内源性血管生成抑制因子A rresten在E.coli JM109中的表达及抗新生血管生成的药理学研究

目的构建内源性血管生成抑制因子Arresten基因的原核表达载体,并进行表达,抑制新生血管的药理学实验中发现,该表达产物具有抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管生长的功能。方法从健康产妇的胎盘组织中提取总RNA,经逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出Arresten基因,构建重组质粒pBV220-Arr转化E.coli JM109进行原核表达,大量表达提取Arresten蛋白,用鸡胚绒毛尿囊膜实验进行活性测定。结果成功构建的重组质粒pBV220-Arr在E.coliJM109菌株中2~8 h均可获得表达,其中诱导4 h表达效率最高,Arresten蛋白可明显抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管生长,活性功能明显强于血管抑素。结论成功构建Arresten基因重组质粒pBV220-Arr,并可在E.coli JM109菌株中获得表达,Arresten蛋白具有明显的抑制血管生成的作用。     

鼠模型基因多态性和神经管畸形

神经管畸形（neural tube defects,NTDs）是一种高发的先天畸形.它是由于在胚胎发育过程中,神经管闭合不全所引起的一组缺陷,包括无脑畸形、脑膨出、脊柱裂、脑脊膨出等.其发生率高,后果严重.NTDs是多因素疾病,是遗传和环境因素共同作用的结果.     

PYK-2在PGE_2诱导大肠癌细胞侵袭转移中的作用

目的 研究富含脯氨酸的酪氨酸激酶 2(proline rich tyrosine kinase 2,PYK 2)在前列腺素E2(PGE2)诱导大肠癌SW480细胞侵袭转移中的作用。方法 实验分为A、B、C、D四组,分别为未处理组,PGE2组,PGE2+SC19220(EP1抑制剂)组,PGE2+BAPTA AM(胞内Ca2+螯合剂)组。通过 RT PCR检测SW480中PGE2四种EP(EP1,EP2,EP3,EP4)受体的表达,应用Western blotting检测SW480细胞中PYK 2蛋白的表达,应用Transwell实验观察各组SW480细胞侵袭转移能力的改变。结果SW480表达PGE2的三种EP受体,EP1,EP2和EP4,PGE2可促进EP1的表达;经PGE2作用后,10分钟内PYK 2磷酸化水平逐渐增加,0分钟、5分钟、10分钟检测结果相比差异均有统计学意义(P<0.05),30分钟与0分钟检测结果相比差异无统计学意义(P>0.05);C组、D组与B组相比PYK 2磷酸化水平明显下降(P<0.05),大肠癌细胞侵袭转移能力显著降低(P<0.05)。结论 PGE2可能通过Ca2+,EP1促进PYK 2的磷酸化,从而进一步诱导大肠癌细胞的侵袭转移过程。     

社区老年人卫生服务有赖于全科医疗

目的探讨社区老年人慢性病的防治和管理。方法对长风地区100位≥60岁老年人健康影响因素进行调查分析。结果老年人各种慢性病患病率为82%。平均每位老年人患病1.62种。老年人对社区卫生服务需求中较迫切的是就近医疗占65%,健康教育,上门服务各占42%与40%。结论要进一步在全科医疗实践中探索老年社区卫生服务模式。建立以老年人为中心,家庭为单位,社区为范围,社区服务中心为基础的全方位检测的基础服务系统。对老年人实施三级监护,提供三级卫生服务,开展老年人健康教育,健康促进,改变不良的生活方式,改善健康功能,提高生活质量,降低医疗保健费用。     

第四届全国白内障人工晶体学术会议纪要

第四届全国白内障人工晶体学术会议纪要全国第四届白内障人工晶体学术会议，于１９９４年１０月９～１３日在杭州市召开。来自全国２９个省市自治区的代表共２２５名。会议收到论文３００余篇，其交流内容丰富、信息量大，包括基础理论、手术技术、手术并发症的预防、手术...     

插入突变法构建人肝细胞生长因子β链可表达基因序列

目的 通过插入突变法,转录前加工、修饰人肝细胞生长因子β基因,构建人肝细胞生长因子β基因的可表达全序列,以使肝细胞生长因子β基因可在细胞内单独表达,用于研究肝细胞生长因子β基因在生物体内的生物学作用。方法 从人肝细胞中提取总ＲＮＡ,反转录成为含肝细胞生长因子β结构基因区序列的ｃＤＮＡ,在此ｃＤＮＡ序列结构基因区前插入翻译起始密码子、ＳＤ序列、ＳＤ序列间隔等调节序列和限制性内切酶接头;ＰＣＲ扩增β基     

凝胶滞留电泳法测定大鼠肝组织细胞核NF—kB结合活性

应用大鼠肝组织细胞核蛋白提取物与特异NF－kB基因探针序列结合,经凝胶滞留电泳分析其结合能力。方法操作简便易行、重复性好。该方法的建立,为进一步研究核转录因子活性及其调控基因的表达,提供了一种可行的方法。     

鱿鱼肝脏中核酸的纯化工艺研究

采用离子交换层析,一步分离纯化鱿鱼肝脏中的核酸初抽提样品,层析条件填料为DEAE-纤维素,色谱柱8cm×1cm,流速1ml/min,260nm紫外检测,收集以0.6mol/LNaCl(pH7.4Tris-Cl缓冲液)为洗脱相时的洗脱液,得率为85%～89%,经透析、低压冷冻干燥,可获得纯度为87%～90%的核酸产品,可用于医药及食品工业.     

人肝细胞生长因子β链基因的克隆及表达载体的构建

目的 构建重组人肝细胞生长因子－β（rhHGF-β)的克隆表达体系。以期进一步研究HGF基因的表达调控及HGF的生物学、医学作用。方法 从人胎肝细胞中提取总RNA,运用RT－PCR技术,对HGF－β基因转录前加工修饰,与载体重组,构建rhHGF-β的克隆,并对克隆进行限制性内切酶酶切图谱分析,对重组体中插入的外源基因进行序列分析。结果 获得了rhHGF-β完整的cDNA序列,重组体克隆的酶切结果与设计一致。结论 首次成功地构建了人肝细胞生长因子－β（rhHGF-β）的克隆表达体系。     

如何在分子生物学教学中培养研究生的科研创新能力

分子生物学是硕士研究生需要掌握的一门重要学科。在教学过程中,优化理论教学内容,丰富教学方法,引入多媒体教学模式以及改革实验教学和考核办法,有助于培养研究生良好的科学精神和创新能力,从而使分子生物学的教学迈上一个新台阶。