成纤维细胞生长因子在小鼠胰腺发育中的作用

成纤维细胞生长因子(FGFs)家族与胰腺的发育密切相关.小鼠胰腺发育期间,FGFs与胰腺发育相关的转录因子协同调控祖细胞的增殖、分化,对祖细胞的分化方向具有极大的指导性.同时,对腺泡、导管和胰岛的形态演变及功能成熟也具有一定的调控作用.其中,FGF21主要调控胰岛功能成熟,FGF2、FGF4、FGF7以及FGF10在胰...     

anoctamin 1在中国仓鼠卵巢细胞中的表达及其离子通道特性

目的： 探讨anoctamin 1在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中的表达情况,分析其离子通道特性,为研究钙激活氯离子通道的生理功能提供实验依据。方法： PCR方法获得anoctamin 1编码区基因,构建pcDNA3.1-anoctamin 1真核表达载体。脂质体转染anoctamin 1至CHO中,抗生素筛选获取稳定表达anoctamin 1的CHO株。应用RT-PCR技术和倒置荧光显微镜检测anoctamin 1于CHO中的表达和分布情况。应用卤族元素敏感的黄色荧光蛋白双突变体YFP-H148Q/I152L检测anoctamin 1离子通道的功能。以加入calcimycin和高浓度碘离子的PBS缓冲液的为实验组,未加入calcimycin和高浓度碘离子的PBS缓冲液的为对照组。结果： 限制性内切酶酶切后的琼脂糖凝胶电泳和测序,目的基因anoctamin 1克隆至真核表达载体pcDNA3.1;RT-PCR和倒置荧光显微镜观察,CHO在mRNA和蛋白水平表达anoctamin 1,且anoctamin 1蛋白主要表达于CHO膜上;荧光淬灭动力学实验,CHO表达的anoctamin 1具有转运碘离子的作用,且实验组碘离子转运速度显著高于对照组(P<0.05)。结论： anoctamin 1可高效表达于CHO膜;CHO表达的anoctamin 1具有经典钙激活氯离子通道特性。     

人参皂甙Rg3抗肿瘤作用的研究进展

目的 探讨人参皂甙Rg3抗肿瘤的作用及机制.方法 参阅国内外相关文献就人参皂甙Rg3抗肿瘤的作用做一综述.结果 人参皂甙Rg3作为中药抗肿瘤药物具有促进肿瘤细胞的凋亡、抑制肿瘤生长、抗肿瘤细胞的粘附、侵袭和转移、抑制肿瘤新生血管形成作用,同时,具有与化疗药物联合应用的减毒增效作用,提高机体免疫力,逆转肿瘤细胞的多药耐药性等作用.结论 充分发掘祖国传统药物的新作用,具有较大的应用价值.     

水通道蛋白4小分子抑制剂的筛选和验证

目的:采用高通量筛选方法筛选出抑制视神经脊髓炎(NMO)-IgG与水通道蛋白4(AQP4)结合的小分子.方法:将FRT-AQP4细胞分为阴性对照组(不加小分子化合物)和筛选组,采用化学发光法检测辣根过氧化物酶(HRP)活性.将V79-AQP4细胞分为抑制剂组(neosutchuenenine)和二甲基亚砜(DMSO)组...     

医学院校生物技术专业实验教学改革与实践

近几年来,随着生物医药产业和医学生物技术的快速发展,特别是生物技术领域各种新方法、新技术的集中应用,具有较强实验能力和科研素质的医学生物技术人才的需求与日俱增.因此,对于医学院校的生物技术专业来说,实验教学显得尤为重要,对于培养学生实验能力、创新能力、独立工作能力有不可替代的重要作用.     

人参皂甙Rg3 抗肿瘤作用的研究进展

人参皂甙-Rg3(ginsenoside Rg3,GS-Rg3)作为中药抗肿瘤药物,具有促进肿瘤细胞的凋亡、抑制肿瘤生长、抗肿瘤粘附、侵袭和转移、抑制肿瘤新生血管形成等作用,同时,与化疗药物联合应用具有减毒增效作用、提高机体免疫力、逆转肿瘤细胞的多药耐药性等作用,受到广泛关注.     

钙激活氯通道ANO1在小鼠心肌细胞的表达及其功能鉴定

目的:探讨钙激活氯通道蛋白anoctamin 1(ANO1)在小鼠原代培养心肌细胞中的表达及其功能特性。方法:采用胰酶与胶原酶共同消化,联合2次差速贴壁法获得C57BL/6小鼠原代心肌细胞;并用免疫荧光染色法检测α-横纹肌肌动蛋白,以鉴定心肌细胞纯度;应用RT-PCR检测小鼠心肌细胞ANO1 mRNA的表达;免疫印迹检测ANO1蛋白在小鼠心肌细胞的表达情况;应用荧光淬灭动力学实验检测ANO1钙激活氯通道的功能特性。结果:RT-PCR结果表明原代培养的小鼠心肌细胞表达ANO1 mRNA。免疫印迹实验结果显示原代培养的小鼠心肌细胞表达ANO1蛋白。荧光淬灭动力学实验证实表达于小鼠心肌细胞的ANO1具有钙激活氯通道典型的阴离子转运功能特性。结论:ANO1在小鼠心肌细胞中有明确表达,并具有钙激活氯离子通道特性,提示ANO1是钙激活氯通道的分子基础。     

不同孕期羊水间充质干细胞体外培养方法的比较

背景:以往对羊水间充质干细胞的培养多采集孕中期羊水,对妊娠其他阶段羊水进行间充质干细胞培养的研究还很少,特别是系统地对不同孕期羊水和不同培养基进行间充质干细胞培养的效果还未见报道.目的:比较不同孕期羊水中间充质干细胞体外培养的效果.方法:采用两种不同细胞培养基分别对60份妊娠时间为15~42周的羊水进行间充质干细胞的分离培养,观察间充质干细胞培养过程中生长状况及间充质干细胞培养成功率;细胞化学染色法检测间充质干细胞的化学性质;MTT法检测传代后间充质干细胞的生长曲线.结果与结论:采用含体积分数为10%胎牛血清的PRMI-1640培养基和AmnioMAXⅡ complete羊水专用细胞培养基对孕期为37~42周羊水的间充质干细胞培养成功率分别为8%和44%,孕期为21~36周羊水的间充质干细胞成功率分别为20%和60%.而孕期为15~20周的羊水用两种培养基培养成功率为100%.细胞化学染色结果显示:POX、SB(-),ACP、PAS、AENE(+),而NAP有1%为(+),不同孕期染色结果无差异.MTT法测定羊水间充质干细胞的生长曲线呈"S"形.孕期在15~36周的羊水间充质干细胞可以传15代以上仍然旺盛,而孕期为37~42周的羊水间充质干细胞传10代即表现为生长缓慢.结果表明采用AmnioMAXⅡ complete羊水专用细胞培养基可以明显提高晚期羊水间充质干细胞培养的成功率.羊水的最佳采集时间为15~20周.