活性载体法从鱿鱼肝脏中提取核酸的最佳条件的研究

目的　探索用实验室构建的活性载体从鱿鱼肝脏中提取核酸的最佳条件。方法　首先在 3 7℃培养基 p H=6.0时 ,将 15 %、 10 %、 5 %、 3 %浓度的载体加入一定量肝匀浆分别培养 2 4、 3 6、 4 8、 72 h,经 4℃ 40 0 0 r/ m in离心处理 ,分别测其水相、沉淀中的核酸含量 ,并比较找出总核酸含量最高的载体浓度与培养时间条件 ;然后 ,利用得到的载体浓度和培养时间 ,将肝匀浆和载体的混合物置于不同培养温度、培养基 p H值、光照条件等情况下培养 ,再经 4℃ 4 0 0 0 r/ m in离心处理 ,测其水相与沉淀中核酸含量 ,比较找出总核酸含量最高的各种条件。结果　活性载体浓度 10 % ,培养 3 6h,测其总核酸含量最高。载体在无氧、无光照、p H=6.0、温度 3 7℃时其活性最高 ,测得其核酸含量最高。结论　实验室构建的活性载体法提取核酸的最佳条件为 :温度 3 7℃、p H =6.0、无氧、无光照、浓度 10 %、培养 3 6h     

TGF-β对原代培养肝细胞及肝癌细胞BEL7401生长作用的影响

目的 研究转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）对正常大鼠肝细胞和肝肿瘤细胞的影响。方法 分离和培养原代大鼠肝细胞,培养ＢＥＬ４０１肝癌细胞,通过测定细胞ＤＮＡ合成、细胞活性（ＭＴＴ）及碱性磷酸酶活性,研究ＴＧＦ－β对正常大鼠肝细胞和肝肿瘤细胞的影响方式及可能的作用途径。结果 实验发现,ＴＧＦ－β可以刺激ＢＥＬ７４０１肝癌细胞的增生,促进其ＤＮＡ合成,并增强其活性ＳＴＧＦ－β对原代培养肝细胞ＤＮＡ合成无明显影响,对其活性有明显的抑制作用。实验还发现,ＴＧＦ－β明显刺激ＢＥＬ７４０１肝癌细胞中的碱性磷酸酶增高,同时抑制原代培养肝细胞的碱性磷酸酶活性。结论ＴＧＦ－β对正常细胞和肝癌细胞ＢＥＬ７４０１的生长有不同的影响作用,这种结果可能是通过不同的细胞信号传导途径实现的。     

讨论课在生物化学教学中的实践与体会

讨论课是本科教学的重要组成部分,是在教师指导下以学生活动为主的教学形式.讨论课已经在山西医科大学实施了将近6年,根据教研室开展讨论课的情况,对讨论课的实施过程、实施效果进行了总结分析,意图探索更理想的讨论课教学模式和获得更理想的教学效果.     

论疾病控制系统人才资源的合理开发利用

人才资源是经济发展的重要资源。人才的质量和人才资源的开发水平决定技术创新能力 ,决定经济建设的质量、水平和速度。抓住机遇 ,加快发展的根本途径 ,关键在于能否合理开发和利用人才资源。卫生改革的主要内容是分别组建承担监督执法任务的卫生监督所和承担技术支撑与技术服务职能的疾病预防控制机构 ,新的疾控机构不是原防疫站的改版 ,而是一个完全新型的新机构 ,职能更加明确 ,工作内容更加扩大 ,除承担原急性传染病防治任务外 ,还要承担慢性非传染性疾病、卫生监测、健康监护、检验出证、健康教育、卫生学评价、预防医学诊疗服务和咨询…     

核转录因子-κB在FK506保护肝脏缺血再灌注损伤中的作用

目的　研究FK5 0 6能否抑制缺血再灌注损伤肝脏核转录因子 κB(NF κB)的结合活性。方法　采用大鼠部分肝血供被阻断的缺血再灌注损伤模型 ,左半肝缺血 90min ,再灌注分 0、30min ,1、2、4h等时点。实验组术前静脉注射FK5 0 6 ( 0 .3mg/kg体重 ) ,观察对照组、缺血再灌注组及FK5 0 6处理组间肝组织中NF κB的结合活性 (凝胶滞留电泳方法 )。结果　肝脏缺血再灌注损伤时 ,NF κB与其特异性调控序列的结合活性增高且具有时相性 ,再灌注 1～ 2hNF κB结合活性较强 ,再灌注 4hNF κB结合活性减弱。FK5 0 6可以抑制NF κB与其特异性调控序列的结合活性。结论　FK5 0 6通过抑制NF κB的结合活性改善肝脏缺血再灌注损伤。     

人胰岛素突变体基因的融合表达

目的　以 pTXB1作为融合表达载体 ,构建人胰岛素突变体 (M insulin)的基因表达克隆 ,表达及纯化。 方法　基因合成胰岛素突变体的cDNA序列 ,酶切后装入融合表达质粒 pTXB1,基因测序正确后转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,诱导表达 ,初步纯化。结果　融合蛋白的分子量约为 330 0 0 ,表达量占菌体总蛋白的 5 0 %以上。融合蛋白主要以包涵体的形式存在 ,洗涤包涵体后融合蛋白的纯度达到 85 %以上。Western blot表明表达蛋白具有胰岛素抗原活性。活性测定显示 ,每升诱导培养后的菌液表达产物中 ,具有的放射免疫活性为 0 .5U。结论　成功地构建了人胰岛素突变体的融合表达体系 ,为进一步的研究奠定了基础。     

上海某社区居民感冒抗生素使用状况及其影响因素分析

20 0 2年 6月在上海某社区对 30 0名社区居民进行感冒与抗生素使用情况调查。发现因感冒使用抗生素者 15 2人 ,其中抗生素来源于医院占 5 6 6 % ,使用抗生素原因中“医生的决定”占5 2 2 % ,而抗生素使用越多医疗费用越高 (P =0 0 0 1)     

几种脂质体对Li-7肝癌细胞株的转染效率研究

目的比较Lipofectamine2000、lipoplexes和apoE-lipoplexes三种脂质体对Li-7肝癌细胞的转染效率。方法构建普通阳离子脂质体lipoplexes和载脂蛋白apoE修饰脂质体apoE-lipoplexes;使用Lipofectamine2000,lipoplexes和apoE-lipoplexes三种脂质体运载以EGFP为报告基因的pGenesil-1质粒转染Li-7肝癌细胞,通过荧光显微镜观察EGFP蛋白的表达,流式细胞术检测三种脂质体的转染效率。结果 Lipofectamine2000、lipoplexes和apoE-lipoplexes三种脂质体转染效率分别为(18.63±0.57)%,(24.07±0.91)%,(28.93±0.50)%,3组间两两比较均有显著性差异(P<0.01)。结论 Li-7肝癌细胞的转染效率与脂质体的结构有关,提示脂质体结构改造可能成为提高转染效率的新策略。     

人卵泡液蛋白质组学的研究进展

卵泡液是由卵母细胞、颗粒细胞和膜细胞等共同分泌的一种含多种蛋白质的生物液,其作为卵母细胞生长的微环境或培养基,直接影响到卵泡的发育和卵母细胞的成熟。过去十几年,对卵泡液蛋白质组学的研究主要集中于新蛋白筛选及疾病相关蛋白等的识别上。本文从卵泡液新蛋白的筛选、年龄相关生物学标志鉴定、确定卵泡成熟标志、疾病相关标志的筛选和体外受精(IVF)成功的标志等5方面介绍近年卵泡液蛋白质组学的相关研究。筛选和鉴定某些生殖和发育相关的关键蛋白,并可能成为卵泡液中的生物标志,可用于预测卵母细胞的质量、受精及胚胎发育潜能。     

子宫内膜中的成体干细胞

背景:近年来子宫干细胞尤其是子宫内膜干细胞研究有了新的突破,多个学者用不同方式证明了子宫内膜干细胞的存在。目的:介绍子宫干细胞存在的依据、位置及表面标志物。方法:应用计算机检索1995-01/2010-12清华同方数据库相关文章,检索词为"子宫内膜干细胞",并限定文章语言种类为中文。同时计算机检索PudMed数据库相关文章,检索词为"endometrium stemcell",并限定文章语言种类为English。共检索到文献233篇,最终纳入符合标准的文献30篇。结果与结论:近年来子宫内膜干细胞的分离与鉴定研究有了很大的进展,但子宫内膜干细胞的特异性标志物仍在探索中。文章就克隆形成能力、标记滞留细胞实验及组织重建能力等多种方法对子宫内膜干细胞存在的可能性,存在部位以及可能的表面标志物等进行了综述。