雌激素对Aβ25-35致PC12细胞膜流动性改变的影响(英文)

目的观察可溶性Aβ25—35作用下PC12细胞膜流动性的改变及17βE_2对此改变的影响。方法培养的PC12细胞分为空白对照组,Aβ损伤组及雌激素干预组,根据浓度梯度雌激素干预组再分为五个剂量亚组,采用荧光偏振法动态检测不同组PC12细胞不同时间膜流动性的改变。结果Aβ损伤组在加入5μM可溶性Aβ25-35后各时间点,与空白对照组相比,其微粘度η值均明显升高(P<0.01);17βE_2干预组在10~(-10)M浓度下各时间点其η值与Aβ损伤组比较均没有显著性差异(P>0.05);而在10~(-9)-10~(-6)M浓度下各时间点η值与Aβ损伤组比较均显著降低(P<0.01或P<0.05),且这种作用具有剂量依赖性,17βE2 10~(-9)、10~(-8)、10~(-7)、10~(-6)M干预组与Aβ损伤组相比,在24h时PC12细胞微粘度η分别降低了36.4%、49.6%、60%、68.4%。结论5μM可溶性Aβ25—35使PC12细胞微粘度明显升高,膜流动性明显下降;雌激素具有改善膜流动性的神经元保护作用,且这种作用具有剂量依赖性。     

Ⅰb2-Ⅱb期宫颈鳞癌新辅助化疗前后Bcl-2和Bax的表达差异

目的 在mRNA和蛋白水平检测凋亡相关基因Bcl-2,Bax在山西地区宫颈鳞癌Ⅰb2-Ⅱb期癌组织新辅助化疗前后特异性表达差异,揭示凋亡通路在新辅助化疗中的作用机制. 方法 新辅助化疗后与新辅助化疗前的宫颈鳞癌Ⅰb2-Ⅱb期癌组织经过无菌取材,分别应用50例自身对照样本应用免疫组化及RT-PCR方法 检测凋亡相关基因Bcl-2及Bax的差异改变. 结果 免疫组化及RT-PCR方法 验证结果 相一致:新辅助化疗后宫颈组织较新辅助化疗前Bax表达增强,Bcl-2表达明显降低.二者进行单因素方差分析证明其表达差异有统计学意义(P<0.05). 结论 新辅助化疗前后凋亡相关基因Bcl-2,Bax基因表达有显著差异,新辅助化疗可增加癌细胞凋亡,降低癌细胞代谢速率、抑制癌细胞血管增殖而作用于宫颈鳞癌Ⅰb2-Ⅱb期癌组织,从而辅助宫颈鳞癌临床手术或放化疗.     

上海市社区卫生服务站建设相关问题调查与探讨

目的探讨社区卫生服务发展建设存在的问题，为完善社区卫生服务功能、促进规范服务提供依据。方法对本市5个区12个社区卫生服务中心的50个社区卫生服务站；包括中心主任与分管科长32名，站长50名进行问卷调查。调查内容包括中心基本情况，服务站的基本情况、人员配置、设施设备及服务开展情况等。结果本市社区卫生服务站的布局不尽合理，工作忙闲不一，服务量极差达20倍；服务站社区护士不足，团队的全科和中医医生各有约1／4具不稳定性；服务站的基本设施、设备配置状况与卫生部的标准存在一定差距，且存在两级化，医保支付系统拥有率仅为24％；能提供外伤处理、临终关怀、计划免疫及急救医疗的服务站比较少；制度建设存在薄弱环节。结论上海市城区社区卫生服务站的合理布局要完善，硬件建设投入应加大，人才队伍建设需加强，配套制度建设应加速。     

基因芯片筛查Ⅰb2～Ⅱb期宫颈鳞癌新辅助化疗前后差异表达基因

目的应用基因芯片技术筛查山西地区宫颈鳞癌Ⅰb2~Ⅱb期癌组织新辅助化疗(NACT)前后特异性差异表达基因,全面客观地描绘出NACT在宫颈鳞癌Ⅰb2~Ⅱb期的主要作用途径及机制。方法利用全基因组差异表达芯片对NACT前后癌组织差异表达基因进行筛查后将差异表达基因系统归类并应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法验证。结果筛选出差异表达的基因823个,显著变化(2±3)倍的有75个,(2±3)倍以上增高表达的48个;(2±3)倍以下降低表达的27个,分属于原癌基因、抑癌基因、凋亡基因、核增殖因子、生长因子及血管增殖因子,信号转导因子,金属基质蛋白酶类,转录因子等。RT-PCR法验证结果与芯片结果相一致。结论NACT前后基因表达谱存在较大差别,NACT主要通过抑制癌细胞增殖分化,促进其凋亡,降低癌细胞代谢速率、控制金属基质蛋白酶的水解防止癌细胞扩散,抑制癌细胞血管增殖,减少血流等多方面作用于癌组织,从而达到其临床疗效。     

内源性血管生成抑制因子Arresten的序列测定及在E.coli BL21中的表达

目的构建内源性血管生成抑制因子Arresten基因的原核表达载体,并对其进行序列测定和在E.coli BL21中进行表达。方法从健康产妇的胎盘组织中提取总RNA,经反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出Arresten基因,对其序列测定后构建重组质粒pBV220-Arr转化E.coli BL21进行原核表达。结果成功筛选出Arresten基因,并将基因序列和蛋白序列提交基因库,成功构建了重组质粒pBV220-Arr,重组质粒在菌株中获得表达。结论构建的原核表达重组体pBV220-Arr能高效表达重组Arresten蛋白。     

5-Aza-CdR对结肠癌细胞增殖及抑癌基因PGDH表达的影响

目的:探讨5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对SW480细胞生物学行为及15-羟基前列腺素脱氢酶(15-hydroxyprostaglandin dehydrogenase,PGDH)蛋白表达的影响.方法:5-Aza-CdR处理SW480细胞,通过MTT法、平板克隆实验观察细胞生长活性的变化,甲基化特异性PCR检测PGDH启动子区的甲基化状态,Western印迹法检测PGDH蛋白表达改变,并进行细胞周期分析.结果:SW480细胞经5-Aza-CdR处理后,与未处理对照组相比,生长速度出现不同程度减慢;实验组细胞(不同浓度5和10 μmol/L)较对照组细胞的克隆形成率明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);PGDH启动子区甲基化程度降低,无PGDH蛋白表达的SW480细胞检测到蛋白重新表达.5-Aza-CdR处理SW480细胞后,能够延缓细胞周期G1/S期进程,阻滞细胞干G期.结论:在结肠癌细胞系中,PGDH基因启动子CpG岛的异常甲基化修饰可能导致其表达缺失,5-Aza-CdR能够恢复PGDH基因的表达,为结肠癌的去甲基化治疗提供理论依据.     

协和牌汉龙降糖胶囊对糖尿病小鼠降糖作用的实验研究

目的　观察协和牌汉龙降糖胶囊对小鼠的降糖效果。方法　实验设计 2组 ,正常组和四氧嘧啶模型组 ,测定协和牌汉龙降糖胶囊对正常小鼠及四氧嘧啶所致高血糖小鼠的体重、空腹血糖、餐后血糖及糖耐量等指标影响。结果　协和牌汉龙降糖胶囊对正常小鼠的体重、空腹血糖、餐后血糖及糖耐量无显著影响 ;对高血糖小鼠的空腹和餐后血糖的影响实验中 ,中、高剂量组动物各时间点的血糖值均明显低于模型对照组 ,提示协和牌汉龙降糖胶囊明显降低高血糖小鼠空腹和餐后血糖 ;协和牌汉龙降糖胶囊对高血糖小鼠糖耐量实验表明 ,中、高剂量组给葡萄糖 0 5h后血糖升高的幅度明显低于模型对照组 ,说明该样品对四氧嘧啶所致高血糖小鼠的糖耐量有一定调节作用。结论　协和牌降糖胶囊是具有降血糖功效的新制剂     

人纤溶酶原饼环区5的cDNA序列及其氨基酸序列分析

目的　对人纤溶酶原饼环区 - 5 (h PK- 5 )因子的 c DNA序列和氨基酸序列进行综合分析 ,为其基因工程表达载体的构建奠定理论基础。方法　从国际生化技术信息中心 (NCBI)的 Gene Bank数据库中调取人纤溶酶原的基因和全序氨基酸序列 ,结合文献报道结果获得 h PK- 5基因序列和氨基酸序列 ,利用蛋白质处理软件cd3d- win32、核酸分析软件 DNAclub和 SMS生物综合处理软件对 h PK- 5的基因序列和氨基酸序列进行综合分析。结果　选取 Eco RV(1890 )和 Sca I(10 91、1397)可以从纤溶酶原的基因序列中酶切获取一长为 4 93bp的基因片段 ,其中含有 h PK- 5序列 ;在 h PK- 5序列中间没有常见的限制性内切酶切割位点 ,酶切时可以保证外源基因序列的稳定性 ,h PK- 5基因序列中 ,G+C与 A +T相比略占优势 ,可以推断该基因序列的相对稳定性较高 ;氨基酸序列分析结果显示 ,在对 h PK- 5因子进行序列构建时 ,应根据其野生源蛋白的碱基及氨基酸序列特点 ,使用其随机频率的三联密码子 ,以保证后期基因表达蛋白具有高活性的可能性。结论　经多种生物软件分析 ,可以认为h PK- 5因子适合于利用基因工程技术体系制备 ,基因序列的相对稳定性较高     

蛛网膜下腔移植磁标骨髓间充质干细胞治疗脊髓损伤

背景：干细胞移植可以重建中枢神经系统的结构和功能,近年来引起了广泛的关注。 目的：探讨超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞对兔脊髓损伤神经功能恢复的作用。 方法：采用密度梯度离心法和贴壁法体外分离培养兔骨髓间充质干细胞。制作兔脊髓损伤模型,并在蛛 网膜下腔置管以备移植。将实验白兔随机分为3组：标记组移植超顺磁性氧化铁标记细胞;未标记组移植未标记细胞;对照组不移植细胞只注射PBS液。 结果与结论：两移植组在细胞移植14 d后运动功能BBB评分高于对照组,差异有显著性意义(P < 0.05);但两组间差异无显著性意义(P > 0.05)。细胞移植后1,7,14,21,28,35 d,脊髓损伤区域局部组织上出现大量含蓝色铁颗粒的细胞。经蛛网膜下腔移植标记骨髓间充质干细胞可定向迁移到脊髓损伤区域,并能促进脊髓损伤神经功能恢复。