠道病毒检测具有较高特异性,检出限均为2×10-2TCID50/mL;具有较好的重复性,CV均<2.3%;标准曲线的相关系数(r2)分别为0.999和0.997,扩增效率(%)分别为98.809和96.564;179份临床标本用该法检测95份为EV病毒,其中59份为CVB1病毒,与文献提供的PCR法结果符合率为98.88%(P均>0.05)。结论建立的双重荧光定量RT-PCR法可同时检测并区分EV和CVB1型病毒,适用于病毒性心肌炎临床标本的检测。     

加味四君子汤对脾虚大鼠脏器的组织学及超微结构的影响

用应激过劳和饥饱法经过较长时间造成大鼠脾虚证模型。我们观察到脾庆大鼠的胃、肠、胸腺、脾脏、肝脏、肾上腺、心脏、卵巢等均发生明显的组织学改变；心、肠、胸腺等的超微结构也发生显著变化。加味四君子汤对上述各脏器的改变均有明显的恢复作用。     

ABI 7500与TL 988实时荧光PCR仪的性能评价

目的探讨ABI 7500与TL 988荧光定量PCR仪之间的性能差异。方法参照EP9-A2文件中的评价标准,两台仪器分别对5种不同浓度的甲型流感病毒阳性质控品进行检测,每个浓度测量20次,比对两种仪器的精密度、灵敏度,并评价两台仪器结果一致性。结果精密度:TL 988的变异系数(CV)从0.68%到1.52%,ABI7500的CV从1.93%到2.69%。两台仪器在检测高浓度的甲型流感病毒DNA时(107、106、105 copies/m L)差异无统计学意义(P>0.05),检测低浓度的病毒DNA时(104、103copies/m L)差异有统计学意义(P<0.05)。灵敏度:两种仪器检测浓度103copies/m L时,TL 988阳性检出率为100%,ABI 7500检出率为0。两种仪器检测数据相关性良好(r=0.998)。结论荧光定量TL 988 PCR仪器的性能(精密度和灵敏度)比ABI 7500好。     

手足口病肠道病毒检测中两种核酸提取方法的比较

目的对手工核酸提取法和全自动核酸提取仪法在手足口肠道病毒RNA荧光定量PCR检测中提取效率、重复性、耗时和成本进行比较。方法手工法试剂盒和全自动核酸提取仪对样本进行核酸提取,采用实时荧光定量PCR进行评价。结果提取仪法阳性46例,试剂盒法阳性43例,二者无明显差异（P〉0．05）。提取仪法重复性高于试剂盒法（CV3．5％〈5％）。核酸液终体积：提取仪法70μL,试剂盒法50μL。提取仪法耗时较短,成本较高;试剂盒法耗时较长,成本较低。结论两种方法结果无显著差异,均能满足临床需要,核酸提取仪法更具优势。     

新型甲型H7N9禽流感病毒HA与NA的进化分析

摘要：目的：研究2013年甲型H7N9流感病毒血凝素（HA）与神经氨酸酶（NA）的基因进化特征,探讨该病毒的遗传变异和分子特性。 方法：收集GenBank中已登录的禽流感病毒基因相关参考序列,利用生物信息学软件DNAMAN和MEGA 4.0对HA和NA基因序列进行进化分析,并利用Phymol 软件进行同源建模。 结果：2013年甲型H7N9流感病毒HA与NA的氨基酸序列与国际/国内参考毒株的同源性为95.7%~99.8%。同源建模发现该毒株HA的氨基酸序列发生了Q226L突变,NA上也发生了R294K和69 5N del氨基酸突变。 结论：新型甲型H7N9流感病毒的HA和NA基因序列与我国江浙地区和部分东亚国家的H7N9禽流感病毒参考株具有高度的同源性,该毒株HA与NA蛋白氨基酸序列发生的变异,可能是病毒致病性改变的原因之一。     

~(131)Ⅰ ~(132)Ⅰ致大鼠甲状腺损伤远期效应的形态计量学研究(腺体水平研究)

应用图像分析技术和形态计量学方法，测量了１３１Ⅰ、１３２Ⅰ致大鼠甲状腺损伤后（２０个月后）甲状腺三维体视学参数的变化。结果表明，各剂量组胶体和滤泡的体积密度及表面积密度均明显小于０剂量组，且随着吸收剂量的增大逐渐减小（Ｐ＜０．０１）；间质的体积密度则随着剂量的增大而明显增大（Ｐ＜０．０１）；各剂量组胶体和滤泡的比表面均明显大于０剂量组的值（Ｐ＜０．０１），说明胶体或滤泡的体积变小；由体积密度和表面积密度与吸收剂量的回归方程式计算的半增或半减剂量Ｄ５０，而推算出１３２Ⅰ相当于１３１Ⅰ的相对生物效应（ＲＢＥ）为１０～２５。即在相同的剂量照射条件下，１３２Ⅰ对甲状腺的损伤程度要比１３１Ⅰ大１０～２５倍。