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目的构建我国流行的周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶（BmCP）基因原核和真核表达质粒，为进一步研究奠定基础。方法从周期型马来丝虫虫体中提取总RNA，反转录成cDNA，设计合成引物，以eDNA为模板，通过PCR从eDNA中扩增出目的基因，扩增产物经初步鉴定后将其克隆入pMD18-T载体，进行双酶切及PCR扩增鉴定，获得阳性重组质粒，进行测序分析和同源性比较。阳性克隆的质粒亚克隆至真核表达质粒peDNA3．1（＋），转化感受态大肠埃希菌（E-coli）DH5α，筛选阳性克隆，用PCR和双酶切鉴定阳性重组子。结果RT—PCR扩增出1条约1201bp的特异性条带，重组质粒双酶切和以质粒为模板的PCR结果与预期相符．DNA序列分析与GenBank已知的基因序列同源性为99％。构建了真核重组表达质粒peDNA3．1-BmCP。结论成功构建了周期型BmCP原核和真核重组表达质粒，为进一步研究该基因的功能提供了条件。 相似文献
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目的探讨老年急性结石性胆囊炎经皮经肝胆囊穿刺引流术后手术时机的选择。方法回顾性分析我院自2015年3月~2017年3月收治的老年急性结石性胆囊炎患者的临床资料,按经皮经肝胆囊穿刺引流术与腹腔镜胆囊切除术间隔时间将符合纳入与排除标准的患者分为三组,其中经皮经肝胆囊穿刺引流术后2个月内行腹腔镜胆囊切除术患者纳入A组(n=70),经皮经肝胆囊穿刺引流术后2~4个月内行腹腔镜胆囊切除术患者纳入B组(n=60),经皮经肝胆囊穿刺引流术后行腹腔镜胆囊切除术时间4个月以上患者纳入C组(n=62),对比三组患者腹腔镜胆囊切除术时中转开腹病例、手术时间、术中失血量、术后腹腔引流导管留置时间、住院时间,并统计腹腔镜胆囊切除术后腹腔出血、胆道损伤、胆漏等并发症发生率。结果三组急性结石性胆囊炎患者在中转开腹比例、手术时间、术中失血量、腹腔引流导管留置时间、住院时间等一般手术情况上比较,其差异均有统计学意义(P0.05),B组中转开腹比例、术中失血量最少、手术时间、腹腔引流导管留置时间、住院时间最短;B组术后并发症发生率仅为6.67%,低于A组的16.67%及C组的10.00%,但对比差异无统计学意义(P0.05)。结论老年急性结石性胆囊炎经皮经肝胆囊穿刺引流术后2~4个月内行腹腔镜胆囊切除术或能取得更佳手术获益,不仅能减少术中中转开腹比例,也更利于患者术后康复。 相似文献
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背景:人骨髓间充质干细胞的增殖和分化可以修复组织器官损伤,随着年龄增长人体组织修复能力减弱,是否人骨髓间充质干细胞增殖能力随年龄增长而减弱尚不清楚.目的:观察年龄对人骨髓间充质干细胞体外增殖能力的影响.方法:15份骨髓标本来源于青岛市中心医院骨折或行髋关节置换患者,其中儿童、成年人、老年人各5例,年龄分别为7～12岁,20～55岁,60～90岁.抽取人骨髓组织,采用密度梯度离心法分离出单核细胞并接种于培养瓶内,在第5天计数集落形成单位;当贴壁细胞融合后进行传代,第1代细胞分两种方式进行培养:192个细胞接种于2个96孔板观察单细胞克隆形成能力,12 500个细胞以5×103/cm2接种于培养瓶内并以此密度连续传代观察细胞增殖率.结果与结论:不同年龄人群骨髓间充质干细胞体外培养集落形成单位和细胞增殖率无明显区别(P > 0.05),但单细胞克隆形成能力随年龄增长而下降(P < 0.01).提示骨髓间充质干细胞的数量和增殖能力没有随年龄的增长而下降,但其中能形成单细胞克隆未定向干细胞的数量随年龄的增长而减少. 相似文献
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目的 研究C-反应蛋白水平变化在普外科手术患者风险评估中的意义。方法 对63例手术患者入院后24h和术后第1天,分别测定C-反应蛋白水平,并应用POSSUM评分系统进行评分,记录并发症发生情况,将患者分为并发症组和非并发症组：结果并发症组与非并发症组入院后CRP值与入院后POSSUM分值均呈正相关（r=0．431,P=0．011;r=0．403,P=0．030）,并发症组入院后CRP值与术后第1天POSSUM分值呈正相关（r=0．494,P=0．003）,非并发症组入院后CRP值与术后第1天POSSUM分值呈正相关（r=0．395,P=0．034）。两组入院后CRP值与术后第1天CRP值差异均有统计学意义（t=-5．249,P=0．000;t=-6．456,P=0．000）。两组术后第1天CRP值与术后第1天POSSUM分值均不相关（r=0．065,P=0．713;r=0．285,P=0．134）。两组之间入院后及术后第1天CRP值差异均无统计学意义（t=-1．478,P=0．145;f=-0．975,P=0．333）：结论 入院后24h的CRP值作为普外科手术患者风险评估的一个指标,有一定的临床意义。 相似文献